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大菱鲆髓样分化因子88(MyD88)及干扰素刺激基因15(ISG15)的克隆及其免疫应答表达模式的研究

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
目录第9-11页
第一章 前言第11-33页
    1.1 机体的免疫反应第11-13页
    1.2 先天免疫系统第13-16页
    1.3 鱼类的先天免疫反应第16-19页
        1.3.1 病原识别受体第16-17页
        1.3.2 细胞因子的级联反应第17-19页
    1.4 鱼类中 Toll 样受体的信号传导途径第19-23页
    1.5 髓样分化因子 88(MyD88)第23-26页
        1.5.1 MyD88 的发现第23-24页
        1.5.2 MyD88 的分子特征及生物学作用第24-25页
        1.5.3 MyD88 的在鱼类中的研究进展第25-26页
    1.6 干扰素刺激基因第26-28页
    1.7 干扰素刺激基因 15(ISG15)第28-31页
        1.7.1 ISG15 的发现第28-29页
        1.7.2 ISG15 的分子结构及生物学作用第29-31页
        1.7.3 ISG15 在鱼类中的研究进展第31页
    1.8 本研究的意义第31-33页
第二章 大菱鲆 MyD88 和 ISG15 cDNA 的克隆和序列分析第33-60页
    2.1 实验材料第33-35页
        2.1.1 实验动物、菌株及质粒第33页
        2.1.2 主要仪器与设备第33-34页
        2.1.3 主要试剂及溶液的配制第34-35页
    2.2 实验方法第35-45页
        2.2.1 大菱鲆组织的获取第35页
        2.2.2 总 RNA 的提取及质量检测第35-36页
        2.2.3 cDNA 第一链的合成第36-37页
        2.2.4 大菱鲆 MyD88 以及 ISG15 全长 cDNA 的克隆第37-41页
        2.2.5 大菱鲆 MyD88 与 ISG15 的 3’及 5’RACE 片段的克隆及测序第41-43页
        2.2.6 全长 cDNA 序列的拼接第43页
        2.2.7 大菱鲆 ISG15 基因序列的克隆第43-45页
        2.2.8 序列分析与进化树的构建第45页
    2.3 实验结果及分析第45-58页
        2.3.1 RNA 样品的制备与质量检测第45页
        2.3.2 大菱鲆 MyD88 和 ISG15 核心片段的克隆及测序结果第45-47页
        2.3.3 3’RACE 片段的克隆及测序结果第47-48页
        2.3.4 5’RACE 片段的克隆及测序结果第48-50页
        2.3.5 全长 cDNA 序列的拼接及分析第50页
        2.3.6 SmMyD88 和 SmISG15 cDNA 序列的分子特征第50-55页
        2.3.7 SmISG15 的基因组序列的克隆及测序结果第55-56页
        2.3.8 SmISG15 的基因组结构特征第56-57页
        2.3.9 SmMyD88 和 SmISG15 的系统进化分析第57-58页
    2.4 讨论第58-60页
第三章 大菱鲆 MyD88 和 ISG15 mRNAs 的组织分布研究第60-65页
    3.1 实验材料第60页
        3.1.1 实验动物第60页
        3.1.2 实验所用的主要仪器与设备第60页
        3.1.3 主要试剂及溶液的配制第60页
    3.2 实验方法第60-62页
        3.2.1 获取实验用的大菱鲆组织第60页
        3.2.2 总 RNA 的提取及质量检测第60-61页
        3.2.3 cDNA 第一链的合成第61页
        3.2.4 引物设计第61-62页
        3.2.5 Real-time PCR 检测第62页
        3.2.6 数据的处理第62页
    3.3 结果分析第62-64页
    3.4 讨论第64-65页
第四章 大菱鲆 ISG15 和 MyD88 基因的表达分析第65-73页
    4.1 实验材料第65-66页
        4.1.1 鱼体及刺激物第65-66页
        4.1.2 主要仪器与设备第66页
        4.1.3 试剂及溶液配制第66页
    4.2 实验方法第66-67页
        4.2.1 刺激物感染大菱鲆鱼体实验第66页
        4.2.2 模板的制备第66-67页
        4.2.3 Real-time PCR 检测第67页
        4.2.4 统计学分析第67页
    4.3 结果分析第67-70页
    4.4 讨论第70-73页
        4.4.1 SmMyD88 的表达分析情况第70-71页
        4.4.2 SmISG15 的表达分析情况第71-73页
结论第73-74页
参考文献第74-84页
致谢第84-85页
个人简历第85页
学术论文第85-86页

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