致谢 | 第4-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-31页 |
1 植物叶夹角的研究进展 | 第12-21页 |
1.1 玉米叶夹角的相关研究 | 第12-15页 |
1.1.1 玉米叶夹角的研究现状 | 第12-13页 |
1.1.2 玉米叶夹角QTL定位研究- | 第13-14页 |
1.1.3、叶夹角相关基因的克隆 | 第14-15页 |
1.2 水稻分蘖/叶夹角的相关研究 | 第15-19页 |
1.2.1 水稻分蘖/叶夹角的研究现状 | 第15-16页 |
1.2.2 水稻分蘖/叶夹角的定位与克隆 | 第16-19页 |
1.3 植物叶夹角形成的分子机制研 | 第19-21页 |
1.3.1 植物激素调控途径 | 第19-20页 |
1.3.2 叶枕部位机械组织的形成路径 | 第20页 |
1.3.3 自主路径 | 第20-21页 |
2 图位克隆技术 | 第21-28页 |
2.1 图位克隆技术概括 | 第21页 |
2.1.1 图位克隆研究背景 | 第21页 |
2.1.2 图位克隆的原理 | 第21页 |
2.2 图位克隆的技术环节 | 第21-23页 |
2.2.1 目的基因的初级定位 | 第22页 |
2.2.2 基因精细定位 | 第22页 |
2.2.3 目标基因精细物理图谱的构建 | 第22页 |
2.2.4 候选基因的获得和功能验证 | 第22-23页 |
2.3 图位克隆的技术的应用 | 第23-28页 |
2.3.1 图位克隆技术在模式植物中的新发展 | 第23页 |
2.3.2 图位克隆技术在大基因组作物中的应用 | 第23-25页 |
2.3.3 图位克隆技术对数量性状基因的应用 | 第25-28页 |
3 玉米相关基因的功能验证研究进展 | 第28-30页 |
3.1 基因的生物信息学分析 | 第28页 |
3.2 基因的体内表达规律分析 | 第28页 |
3.3 功能获得策略分析 | 第28页 |
3.4 功能失活策略 | 第28-29页 |
3.5 基因编码产物相互作用蛋白的研究 | 第29-30页 |
4 本研究的目的与意义 | 第30-31页 |
第二章 玉米叶夹角主效QTL定位及效应分析 | 第31-45页 |
1 材料与方法 | 第31-34页 |
1.1 供试材料 | 第31-32页 |
1.2 田间试验设计 | 第32-33页 |
1.3 田间性状调查 | 第33页 |
1.4 统计分析 | 第33页 |
1.5 基因型分析和分子标记遗传连锁图谱的构建 | 第33-34页 |
1.5.1 DNA的提取与纯化 | 第33页 |
1.5.2 SSR分子标记 | 第33页 |
1.5.3 SSR标记分析及连锁图谱的构建 | 第33-34页 |
1.6 QTL定位分析 | 第34页 |
1.7 q LA4-1 区段新标记开发 | 第34页 |
1.8 背景恢复率的计算 | 第34页 |
2 结果与分析 | 第34-42页 |
2.1 初步定位结果分析 | 第34-36页 |
2.1.1 表型分析 | 第34-35页 |
2.1.2 叶夹角主效QTL初步定位及其效应分析 | 第35-36页 |
2.2 精细定位结果分析 | 第36-42页 |
2.2.1 主效QTL q LA4-1 近等基因系的构建 | 第36-37页 |
2.2.2 SSR标记分析 | 第37页 |
2.2.3 目标区域内新标记的开发 | 第37-38页 |
2.2.4 叶夹角主效QTL q LA4-1 的验证及效应分析 | 第38-39页 |
2.2.5 q LA4-1 精细定位过程 | 第39-42页 |
3 讨论 | 第42-45页 |
3.1 数量性状定位策略 | 第42-43页 |
3.2 精细定位的效果及影响因素 | 第43页 |
3.3 分子标记辅助选择的应用 | 第43-45页 |
第三章、玉米Zm CLA4基因的克隆及表达分析 | 第45-64页 |
1 材料与方法 | 第45-53页 |
1.1 试验材料及田间试验设计 | 第45-46页 |
1.2 试验耗材、试剂 | 第46页 |
1.3 试验方法 | 第46-53页 |
1.3.1 玉米总RNA的提取 | 第46页 |
1.3.2 c DNA第一链的合成 | 第46-47页 |
1.3.3 玉米基因组DNA提取与纯化 | 第47页 |
1.3.4 Zm CLA4 基因全长 c DNA 的克隆 | 第47-50页 |
1.3.5 玉米Zm CLA4基因DNA全长的获得 | 第50页 |
1.3.6 PCR扩增产物的回收 | 第50-51页 |
1.3.7 回收产物与T载体的连接 | 第51页 |
1.3.8 连接产物的转化 | 第51-52页 |
1.3.9 阳性克隆的PCR检测 | 第52页 |
1.3.10分析测序结果 | 第52页 |
1.3.11 Zm CLA4时空表达分析 | 第52-53页 |
1.3.12 q LA4-1 的候选基因的关联分析 | 第53页 |
2.结果与分析 | 第53-60页 |
2.1 RNA提取、纯化、第一链合成及检测 | 第53-54页 |
2.2 Zm CLA4 c DNA克隆及序列分析 | 第54页 |
2.3 D132和D132-NIL中Zm CLA4-1 序列的比较分析 | 第54-57页 |
2.4 Zm CLA4基因表达模式分析 | 第57-60页 |
2.5 候选基因Zm CLA4的关联分析 | 第60页 |
3 讨论 | 第60-64页 |
3.1 Zm CLA4基因序列分析 | 第61页 |
3.2 Zm CLA4基因时空表达规律分析 | 第61-62页 |
3.3 Zm CLA4基因的关联分析 | 第62-64页 |
第四章 Zm CLA4基因的功能分析 | 第64-83页 |
1 材料与方法 | 第64-73页 |
1.1 Zm CLA4亚细胞定位 | 第64-68页 |
1.1.1 表达载体 | 第64页 |
1.1.2 常用培养基 | 第64-66页 |
1.1.3 融合表达载体构建 | 第66页 |
1.1.4 洋葱表皮中亚细胞定位 | 第66-68页 |
1.2 Zm CLA4基因转化玉米和水稻 | 第68-72页 |
1.2.1 受体材料 | 第68页 |
1.2.2 RNAi干扰载体载体构建 | 第68页 |
1.2.3 Zm CLA4过量表达载体构建 | 第68-69页 |
1.2.4 玉米茎尖转基因过程 | 第69-70页 |
1.2.5 根瘤农杆菌介导培育转基因水稻 | 第70-71页 |
1.2.6 转基因植株鉴定方法 | 第71-72页 |
1.3 细胞学分析 | 第72页 |
1.3.1 试验材料 | 第72页 |
1.3.2 临时切片制备过程 | 第72页 |
1.4 Zm CLA4向地性反应试验 | 第72-73页 |
1.4.1 试验材料 | 第72页 |
1.4.2 种子预处理 | 第72页 |
1.4.3 试剂配制 | 第72-73页 |
2 结果与分析 | 第73-79页 |
2.1 Zm CLA4蛋白的亚细胞定位 | 第73页 |
2.2 转基因功能验证 | 第73-76页 |
2.3 细胞学分析 | 第76-77页 |
2.4 Zm CLA4在向地性的作用 | 第77-79页 |
3 讨论 | 第79-83页 |
3.1 转基因植株验证和亚细胞定位 | 第79-80页 |
3.2 Zm CLA4参与茎的向地性来调控玉米叶夹角 | 第80-81页 |
3.3 Zm CLA4通过改变细胞的发育来调节叶夹角 | 第81-82页 |
3.4 q LA4-1 在玉米株型改良中的应用 | 第82-83页 |
第五章 主要结论 | 第83-85页 |
1 q LA4-1 QTL的初步定位和精细定位 | 第83页 |
2 Zm CLA4基因克隆和表达分析 | 第83页 |
3 Zm CLA4基因的功能验证 | 第83页 |
4 Zm CLA4基因功能分子机制研究 | 第83-85页 |
参考文献 | 第85-99页 |
附录1 玉米总DNA的提取与纯化 | 第99-101页 |
附录2 SSR分析操作方法及试剂配制 | 第101-104页 |
附录3 质粒DNA的提取 | 第104-105页 |
附录4 精细定位所开发SSR标记 | 第105-111页 |
附录5 作者简介 | 第111-112页 |
ABSTRACT | 第112-114页 |