| 摘要 | 第7-8页 |
| 文献综述 | 第8-18页 |
| 1 PRRSV的特性分析 | 第8-10页 |
| 1.1 PRRSV的结构特点 | 第8-9页 |
| 1.2 生物学特性 | 第9-10页 |
| 2 PRRSV感染的膜泡运输研究进展 | 第10-11页 |
| 2.1 膜泡运输的特点 | 第10-11页 |
| 2.2 PRRSV的膜泡运输研究进展 | 第11页 |
| 3 胞外体的研究进展 | 第11-18页 |
| 3.1 胞外体的研究现状 | 第11-12页 |
| 3.2 胞外体的形成机制 | 第12-14页 |
| 3.3 胞外体的组成成分 | 第14-16页 |
| 3.4 胞外体的生物学功能 | 第16页 |
| 3.5 胞外体在兽医领域的研究 | 第16-17页 |
| 3.6 PRRSV与胞外体的关系 | 第17-18页 |
| 前言 | 第18-19页 |
| 材料与方法 | 第19-36页 |
| 1 实验材料 | 第19-22页 |
| 1.1 主要试剂及耗材 | 第19页 |
| 1.2 试剂配制 | 第19-21页 |
| 1.3 实验仪器 | 第21-22页 |
| 1.4 密度梯度的配置 | 第22页 |
| 2 试验方法 | 第22-27页 |
| 2.1 Exosome depleted FBS的获取和细胞培养 | 第22-23页 |
| 2.2 Marc-145细胞产生的胞外体提取和鉴定 | 第23-26页 |
| 2.2.1 胞外体的提取 | 第23页 |
| 2.2.2 细胞总蛋白提取 | 第23页 |
| 2.2.3 BCA测胞外体与细胞蛋白浓度 | 第23-24页 |
| 2.2.4 细胞蛋白、胞外体蛋白的SDS-PAGE和Western blot | 第24-25页 |
| 2.2.5 胞外体的电镜实验 | 第25页 |
| 2.2.6 碘克沙醇速率区带离心分离胞外体 | 第25-26页 |
| 2.3 Marc-145细胞感染PRRSV模型的建立 | 第26页 |
| 2.3.1 PRRS的病毒毒力 | 第26页 |
| 2.3.2 病毒感染模型的建立 | 第26页 |
| 2.4 PRRSV病毒粒子胞外体的分离鉴定 | 第26-27页 |
| 2.4.1 免疫磁珠分离 | 第26-27页 |
| 2.4.2 蛋白质银染色 | 第27页 |
| 3 结果 | 第27-31页 |
| 3.1 Exosome depelted FBS培养的Marc-145细胞 | 第27-28页 |
| 3.2 Marc-145细胞产生的胞外体鉴定 | 第28-29页 |
| 3.3 密度梯度离心实验结果 | 第29页 |
| 3.4 电镜结果 | 第29页 |
| 3.5 PRRSV毒力测定 | 第29-30页 |
| 3.6 PRRSV间接免疫荧光染色 | 第30-31页 |
| 3.7 蛋白质银染色及Western blot分析 | 第31页 |
| 4 分析与讨论 | 第31-34页 |
| 4.1 Marc-145产生的胞外体具有典型的胞外体特质 | 第32-34页 |
| 4.2 PRRSV病毒粒子与胞外体的分离 | 第34页 |
| 5 结论 | 第34-36页 |
| 参考文献 | 第36-43页 |
| Abstract | 第43页 |
| 致谢 | 第45页 |
