中文摘要 | 第7-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
常用缩写词中英文对照表 | 第12-13页 |
前言 | 第13-15页 |
第一部分 双荧光素酶报告基因系统研究DBDCT通过PXR介导对CYP3A的调节作用 | 第15-28页 |
1 材料与方法 | 第15-23页 |
1.1 材料 | 第15-18页 |
1.2 实验方法 | 第18-23页 |
2 结果 | 第23-26页 |
2.1 扩增后质粒的鉴定 | 第23页 |
2.2 转染后给药浓度、时间的确定 | 第23-24页 |
2.3 双荧光素报告酶实验结果 | 第24-26页 |
3 讨论 | 第26-27页 |
3.1 DBDCT对人源、鼠源CYP3A的作用 | 第26页 |
3.2 DBDCT通过PXR介导对CYP3A的影响 | 第26-27页 |
4 结论 | 第27-28页 |
4.1 DBDCT对人源、鼠源PXR介导的CYP3A的表达均有影响 | 第27页 |
4.2 DBDCT可诱导PXR介导的CYP3A表达 | 第27-28页 |
第二部分DBDCT对NF-κB的影响 | 第28-39页 |
1 材料与方法 | 第28-34页 |
1.1 材料 | 第28-30页 |
1.2 方法 | 第30-34页 |
2 结果 | 第34-37页 |
2.1 Western结果 | 第34-35页 |
2.2 免疫荧光结果 | 第35-37页 |
3 讨论 | 第37-38页 |
3.1 DBDCT作用后NF-κB p65 总量及胞浆、胞核中量的变化 | 第37页 |
3.2 免疫荧光观察NF-κB p65 核转移情况 | 第37-38页 |
4 结论 | 第38-39页 |
4.1 western法证明DBDCT作用后NF-κB被激活 | 第38页 |
4.2 免疫荧光法证明DBDCT作用后NF-κB被激活 | 第38-39页 |
第三部分NF-κB的激活可以使CYP3A表达降低 | 第39-49页 |
1 材料与方法 | 第39-44页 |
1.1 材料 | 第39-41页 |
1.2 实验方法 | 第41-44页 |
2 结果 | 第44-47页 |
2.1 FQ-PCR结果 | 第44-45页 |
2.2 双荧光素报告酶实验结果 | 第45-47页 |
3 讨论 | 第47-48页 |
3.1 激活NF-κB对CYP3A表达的影响 | 第47页 |
3.2 抑制NF-κB的活化对CYP3A表达的影响 | 第47-48页 |
4 结论 | 第48-49页 |
4.1 激活NF-κB可下调CYP3A表达 | 第48页 |
4.2 抑制NF-κB的活化可减弱CYP3A表达下调 | 第48-49页 |
第四部分 利用sh RNA技术干扰PXR、NF-κB验证DBDCT对CYP3A的抑制作用机制 | 第49-60页 |
1 材料与方法 | 第49-53页 |
1.1 材料 | 第49-51页 |
1.2 实验方法 | 第51-53页 |
2 结果 | 第53-57页 |
2.1 确定干扰质粒干扰效率选择合适shRNA | 第53-55页 |
2.2 DBDCT对干扰PXR、NF-κB p65 后HepG2 细胞中CYP3A4 m RNA表达的影响 | 第55-57页 |
3 讨论 | 第57-59页 |
3.1 探讨PXR对DBDCT作用后CYP3A表达的影响 | 第57页 |
3.2 探讨NF-κB对DBDCT作用后CYP3A表达的影响 | 第57-59页 |
4 结论 | 第59-60页 |
4.1 DBDCT可通过PXR的介导诱导CYP3A表达 | 第59页 |
4.2 激活NF-κB可抑制DBDCT作用后CYP3A的表达 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-64页 |
综述 | 第64-79页 |
参考文献 | 第74-79页 |
致谢 | 第79-81页 |
在学期间承担/参与的科研课题与研究成果 | 第81-83页 |
个人简历 | 第83页 |