| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第17-19页 |
| 第一章 绪论 | 第19-36页 |
| 1.1 喹乙醇 | 第19-23页 |
| 1.1.1 喹乙醇研究概况 | 第19-20页 |
| 1.1.2 喹乙醇毒性作用及机制 | 第20-23页 |
| 1.2 细胞凋亡 | 第23-26页 |
| 1.2.1 细胞凋亡的概念 | 第23页 |
| 1.2.2 细胞凋亡的分子机制 | 第23-25页 |
| 1.2.3 细胞凋亡调控的信号通路 | 第25-26页 |
| 1.3 细胞周期 | 第26-28页 |
| 1.3.1 细胞周期的概念 | 第26-27页 |
| 1.3.2 细胞周期调控机制 | 第27-28页 |
| 1.4 GADD45A基因 | 第28-31页 |
| 1.4.1 GADD45a基因结构与功能 | 第28-29页 |
| 1.4.2 GADD45a基因与细胞凋亡的关系 | 第29-30页 |
| 1.4.3 GADD45a基因在细胞周期调控中的作用 | 第30页 |
| 1.4.4 p53基因对GADD45a基因的调控作用 | 第30-31页 |
| 1.5 P21基因 | 第31-33页 |
| 1.5.1 p21基因的结构与功能 | 第31-32页 |
| 1.5.2 p21基因与细胞凋亡的关系 | 第32页 |
| 1.5.3 p21基因在细胞周期调控中的作用 | 第32-33页 |
| 1.5.4 p53基因对p21基因的调控作用 | 第33页 |
| 1.6 姜黄素 | 第33-34页 |
| 1.6.1 姜黄素研究概况 | 第33-34页 |
| 1.6.2 姜黄素对细胞凋亡的调控作用 | 第34页 |
| 1.7 研究目的与意义及内容 | 第34-36页 |
| 1.7.1 目的与意义 | 第34-35页 |
| 1.7.2 研究内容 | 第35-36页 |
| 第二章 喹乙醇对小鼠肝毒性的分子机制研究 | 第36-51页 |
| 2.1 引言 | 第36页 |
| 2.2 材料 | 第36-37页 |
| 2.2.1 药物 | 第36页 |
| 2.2.2 实验动物 | 第36页 |
| 2.2.3 试剂盒 | 第36页 |
| 2.2.4 主要试剂 | 第36-37页 |
| 2.2.5 主要仪器 | 第37页 |
| 2.3 实验方法 | 第37-41页 |
| 2.3.1 试剂配制 | 第37-38页 |
| 2.3.2 动物处理 | 第38页 |
| 2.3.3 血清AST及ALT检测 | 第38页 |
| 2.3.4 肝组织病理学检测 | 第38-39页 |
| 2.3.5 氧化应激标志物检测 | 第39页 |
| 2.3.6 Caspase-3和-9活性测定 | 第39页 |
| 2.3.7 肝组织超微结构观察 | 第39页 |
| 2.3.8 Western blot检测蛋白表达 | 第39-40页 |
| 2.3.9 免疫组化检测 | 第40-41页 |
| 2.3.10 数据分析 | 第41页 |
| 2.4 结果与分析 | 第41-47页 |
| 2.4.1 临床观察结果 | 第41页 |
| 2.4.2 喹乙醇对小鼠肝功能影响 | 第41-43页 |
| 2.4.3 小鼠肝脏线粒体超微结构的变化 | 第43页 |
| 2.4.4 细胞凋亡、细胞周期、细胞自噬等相关信号通路蛋白表达变化 | 第43-47页 |
| 2.5 讨论 | 第47-49页 |
| 2.5.1 喹乙醇的肝损伤与氧化应激 | 第47-48页 |
| 2.5.2 喹乙醇诱导细胞凋亡的主要信号通路 | 第48-49页 |
| 2.5.3 喹乙醇诱导细胞周期阻滞的信号通路 | 第49页 |
| 2.6 小结 | 第49-51页 |
| 第三章 GADD45A基因在喹乙醇诱导细胞凋亡和周期阻滞中的作用研究 | 第51-77页 |
| 3.1 引言 | 第51页 |
| 3.2 材料 | 第51-52页 |
| 3.2.1 药物 | 第51页 |
| 3.2.2 细胞株 | 第51页 |
| 3.2.3 试剂盒 | 第51-52页 |
| 3.2.4 主要试剂 | 第52页 |
| 3.2.5 主要仪器 | 第52页 |
| 3.3 方法 | 第52-60页 |
| 3.3.1 试剂配制 | 第52-53页 |
| 3.3.2 细胞培养 | 第53页 |
| 3.3.3 Western blot检测蛋白表达 | 第53页 |
| 3.3.4 慢病毒包装干扰细胞系制作 | 第53-56页 |
| 3.3.5 Real-Time qPCR检测mRNA表达 | 第56-57页 |
| 3.3.6 细胞存活率检测 | 第57-58页 |
| 3.3.7 细胞凋亡检测 | 第58页 |
| 3.3.8 细胞内ROS检测 | 第58-59页 |
| 3.3.9 线粒体膜电位检测 | 第59页 |
| 3.3.10 DNA损伤检测 | 第59-60页 |
| 3.3.11 细胞周期检测 | 第60页 |
| 3.3.12 数据分析 | 第60页 |
| 3.4 结果与分析 | 第60-73页 |
| 3.4.1 喹乙醇对HepG2细胞GADD45a蛋白表达的影响 | 第60-62页 |
| 3.4.2 GADD45a基因对喹乙醇诱导细胞活性与细胞凋亡的影响 | 第62-63页 |
| 3.4.3 GADD45a基因对喹乙醇诱导DNA损伤的影响 | 第63-65页 |
| 3.4.4 GADD45a基因对喹乙醇诱导ROS产生的影响 | 第65页 |
| 3.4.5 GADD45a基因对喹乙醇诱导线粒体功能失调的影响 | 第65-66页 |
| 3.4.6 GADD45a基因对喹乙醇诱导caspase激活的影响 | 第66-67页 |
| 3.4.7 GADD45a基因对喹乙醇诱导细胞周期分布的影响 | 第67-68页 |
| 3.4.8 GADD45a基因对喹乙醇诱导MAPK通路的影响 | 第68-69页 |
| 3.4.9 JNK/p38通路在喹乙醇诱导HepG2细胞凋亡与周期阻滞中的作用 | 第69-73页 |
| 3.5 讨论 | 第73-75页 |
| 3.5.1 GADD45a基因调控喹乙醇诱导的细胞凋亡 | 第73页 |
| 3.5.2 GADD45a基因调控喹乙醇诱导的DNA损伤 | 第73-74页 |
| 3.5.3 GADD45a基因调控喹乙醇诱导的细胞周期阻滞 | 第74页 |
| 3.5.4 GADD45a与JNK/P38通路在喹乙醇诱导细胞凋亡与周期阻滞中的作用 | 第74-75页 |
| 3.6 小结 | 第75-77页 |
| 第四章 P21基因在喹乙醇诱导细胞凋亡和周期阻滞中的作用研究 | 第77-92页 |
| 4.1 引言 | 第77页 |
| 4.2 材料 | 第77-78页 |
| 4.2.1 药物 | 第77页 |
| 4.2.2 细胞株 | 第77页 |
| 4.2.3 试剂盒 | 第77页 |
| 4.2.4 主要试剂 | 第77-78页 |
| 4.2.5 主要仪器 | 第78页 |
| 4.3 方法 | 第78-80页 |
| 4.3.1 试剂配制 | 第78页 |
| 4.3.2 细胞培养 | 第78页 |
| 4.3.3 Western Blot检测蛋白表达 | 第78页 |
| 4.3.4 慢病毒包装干扰细胞系制作 | 第78-79页 |
| 4.3.5 免疫荧光检测蛋白表达 | 第79页 |
| 4.3.6 细胞存活率检测 | 第79页 |
| 4.3.7 细胞凋亡检测 | 第79页 |
| 4.3.8 细胞内ROS检测 | 第79页 |
| 4.3.9 线粒体膜电位检测 | 第79页 |
| 4.3.10 细胞周期检测 | 第79页 |
| 4.3.11 数据分析 | 第79-80页 |
| 4.4 结果与分析 | 第80-89页 |
| 4.4.1 喹乙醇对HepG2细胞p21、p-p21和p53蛋白的影响 | 第80-81页 |
| 4.4.2 p21稳定干扰HepG2细胞系建立的结果 | 第81-82页 |
| 4.4.3 p21基因对喹乙醇诱导的细胞成活率与凋亡率的影响 | 第82-83页 |
| 4.4.4 p21基因对喹乙醇诱导氧化应激的影响 | 第83页 |
| 4.4.5 p21基因对喹乙醇诱导线粒体功能失调的影响 | 第83-84页 |
| 4.4.6 p21基因对喹乙醇诱导caspase激活的影响 | 第84-85页 |
| 4.4.7 p21基因对喹乙醇诱导细胞周期的影响 | 第85-86页 |
| 4.4.8 p21基因对喹乙醇诱导AKT和Nrf2/HO-1通路的影响 | 第86-87页 |
| 4.4.9 PI3K/AKT和Nrf2/HO-1通路对喹乙醇诱导细胞周期和细胞凋亡的影响 | 第87-89页 |
| 4.5 讨论 | 第89-91页 |
| 4.5.1 喹乙醇对p21蛋白表达的影响 | 第89页 |
| 4.5.2 p21基因调控喹乙醇诱导的细胞凋亡 | 第89-90页 |
| 4.5.3 p21基因调控喹乙醇诱导的细胞周期阻滞 | 第90页 |
| 4.5.4 p21基因调控AKT与Nrf2/HO-1信号通路 | 第90-91页 |
| 4.6 小结 | 第91-92页 |
| 第五章 P53基因调控GADD45A与P21在喹乙醇诱导细胞凋亡中的作用研究 | 第92-106页 |
| 5.1 引言 | 第92页 |
| 5.2 材料 | 第92-93页 |
| 5.2.1 药物 | 第92页 |
| 5.2.2 细胞株 | 第92页 |
| 5.2.3 实验动物 | 第92页 |
| 5.2.4 试剂盒 | 第92-93页 |
| 5.2.5 主要试剂 | 第93页 |
| 5.2.6 主要仪器 | 第93页 |
| 5.3 方法 | 第93-96页 |
| 5.3.1 试剂配制 | 第93页 |
| 5.3.2 细胞培养 | 第93页 |
| 5.3.3 细胞存活率检测 | 第93页 |
| 5.3.4 细胞凋亡检测 | 第93页 |
| 5.3.5 细胞内ROS检测 | 第93页 |
| 5.3.6 线粒体膜电位检测 | 第93页 |
| 5.3.7 Western Blot检测蛋白表达 | 第93-94页 |
| 5.3.8 动物处理 | 第94页 |
| 5.3.9 血清AST及ALT检测 | 第94页 |
| 5.3.10 肝组织病理学检测 | 第94页 |
| 5.3.11 氧化应激标志物检测 | 第94页 |
| 5.3.12 caspase-3和-9活性测定 | 第94页 |
| 5.3.13 免疫组化检测 | 第94页 |
| 5.3.14 p53小鼠基因型鉴定 | 第94-95页 |
| 5.3.15 免疫荧光检测蛋白表达 | 第95页 |
| 5.3.16 数据分析 | 第95-96页 |
| 5.4 结果与分析 | 第96-104页 |
| 5.4.1 p53基因对GADD45a与p21的调控作用 | 第96-97页 |
| 5.4.2 p53基因对喹乙醇诱导的细胞成活率和凋亡率的影响 | 第97-98页 |
| 5.4.3 p53基因对喹乙醇诱导ROS产生的影响 | 第98-99页 |
| 5.4.4 p53基因对喹乙醇诱导线粒体凋亡调控机制的影响 | 第99-100页 |
| 5.4.5 p53基因对喹乙醇诱导的MAPK通路和自噬通路的影响 | 第100-101页 |
| 5.4.6 p53基因敲除小鼠模型验证结果 | 第101-104页 |
| 5.5 讨论 | 第104-105页 |
| 5.5.1 在喹乙醇诱导细胞凋亡中p53与GADD45a、p21的调控机制 | 第104页 |
| 5.5.2 p53在喹乙醇诱导细胞凋亡的调控作用 | 第104-105页 |
| 5.6 小结 | 第105-106页 |
| 第六章 姜黄素对喹乙醇诱导细胞凋亡的影响及机制研究 | 第106-120页 |
| 6.1 引言 | 第106页 |
| 6.2 材料 | 第106-107页 |
| 6.2.1 药物 | 第106页 |
| 6.2.2 细胞株 | 第106页 |
| 6.2.3 实验动物 | 第106页 |
| 6.2.4 试剂盒 | 第106页 |
| 6.2.5 主要试剂 | 第106-107页 |
| 6.2.6 主要仪器 | 第107页 |
| 6.3 方法 | 第107-109页 |
| 6.3.1 试剂配制 | 第107页 |
| 6.3.2 细胞培养 | 第107页 |
| 6.3.3 细胞存活率检测 | 第107页 |
| 6.3.4 细胞凋亡检测 | 第107页 |
| 6.3.5 细胞内ROS检测 | 第107页 |
| 6.3.6 线粒体膜电位检测 | 第107页 |
| 6.3.7 Western Blot检测蛋白表达 | 第107-108页 |
| 6.3.8 动物处理 | 第108页 |
| 6.3.9 血清AST及ALT检测 | 第108页 |
| 6.3.10 肝组织病理学检测 | 第108页 |
| 6.3.11 氧化应激标志物检测 | 第108页 |
| 6.3.12 caspase-3和-9活性测定 | 第108页 |
| 6.3.13 Real-Time qPCR检测mRNA表达 | 第108-109页 |
| 6.3.14 免疫荧光检测蛋白表达 | 第109页 |
| 6.3.15 数据分析 | 第109页 |
| 6.4 结果与分析 | 第109-117页 |
| 6.4.1 姜黄素对喹乙醇诱导小鼠肝损伤的影响 | 第109-112页 |
| 6.4.2 姜黄素对喹乙醇诱导HepG2细胞凋亡的影响 | 第112-117页 |
| 6.5 讨论 | 第117-118页 |
| 6.5.1 姜黄素调控喹乙醇诱导的氧化应激机制 | 第117-118页 |
| 6.5.2 姜黄素对喹乙醇诱导的细胞凋亡作用 | 第118页 |
| 6.5.3 姜黄素对喹乙醇诱导的p53及NF-kB通路的调控 | 第118页 |
| 6.6 小结 | 第118-120页 |
| 第七章 结论与研究展望 | 第120-122页 |
| 7.1 结论 | 第120-121页 |
| 7.2 研究展望 | 第121-122页 |
| 第八章 创新点 | 第122-123页 |
| 参考文献 | 第123-139页 |
| 致谢 | 第139-141页 |
| 个人简介 | 第141页 |
