摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7页 |
英文缩略表 | 第11-12页 |
第一章 引言 | 第12-17页 |
1.1 植物SWEET基因家族研究概况 | 第12-15页 |
1.1.1 拟南芥SWEET基因家族研究进展 | 第12-14页 |
1.1.2 玉米SWEET基因研究进展 | 第14-15页 |
1.1.3 水稻SWEET基因研究进展 | 第15页 |
1.2 CRISPR/Cas9基因编辑技术研究概况 | 第15-16页 |
1.3 本研究的目的及意义 | 第16-17页 |
第二章 玉米SWEET1b基因定位及多态性研究 | 第17-37页 |
2.1 实验材料 | 第17-19页 |
2.1.1 植物材料 | 第17页 |
2.1.2 本实验所用的菌株和载体说明 | 第17-18页 |
2.1.3 生化试剂 | 第18页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第18-19页 |
2.1.5 实验中所用到的引物 | 第19页 |
2.2 实验方法 | 第19-27页 |
2.2.1 植物材料的种植 | 第19-20页 |
2.2.2 CTAB法提取基因组DNA和Trizol提取总RNA | 第20-21页 |
2.2.3 载体构建方法 | 第21-23页 |
2.2.4 玉米原生质体瞬时转化 | 第23-24页 |
2.2.5 烟草的瞬时表达分析 | 第24-25页 |
2.2.6 转基因玉米植株eYFP观察 | 第25页 |
2.2.7 双分子荧光互补 | 第25-26页 |
2.2.8 SWEET1b基因在玉米自然群体中的多态性 | 第26-27页 |
2.2.9 SWEET1b进化分析 | 第27页 |
2.3 结果与分析 | 第27-35页 |
2.3.1 玉米SWEET1b蛋白的亚细胞定位和组织器官定位 | 第27-31页 |
2.3.2 双分子荧光互补结果与分析 | 第31-33页 |
2.3.3 SWEET1b基因在玉米自交系群体中的多态性 | 第33-34页 |
2.3.4 SWEET1b进化分析结果 | 第34-35页 |
2.4 本章结论与讨论 | 第35-37页 |
2.4.1 本章结论 | 第35页 |
2.4.2 本章讨论 | 第35-37页 |
第三章 CRISPR/Cas9介导的拟南芥SWEET1/2/3基因敲除研究 | 第37-49页 |
3.1 实验材料 | 第37-39页 |
3.1.1 植物材料 | 第37页 |
3.1.2 本实验所用的菌株和载体 | 第37页 |
3.1.3 生化试剂 | 第37-38页 |
3.1.4 主要仪器设备 | 第38页 |
3.1.5 实验中所用到的引物 | 第38-39页 |
3.2 常用培养基配置 | 第39页 |
3.3 相关试剂配置 | 第39页 |
3.3.1 拟南芥基因组DNA提取所需试剂 | 第39页 |
3.3.2 农杆菌侵染液的配制 | 第39页 |
3.4 试验方法 | 第39-41页 |
3.4.1 拟南芥的种植 | 第39页 |
3.4.2 花序侵染法稳定转化拟南芥 | 第39页 |
3.4.3 拟南芥转基因阳性植株的筛选 | 第39-40页 |
3.4.4 PCR检测拟南芥阳性植株 | 第40页 |
3.4.5 突变体角果长度测定实验 | 第40页 |
3.4.6 转基因拟南芥在不同糖浓度的平板上生长实验 | 第40-41页 |
3.4.7 突变体中不同糖信号相关基因的表达情况 | 第41页 |
3.4.8 反转录 | 第41页 |
3.4.9 实时荧光定量PCR检测 | 第41页 |
3.5 结果与分析 | 第41-47页 |
3.5.1 转基因拟南芥的获得及检测 | 第41-45页 |
3.5.2 突变体角果长度测定 | 第45-46页 |
3.5.3 突变体在不同糖浓度的培养基上的生长实验 | 第46页 |
3.5.4 突变体中不同糖转运相关基因的表达情况 | 第46-47页 |
3.6 本章结论与讨论 | 第47-49页 |
3.6.1 本章结论 | 第47页 |
3.6.2 本章讨论 | 第47-49页 |
第四章 全文结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
作者简历 | 第58页 |