中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-8页 |
引言 | 第8-23页 |
一、组蛋白去甲基化酶研究简介 | 第8-18页 |
(一) 组蛋白去甲基化酶生物学功能 | 第8-9页 |
(二) 组蛋白赖氨酸去甲基化酶JMJC 蛋白家族成员及其主要功能 | 第9-14页 |
(三) FBXL10 基因及研究进展 | 第14-18页 |
二、FOXC1 蛋白研究进展 | 第18-22页 |
(一) FOX 转录因子蛋白家族简介 | 第18-19页 |
(二) FOX 家族蛋白的主要功能 | 第19-20页 |
(三) FOXC1 基因及研究进展 | 第20-22页 |
三、本论文研究的内容及意义 | 第22-23页 |
实验材料与方法 | 第23-34页 |
一、实验材料 | 第23页 |
(一) 质粒 | 第23页 |
(二) 蛋白质和抗体 | 第23页 |
(三) 哺乳动物细胞系 | 第23页 |
(四) 试剂 | 第23页 |
二、实验方法 | 第23-34页 |
I. 分子生物学实验方法 | 第23-28页 |
(一) 分子克隆 | 第23页 |
(二)DNA 琼脂糖凝胶电泳 | 第23-24页 |
(三) 质粒大量制备的方法 | 第24-26页 |
(四) 哺乳动物细胞总RNA 的提取 | 第26页 |
(五) 逆转录(Reverse Transcription, RT) | 第26-27页 |
(六) PCR | 第27-28页 |
(七) RNA 干涉(RNAi) | 第28页 |
Ⅱ. 细胞生物学实验方法 | 第28-33页 |
(一) 哺乳动物细胞系的培养 | 第28页 |
(二) 真核生物细胞的瞬时转染和荧光素酶报告基因检测 | 第28-30页 |
(三) 蛋白质的 Western Blot 分析 | 第30-33页 |
(四) MTT 细胞活性检测实验 | 第33页 |
Ⅲ. 统计分析 | 第33-34页 |
实验结果与分析 | 第34-42页 |
一、FBXL10 促进乳腺癌细胞的增殖 | 第34-37页 |
(一) FBXL10 蛋白的表达与乳腺癌恶性程度相关 | 第34-35页 |
(二) FBXL10 促进乳腺癌细胞的增殖 | 第35-37页 |
二、FBXL10 调控FOXC1 的表达 | 第37-41页 |
(一) FBXL10 与FOXC1 的表达呈现明显的负相关 | 第37-38页 |
(二) FBXL10 抑制FOXC1 启动子荧光素酶报告基因表达水平 | 第38-39页 |
(三) FBXL10 抑制内源FOXC1 基因的MRNA 水平 | 第39-40页 |
(四) FBXL10 抑制内源FOXC1 基因的蛋白水平 | 第40-41页 |
三、 FBXL10 通过抑制 FOXC1 促进乳腺癌的增殖 | 第41-42页 |
讨论 | 第42-44页 |
一、FOXC1 作为组蛋白去甲基化酶FBXL10 一个新的靶基因 | 第42-43页 |
二、组蛋白去甲基化酶 FBXL10 通过调控 FOXC1 影响乳腺癌增殖的意义及启示 | 第43-44页 |
结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-53页 |
致谢 | 第53页 |