摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
目录 | 第9-11页 |
第一章 前言 | 第11-33页 |
1.1 机体的免疫反应 | 第11-13页 |
1.2 先天免疫系统 | 第13-16页 |
1.3 鱼类的先天免疫反应 | 第16-19页 |
1.3.1 病原识别受体 | 第16-17页 |
1.3.2 细胞因子的级联反应 | 第17-19页 |
1.4 鱼类中 Toll 样受体的信号传导途径 | 第19-23页 |
1.5 髓样分化因子 88(MyD88) | 第23-26页 |
1.5.1 MyD88 的发现 | 第23-24页 |
1.5.2 MyD88 的分子特征及生物学作用 | 第24-25页 |
1.5.3 MyD88 的在鱼类中的研究进展 | 第25-26页 |
1.6 干扰素刺激基因 | 第26-28页 |
1.7 干扰素刺激基因 15(ISG15) | 第28-31页 |
1.7.1 ISG15 的发现 | 第28-29页 |
1.7.2 ISG15 的分子结构及生物学作用 | 第29-31页 |
1.7.3 ISG15 在鱼类中的研究进展 | 第31页 |
1.8 本研究的意义 | 第31-33页 |
第二章 大菱鲆 MyD88 和 ISG15 cDNA 的克隆和序列分析 | 第33-60页 |
2.1 实验材料 | 第33-35页 |
2.1.1 实验动物、菌株及质粒 | 第33页 |
2.1.2 主要仪器与设备 | 第33-34页 |
2.1.3 主要试剂及溶液的配制 | 第34-35页 |
2.2 实验方法 | 第35-45页 |
2.2.1 大菱鲆组织的获取 | 第35页 |
2.2.2 总 RNA 的提取及质量检测 | 第35-36页 |
2.2.3 cDNA 第一链的合成 | 第36-37页 |
2.2.4 大菱鲆 MyD88 以及 ISG15 全长 cDNA 的克隆 | 第37-41页 |
2.2.5 大菱鲆 MyD88 与 ISG15 的 3’及 5’RACE 片段的克隆及测序 | 第41-43页 |
2.2.6 全长 cDNA 序列的拼接 | 第43页 |
2.2.7 大菱鲆 ISG15 基因序列的克隆 | 第43-45页 |
2.2.8 序列分析与进化树的构建 | 第45页 |
2.3 实验结果及分析 | 第45-58页 |
2.3.1 RNA 样品的制备与质量检测 | 第45页 |
2.3.2 大菱鲆 MyD88 和 ISG15 核心片段的克隆及测序结果 | 第45-47页 |
2.3.3 3’RACE 片段的克隆及测序结果 | 第47-48页 |
2.3.4 5’RACE 片段的克隆及测序结果 | 第48-50页 |
2.3.5 全长 cDNA 序列的拼接及分析 | 第50页 |
2.3.6 SmMyD88 和 SmISG15 cDNA 序列的分子特征 | 第50-55页 |
2.3.7 SmISG15 的基因组序列的克隆及测序结果 | 第55-56页 |
2.3.8 SmISG15 的基因组结构特征 | 第56-57页 |
2.3.9 SmMyD88 和 SmISG15 的系统进化分析 | 第57-58页 |
2.4 讨论 | 第58-60页 |
第三章 大菱鲆 MyD88 和 ISG15 mRNAs 的组织分布研究 | 第60-65页 |
3.1 实验材料 | 第60页 |
3.1.1 实验动物 | 第60页 |
3.1.2 实验所用的主要仪器与设备 | 第60页 |
3.1.3 主要试剂及溶液的配制 | 第60页 |
3.2 实验方法 | 第60-62页 |
3.2.1 获取实验用的大菱鲆组织 | 第60页 |
3.2.2 总 RNA 的提取及质量检测 | 第60-61页 |
3.2.3 cDNA 第一链的合成 | 第61页 |
3.2.4 引物设计 | 第61-62页 |
3.2.5 Real-time PCR 检测 | 第62页 |
3.2.6 数据的处理 | 第62页 |
3.3 结果分析 | 第62-64页 |
3.4 讨论 | 第64-65页 |
第四章 大菱鲆 ISG15 和 MyD88 基因的表达分析 | 第65-73页 |
4.1 实验材料 | 第65-66页 |
4.1.1 鱼体及刺激物 | 第65-66页 |
4.1.2 主要仪器与设备 | 第66页 |
4.1.3 试剂及溶液配制 | 第66页 |
4.2 实验方法 | 第66-67页 |
4.2.1 刺激物感染大菱鲆鱼体实验 | 第66页 |
4.2.2 模板的制备 | 第66-67页 |
4.2.3 Real-time PCR 检测 | 第67页 |
4.2.4 统计学分析 | 第67页 |
4.3 结果分析 | 第67-70页 |
4.4 讨论 | 第70-73页 |
4.4.1 SmMyD88 的表达分析情况 | 第70-71页 |
4.4.2 SmISG15 的表达分析情况 | 第71-73页 |
结论 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-84页 |
致谢 | 第84-85页 |
个人简历 | 第85页 |
学术论文 | 第85-86页 |