学位论文数据集 | 第3-4页 |
摘要 | 第4-8页 |
Abstract | 第8-12页 |
符号说明 | 第23-24页 |
第一章 绪论 | 第24-40页 |
1.1 人乳头瘤状病毒(HPV)概述 | 第24-31页 |
1.1.1 人乳头瘤状病毒(HPV)结构 | 第24页 |
1.1.2 人乳头瘤状病毒(HPV)基因组与功能 | 第24-25页 |
1.1.3 HPV病毒分型 | 第25页 |
1.1.4 HPV与肿瘤的关系 | 第25-26页 |
1.1.5 HPV的致病机理 | 第26-27页 |
1.1.6 HPV病毒载量与宫颈癌的关系 | 第27页 |
1.1.7 HPV分型检测的意义 | 第27-28页 |
1.1.8 HPV L1蛋白检测的意义 | 第28-29页 |
1.1.9 HPV分型联合HPV L1蛋白检测的意义 | 第29页 |
1.1.10 HPV检测方法 | 第29-31页 |
1.1.10.1 细胞学检查 | 第29-30页 |
1.1.10.2 杂交捕获二代分析(HC2) | 第30页 |
1.1.10.3 基于聚合酶链式反应(PCR)的检测方法 | 第30页 |
1.1.10.4 基因芯片技术 | 第30-31页 |
1.2 基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI TOF MS) | 第31-37页 |
1.2.1 MALDI TOF MS基本原理 | 第31-32页 |
1.2.2 MALDI电离机理 | 第32页 |
1.2.3 MALDI TOF MS的应用 | 第32-37页 |
1.2.3.1 多肽与蛋白质分析 | 第33页 |
1.2.3.2 多磷酸化肽分析检测 | 第33-34页 |
1.2.3.3 寡核苷酸分析检测 | 第34-36页 |
1.2.3.4 MALDI定量分析 | 第36页 |
1.2.3.5 MALDI TOF MS对HPV检测 | 第36-37页 |
1.3 本论文研究的目的、意义和主要内容 | 第37-40页 |
1.3.1 本论文研究目的和意义 | 第37-38页 |
1.3.2 本论文研究内容 | 第38-40页 |
第二章 高效富集寡核苷酸纳米材料的制备 | 第40-52页 |
2.1 引言 | 第40-41页 |
2.2 实验部分 | 第41-43页 |
2.2.1 试剂与仪器 | 第41-42页 |
2.2.2 精胺修饰纳米金刚石的制备 | 第42页 |
2.2.3 红外光谱和红外成像的表征 | 第42页 |
2.2.4 SP-NDs对寡核苷酸的吸附效果 | 第42页 |
2.2.5 SP-NDs富集稀溶液及复杂基质中的寡核苷酸 | 第42-43页 |
2.2.6 MADLI TOF MS分析 | 第43页 |
2.3 结果与讨论 | 第43-51页 |
2.3.1 SP-NDs的表征 | 第43-46页 |
2.3.2 SP-NDs对寡核苷酸的吸附 | 第46-48页 |
2.3.3 MALDI TOF MS分析稀溶液寡核苷酸 | 第48-49页 |
2.3.4 MALDI TOF MS分析复杂基体中的寡核苷酸 | 第49-51页 |
2.4 本章小结 | 第51-52页 |
第三章 基于纳米材料高效富集质谱法对HPV病毒分型研究 | 第52-64页 |
3.1 引言 | 第52-53页 |
3.2 实验部分 | 第53-58页 |
3.2.1 试剂与仪器 | 第53页 |
3.2.2 HPV通用引物PCR扩增 | 第53-55页 |
3.2.3 巢式PCR-RFLP方法 | 第55-56页 |
3.2.4 临床样品DNA提取 | 第56-57页 |
3.2.5 MALDI TOF MS检测酶切产物 | 第57页 |
3.2.6 试剂盒检测临床样本 | 第57-58页 |
3.3 结果与讨论 | 第58-61页 |
3.3.1 HPV限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCR-RFMP) | 第58-59页 |
3.3.2 MALDI TOF MS对HPV分型检测 | 第59-60页 |
3.3.3 临床样品验证结果 | 第60-61页 |
3.4 本章小结 | 第61-64页 |
第四章 基于纳米金非共价键竞争吸附质谱法定量检测HPV16 L1蛋白 | 第64-92页 |
4.1 引言 | 第64-65页 |
4.2 实验部分 | 第65-72页 |
4.2.1 试剂与仪器 | 第65-66页 |
4.2.2 纳米金的合成 | 第66-67页 |
4.2.3 纳米金表征 | 第67页 |
4.2.4 纳米金聚集盐的浓度 | 第67页 |
4.2.5 HPV16 L1核酸适配体与AuNPs结合 | 第67-69页 |
4.2.5.1 溶液配制 | 第67页 |
4.2.5.2 pH值的影响 | 第67-68页 |
4.2.5.3 盐的影响 | 第68页 |
4.2.5.4 吸附时间 | 第68页 |
4.2.5.5 AuNPs与核酸适配体比例 | 第68页 |
4.2.5.6 HPV16 L1核酸适配体与AuNPs结合物稳定性 | 第68-69页 |
4.2.5.7 HPV16 L1核酸适配体与AuNPs结合物的表征 | 第69页 |
4.2.7 Mass Tag的筛选 | 第69-70页 |
4.2.7.1 确定Mass tag与AuNPs的亲和力 | 第69页 |
4.2.7.2 Mass Tag和HPV16 L1核酸适配体竞争吸附 | 第69-70页 |
4.2.8 HPV16 L1蛋白的检测 | 第70页 |
4.2.9 HPV16 L1蛋白的检测特异性 | 第70页 |
4.2.10 样本检测 | 第70-71页 |
4.2.10.1 标准曲线的建立 | 第71页 |
4.2.10.2 样本前处理和检测 | 第71页 |
4.2.11 方法学验证 | 第71-72页 |
4.2.11.1 方法重现性 | 第71-72页 |
4.2.11.2 方法回收率 | 第72页 |
4.2.12 酶联免疫(ELISA)试剂盒检测样本 | 第72页 |
4.3 结果与讨论 | 第72-90页 |
4.3.1 纳米金的表征 | 第72-73页 |
4.3.2 纳米金聚集盐的浓度 | 第73-74页 |
4.3.3 AuNPs吸附Aptamer条件 | 第74-79页 |
4.3.3.1 pH的影响 | 第74-75页 |
4.3.3.2 盐的影响 | 第75-76页 |
4.3.3.3 吸附时间的影响 | 第76-77页 |
4.3.3.4 AuNPs与核酸适配体比例 | 第77页 |
4.3.3.5 AuNPs-APT_(HPV16 L1)稳定性研究 | 第77-79页 |
4.3.4 HPV16 L1核酸适配体与AuNPs结合物的表征 | 第79-80页 |
4.3.5 质量标签(Tag)的筛选 | 第80-82页 |
4.3.6 MALDI TOF MS条件 | 第82-83页 |
4.3.6.1 检测模式 | 第82-83页 |
4.3.6.2 基质的选择 | 第83页 |
4.3.7 HPV16 L1蛋白的检测 | 第83-85页 |
4.3.8 方法分析表现 | 第85-86页 |
4.3.9 实际样品的定量分析 | 第86-89页 |
4.3.10 ELISA实验验证 | 第89-90页 |
4.4 本章小结 | 第90-92页 |
第五章 基于氧化石墨烯和核酸适配体竞争吸附检测HPV 16 L1蛋白 | 第92-104页 |
5.1 引言 | 第92页 |
5.2 实验部分 | 第92-95页 |
5.2.1 试剂与仪器 | 第92-93页 |
5.2.2 离心时间 | 第93页 |
5.2.3 氯化钠浓度 | 第93-94页 |
5.2.4 HPV16 L1核酸适配体浓度 | 第94页 |
5.2.5 HPV16 L1蛋白检测 | 第94页 |
5.2.6 临床样本检测 | 第94页 |
5.2.7 特异性实验 | 第94-95页 |
5.2.8 基于核酸适配体与GO检测体系Zeta电势和颗粒尺寸分布研究 | 第95页 |
5.3 结果与讨论 | 第95-102页 |
5.3.1 离心时间的影响 | 第95-96页 |
5.3.2 氯化钠浓度的影响 | 第96页 |
5.3.3 HPV16 L1核酸适配体的浓度 | 第96-97页 |
5.3.4 HPV 16 L1蛋白检测 | 第97-98页 |
5.3.5 实际临床样本检测 | 第98-99页 |
5.3.6 回收率 | 第99页 |
5.3.7 特异性实验 | 第99-100页 |
5.3.8 GO/HPV 16 L1核酸适配体检测体系颗粒尺寸的分布研究 | 第100-101页 |
5.3.9 HPV 16 L1核酸适配体和GO检测体系Zeta电势分布 | 第101页 |
5.3.10 与第四章所建立的方法比较 | 第101-102页 |
5.4 本章小结 | 第102-104页 |
第六章 结论与展望 | 第104-106页 |
参考文献 | 第106-118页 |
致谢 | 第118-120页 |
研究成果及发表的学术论文 | 第120-122页 |
作者和导师简介 | 第122-124页 |
附件 | 第124-125页 |