中文摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-8页 |
第一章 文献综述 | 第12-29页 |
1 BmCPV的研究进展 | 第12-16页 |
1.1 BmCPV的结构特征 | 第12-13页 |
1.2 BmCPV不同株系 | 第13-14页 |
1.3 BmCPV基因组结构和功能 | 第14-16页 |
1.4 宿主对BmCPV感染的免疫应答 | 第16页 |
2 circRNA的研究进展 | 第16-20页 |
2.1 环状RNA的主要类型 | 第16-17页 |
2.2 环状RNA形成机制 | 第17-18页 |
2.3 环状RNA分子功能研究 | 第18-20页 |
3 研究目的与研究内容 | 第20-24页 |
3.1 研究目的和意义 | 第20-21页 |
3.2 研究内容 | 第21-23页 |
3.3 技术路线 | 第23-24页 |
参考文献 | 第24-29页 |
第二章 BmCPV来源的circRNAs及其鉴定 | 第29-57页 |
1 引言 | 第29-30页 |
2 材料与方法 | 第30-40页 |
2.1 实验材料 | 第30-31页 |
2.2 试剂配制 | 第31-32页 |
2.3 实验方法 | 第32-40页 |
3 结果与分析 | 第40-51页 |
3.1 BmCPV circRNAs分子大小分布和其在病毒基因组中的分布 | 第40-42页 |
3.2 BmCPV circRNAs剪接信号分析统计 | 第42-43页 |
3.3 circRNA-miRNA-mRNA网络的构建 | 第43-44页 |
3.4 BmCPV circRNAs调节的靶基因功能注释 | 第44-46页 |
3.5 感染BmCPV家蚕中肠组织里病毒circRNAs的验证 | 第46-49页 |
3.6 过表达BmCPV单基因细胞系中病毒circRNAs的验证 | 第49-50页 |
3.7 BmCPV病毒粒子中病毒circRNAs的验证 | 第50-51页 |
4 讨论 | 第51-54页 |
参考文献 | 第54-57页 |
第三章 BmCPV_circ_048的功能研究 | 第57-81页 |
1 引言 | 第57-58页 |
2 材料与方法 | 第58-66页 |
2.1 实验材料 | 第58-59页 |
2.2 试剂配制 | 第59页 |
2.3 实验方法 | 第59-66页 |
3 结果与分析 | 第66-76页 |
3.1 circ_048在感染BmCPV细胞中的表达模式 | 第66-67页 |
3.2 circ_048在BmN细胞中的定位 | 第67页 |
3.3 circ_048竞争结合miRNAs对家蚕基因表达的调节 | 第67-69页 |
3.4 circ_048对BmCPV病毒复制及病毒基因表达的调节作用 | 第69-70页 |
3.5 circ_048对宿主先天免疫基因的影响 | 第70-71页 |
3.6 circ_048与蛋白的相互作用 | 第71-72页 |
3.7 circ_048编码小肽的潜在性预测 | 第72-73页 |
3.8 circ_048编码小肽的免疫荧光鉴定 | 第73-75页 |
3.9 circ_048编码小肽功能的初步研究 | 第75-76页 |
4 讨论 | 第76-78页 |
参考文献 | 第78-81页 |
第四章 过表达单个病毒基因对BmCPV感染性的影响 | 第81-99页 |
1 引言 | 第81-82页 |
2 材料与方法 | 第82-88页 |
2.1 实验材料 | 第82页 |
2.2 试剂配制 | 第82-83页 |
2.3 实验方法 | 第83-88页 |
3 结果与分析 | 第88-96页 |
3.1 pizt-vp3-mut、pizt-vp7-mut、pizt-polh-mut载体构建 | 第88-89页 |
3.2 转化细胞系的筛选和验证 | 第89-91页 |
3.3 过表达单基因/单基因组片段对BmCPV感染性的影响 | 第91-93页 |
3.4 转化细胞系中家蚕免疫、凋亡相关通路基因表达水平的变化 | 第93-95页 |
3.5 过表达vp7/vp7-mut和S5对BmN细胞周期的影响 | 第95-96页 |
4 讨论 | 第96-97页 |
参考文献 | 第97-99页 |
结论 | 第99-100页 |
附录一 载体图谱 | 第100-101页 |
附录二 常用仪器 | 第101-102页 |
附录三 RT-PCR原始数据 | 第102-109页 |
附录四 小肽序列和小肽抗体效价 | 第109-111页 |
致谢 | 第111-112页 |