| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 主要符号对照表 | 第11-12页 |
| 第1章 引言 | 第12-22页 |
| 1.1 FSH制剂的研究及应用概述 | 第12-15页 |
| 1.1.1 尿源制剂 | 第12-13页 |
| 1.1.2 r-hFSH的开发 | 第13页 |
| 1.1.3 重组hFSH和u-hFSH同种型 | 第13-14页 |
| 1.1.4 r-hFSH辅助生殖治疗的临床应用 | 第14页 |
| 1.1.5 r-hFSH的药物经济学 | 第14-15页 |
| 1.2 糖基化修饰的功能与研究概述 | 第15-19页 |
| 1.2.1 去除寡糖链的方法 | 第15-16页 |
| 1.2.2 N-连接糖肽富集技术 | 第16-17页 |
| 1.2.3 O-连接糖基化对糖蛋白的结构-功能的作用 | 第17-18页 |
| 1.2.4 N-连接的寡糖对糖蛋白的结构-功能的作用 | 第18-19页 |
| 1.3 r-hFSH的安全性和耐受性 | 第19-20页 |
| 1.4 本课题的来源与意义及主要研究内容 | 第20-22页 |
| 1.4.1 本课题的来源与意义 | 第20-21页 |
| 1.4.2 研究的主要内容 | 第21-22页 |
| 第2章 rFSH类似物的发酵及纯化 | 第22-36页 |
| 2.1 实验材料、试剂及仪器 | 第22-25页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第22-23页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第23页 |
| 2.1.3 试剂配制 | 第23-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-29页 |
| 2.2.1 CHO-FSH细胞的复苏与转瓶扩增 | 第25-27页 |
| 2.2.2 7.5L生物反应器中CHO-FSH细胞的大规模培养 | 第27页 |
| 2.2.3 发酵液的超滤浓缩及纯化 | 第27-29页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第29-35页 |
| 2.3.1 发酵中的细胞状态 | 第29-30页 |
| 2.3.2 发酵参数的确定 | 第30-31页 |
| 2.3.3 生物反应器中细胞大规模培养 | 第31-33页 |
| 2.3.4 蛋白纯化 | 第33-35页 |
| 2.4 本章小结 | 第35-36页 |
| 第3章 rFSH类似物的N-糖基化位点鉴定 | 第36-46页 |
| 3.1 实验材料、试剂及仪器 | 第37-38页 |
| 3.1.1 实验材料与试剂 | 第37页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第37页 |
| 3.1.3 主要溶液配制 | 第37-38页 |
| 3.2 实验方法 | 第38-40页 |
| 3.2.1 蛋白样品的处理 | 第38页 |
| 3.2.2 修饰富集和质谱分析 | 第38-40页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第40-45页 |
| 3.3.1 HPLC结果 | 第40-41页 |
| 3.3.2 质谱N-糖基化位点鉴定结果与讨论 | 第41-44页 |
| 3.3.3 目的蛋白N-糖基化位点预测与讨论 | 第44-45页 |
| 3.4 本章小结 | 第45-46页 |
| 第4章 rFSH类似物的等电点测定 | 第46-52页 |
| 4.1 实验材料、试剂及仪器 | 第46-47页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第46-47页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第47页 |
| 4.2 实验方法 | 第47-49页 |
| 4.2.1 样本制备 | 第47页 |
| 4.2.2 双向电泳 | 第47-48页 |
| 4.2.3 胶内酶解 | 第48页 |
| 4.2.4 质谱分析 | 第48页 |
| 4.2.5 数据库检索 | 第48-49页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第49-51页 |
| 4.3.1 蛋白质定量结果及SDS-PAGE结果 | 第49-50页 |
| 4.3.2 双向电泳结果 | 第50页 |
| 4.3.3 质谱分析结果 | 第50-51页 |
| 4.4 本章小结 | 第51-52页 |
| 第5章 rFSH类似物的毒理学研究 | 第52-60页 |
| 5.1 实验材料、试剂及仪器 | 第52-53页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第52-53页 |
| 5.1.2 实验仪器 | 第53页 |
| 5.2 rFSH的急性毒性试验 | 第53-54页 |
| 5.2.1 试验动物和供试药物 | 第53页 |
| 5.2.2 实验方法 | 第53-54页 |
| 5.3 rFSH的骨髓细胞微核试验 | 第54-55页 |
| 5.3.1 试验动物和供试药物 | 第54页 |
| 5.3.2 实验方法 | 第54-55页 |
| 5.4 实验结果与分析 | 第55-59页 |
| 5.4.1 急性毒性实验对小鼠生理状态观察 | 第55-57页 |
| 5.4.2 骨髓细胞微核试验结果 | 第57-59页 |
| 5.5 本章小结 | 第59-60页 |
| 第6章 总结与展望 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 附录A | 第71-75页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文及研究成果 | 第75页 |
