| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 第一章 绪论 | 第11-25页 |
| 1.1 淀粉与普鲁兰糖 | 第11-12页 |
| 1.1.1 淀粉 | 第11-12页 |
| 1.1.2 普鲁兰糖 | 第12页 |
| 1.2 淀粉脱支酶和普鲁兰糖降解酶 | 第12-14页 |
| 1.2.1 淀粉脱支酶 | 第12-14页 |
| 1.2.2 普鲁兰糖降解酶 | 第14页 |
| 1.3 普鲁兰酶 | 第14-24页 |
| 1.3.1 普鲁兰酶的分类及系统发育 | 第14-16页 |
| 1.3.2 普鲁兰酶的分子结构及催化机理 | 第16-20页 |
| 1.3.3 普鲁兰酶的性质 | 第20-21页 |
| 1.3.4 普鲁兰酶的应用 | 第21-22页 |
| 1.3.5 普鲁兰酶的分子改造 | 第22-23页 |
| 1.3.6 普鲁兰酶的高效表达 | 第23页 |
| 1.3.7 普鲁兰酶的固定化 | 第23-24页 |
| 1.4 选题的立题依据、研究意义及主要研究内容 | 第24-25页 |
| 1.4.1 立题依据及研究意义 | 第24页 |
| 1.4.2 主要研究内容 | 第24-25页 |
| 第二章 酸性耐热普鲁兰酶的筛选及其基因的克隆与表达 | 第25-46页 |
| 2.1 前言 | 第25页 |
| 2.2 材料与方法 | 第25-30页 |
| 2.2.1 材料 | 第25-26页 |
| 2.2.2 方法 | 第26-30页 |
| 2.3 结果与分析 | 第30-41页 |
| 2.3.1 酸性耐热普鲁兰酶的筛选及其生产菌株的鉴定 | 第30-31页 |
| 2.3.2 Anoxybacillus sp.WB42的生长条件 | 第31页 |
| 2.3.3 Anoxybacillus sp.WB42的产酶特征 | 第31-34页 |
| 2.3.4 Anoxybacillus sp.WB42普鲁兰酶基因的克隆与序列分析 | 第34-36页 |
| 2.3.5 Anoxybacillus sp.WB42普鲁兰酶基因在大肠杆菌中的表达 | 第36-37页 |
| 2.3.6 重组PulWB42的酶学性质 | 第37-41页 |
| 2.4 讨论 | 第41-45页 |
| 2.5 本章小结 | 第45-46页 |
| 第三章 Anoxybacillus sp.WB42普鲁兰酶末端结构域的功能 | 第46-60页 |
| 3.1 前言 | 第46页 |
| 3.2 材料与方法 | 第46-47页 |
| 3.2.1 Anoxybacillus sp.WB42普鲁兰酶三维结构的同源建模 | 第46页 |
| 3.2.2 Anoxybacillus sp.WB42普鲁兰酶基因突变体的构建与表达 | 第46-47页 |
| 3.2.3 Anoxybacillus sp.WB42普鲁兰酶突变体的酶学性质表征 | 第47页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第47-58页 |
| 3.3.1 Anoxybacillus sp.WB42普鲁兰酶三维结构的理论模型 | 第47-50页 |
| 3.3.2 Anoxybacillus sp.WB42普鲁兰酶结构域C的功能 | 第50-51页 |
| 3.3.3 Anoxybacillus sp.WB42普鲁兰酶结构域N1的功能 | 第51-58页 |
| 3.4 本章小结 | 第58-60页 |
| 第四章 Anoxybacillus sp.WB42普鲁兰酶N-端氨基酸残基影响酶的催化性能 | 第60-65页 |
| 4.1 前言 | 第60页 |
| 4.2 材料与方法 | 第60页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第60-64页 |
| 4.3.1 Anoxybacillus sp.WB42普鲁兰酶N-端结构特点 | 第60页 |
| 4.3.2 N-端截短对酶的最适反应温度和热稳定性的影响 | 第60-63页 |
| 4.3.3 N-端截短对酶的催化性能的影响 | 第63-64页 |
| 4.4 本章小结 | 第64-65页 |
| 第五章 Anoxybacillus sp.WB42普鲁兰酶催化结构域A影响酶的催化性能 | 第65-74页 |
| 5.1 前言 | 第65页 |
| 5.2 材料与方法 | 第65页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第65-72页 |
| 5.3.1 Anoxybacillus sp.WB42普鲁兰酶催化结构域A的结构特点 | 第65-66页 |
| 5.3.2 Glu271、Leu273、Leu435、Ser519对酶催化性质的影响 | 第66-69页 |
| 5.3.3 His223对酶催化性能的影响 | 第69-70页 |
| 5.3.4 Val374对酶催化性能的影响 | 第70-71页 |
| 5.3.5 Asn291对酶催化性能的影响 | 第71-72页 |
| 5.4 本章小结 | 第72-74页 |
| 第六章 基于磁性纳米颗粒表面化学修饰的普鲁兰酶固定化 | 第74-92页 |
| 6.1 前言 | 第74页 |
| 6.2 材料与方法 | 第74-77页 |
| 6.2.1 材料 | 第74页 |
| 6.2.2 磁性纳米颗粒(MNPs)的制备与表征 | 第74-76页 |
| 6.2.3 普鲁兰酶与MNPs的结合 | 第76页 |
| 6.2.4 N-端融合His6普鲁兰酶(H6-PUL)的制备与固定化 | 第76页 |
| 6.2.5 普鲁兰酶酶活分析 | 第76页 |
| 6.2.6 固定化普鲁兰酶的酶学性质表征 | 第76-77页 |
| 6.2.7 数据分析 | 第77页 |
| 6.3 结果与分析 | 第77-90页 |
| 6.3.1 磁性纳米颗粒的制备 | 第77-79页 |
| 6.3.2 Fe_3O_4@CMC/PDA共价固定化普鲁兰酶的催化性质 | 第79-81页 |
| 6.3.3 MNPs离子交换固定化普鲁兰酶的催化性质 | 第81-84页 |
| 6.3.4 镍离子螯合固定化普鲁兰酶的酶学性质 | 第84-90页 |
| 6.4 本章小结 | 第90-92页 |
| 主要结论与展望 | 第92-94页 |
| 主要结论 | 第92-93页 |
| 展望 | 第93-94页 |
| 论文主要创新点 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-105页 |
| 附录 作者在攻读博士学位期间发表论文 | 第105-106页 |
| 附：菌株WB42的16S rDNA序列 | 第106页 |
