| 致谢 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| ABSTRACT | 第9页 |
| 第一部分 绪论 | 第15-22页 |
| 1.1 重金属胁迫对植物的危害 | 第15-16页 |
| 1.1.1 抑制种子的萌发 | 第15页 |
| 1.1.2 对生长发育的影响 | 第15页 |
| 1.1.3 对细胞膜透性的影响 | 第15页 |
| 1.1.4 对植物光合作用的影响 | 第15-16页 |
| 1.2 植物对重金属胁迫的抗性机制研究 | 第16-18页 |
| 1.2.1 螯合作用 | 第16页 |
| 1.2.2 热休克蛋白 | 第16-17页 |
| 1.2.3 有机酸和氨基酸 | 第17页 |
| 1.2.4 外排 | 第17页 |
| 1.2.5 限制跨膜运输 | 第17页 |
| 1.2.6 液泡的封存 | 第17-18页 |
| 1.2.7 细胞壁和根渗出液 | 第18页 |
| 1.3 植物抗逆研究现状 | 第18-20页 |
| 1.3.1 干旱对植物的影响及植物的抗旱性 | 第18-19页 |
| 1.3.2 盐胁迫对植物的影响及植物的抗盐性 | 第19页 |
| 1.3.3 低温对植物的影响及植物的抗寒反应 | 第19-20页 |
| 1.3.4 重金属胁迫对植物的影响及抗性反应 | 第20页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第20-22页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第22-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第22页 |
| 2.1.1 拟南芥材料 | 第22页 |
| 2.1.2 菌体和质粒载体 | 第22页 |
| 2.2 主要试剂 | 第22-26页 |
| 2.2.1 常用分子生物学试剂盒 | 第22页 |
| 2.2.2 常用酶类 | 第22页 |
| 2.2.3 常用生化试剂 | 第22页 |
| 2.2.4 常用溶液与试剂的配制 | 第22-26页 |
| 2.3 主要仪器与设备 | 第26-27页 |
| 2.4 实验方法 | 第27-39页 |
| 2.4.1 灭菌与消毒 | 第28页 |
| 2.4.2 拟南芥培养 | 第28-29页 |
| 2.4.3 根长和鲜重的测量 | 第29页 |
| 2.4.4 CTAB法提取全基因组DNA | 第29页 |
| 2.4.5 Trizol法提取总RNA | 第29-30页 |
| 2.4.6 全基因组cDNA合成 | 第30页 |
| 2.4.7 引物设计 | 第30-31页 |
| 2.4.8 PCR反应体系及程序 | 第31页 |
| 2.4.9 琼脂糖凝胶电泳检测核酸 | 第31-32页 |
| 2.4.10 PCR产物纯化(Kit) | 第32页 |
| 2.4.11 回收与纯化目的条带DNA(Kit) | 第32页 |
| 2.4.12 提取质粒DNA(Kit) | 第32-33页 |
| 2.4.13 植物表达载体的构建 | 第33-34页 |
| 2.4.14 限制性内切酶双酶切 | 第34-35页 |
| 2.4.15 T4连接反应(10ul连接体系) | 第35页 |
| 2.4.16 E.coli感受态细胞的制备与转化 | 第35-36页 |
| 2.4.17 农杆菌GV3101感受态细胞的制备与转化 | 第36页 |
| 2.4.18 花序侵染法转化拟南芥 | 第36-37页 |
| 2.4.19 GUS染色 | 第37-38页 |
| 2.4.20 数据统计 | 第38-39页 |
| 第三部分 结果与分析 | 第39-58页 |
| 3.1 拟南芥CDR6基因的组织表达模式 | 第39-45页 |
| 3.1.1 CDR6基因的组织表达模式——GUS活性分析 | 第39-44页 |
| 3.1.2 CDR6基因组织表达模——qRT-PCR | 第44页 |
| 3.1.3 CDR6基因在铅胁迫下的表达水平变化 | 第44-45页 |
| 3.2 CDR6基因编码蛋白亚细胞定位 | 第45-49页 |
| 3.2.1 35S：：CDR6-GFP重组载体的构建 | 第45-48页 |
| 3.2.2 CDR6基因编码蛋白亚细胞定位观察 | 第48-49页 |
| 3.3 CDR6基因功能分析 | 第49-56页 |
| 3.3.1 cdr6-1突变体纯合体的鉴定 | 第49-50页 |
| 3.3.2 CDR6基因过量表达植株的获得 | 第50-55页 |
| 3.3.3 cdr6-1突变体和CDR6基因过量植株对Pb(NO_3)_2胁迫的响应 | 第55-56页 |
| 3.4 铅胁迫下WT和突变体中下游相关基因表达 | 第56-58页 |
| 第四部分 讨论与展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
