| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第11-25页 |
| 1.1 研究目的与意义 | 第11-12页 |
| 1.2 国内外研究进展 | 第12-24页 |
| 1.2.1 花发育概述 | 第12-19页 |
| 1.2.2 LEAFY基因的研究进展 | 第19-21页 |
| 1.2.3 RNAi概述 | 第21-22页 |
| 1.2.4 反义RNA的研究进展 | 第22-24页 |
| 1.3 技术路线 | 第24-25页 |
| 2 试验材料和方法 | 第25-37页 |
| 2.1 试验材料 | 第25-26页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第25页 |
| 2.1.2 细菌菌株与质粒载体 | 第25页 |
| 2.1.3 主要试剂与试剂盒 | 第25页 |
| 2.1.4 试验器材 | 第25-26页 |
| 2.1.5 引物合成 | 第26页 |
| 2.2 试验方法 | 第26-37页 |
| 2.2.1 构建植物表达载体应用的方法 | 第26-30页 |
| 2.2.2 植物表达载体的构建 | 第30-32页 |
| 2.2.3 重组质粒转化农杆菌 | 第32页 |
| 2.2.4 PPT选择压的确定 | 第32-33页 |
| 2.2.5 HygB选择压的确定 | 第33页 |
| 2.2.6 遗传转化体系的建立 | 第33-34页 |
| 2.2.7 转化植株的筛选 | 第34页 |
| 2.2.8 转化植株的分子检测 | 第34-36页 |
| 2.2.9 转基因植株拟南芥的表型分析 | 第36-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-53页 |
| 3.1 植物表达载体的分子检测 | 第37-40页 |
| 3.1.1 正义植物表达载体的分子检测 | 第37-38页 |
| 3.1.2 反义植物表达载体的分子检测 | 第38-40页 |
| 3.1.3 RNA干扰表达载体的分子检测 | 第40页 |
| 3.2 植物表达载体对农杆菌的转化 | 第40-41页 |
| 3.3 抗生素选择压的确定 | 第41-43页 |
| 3.3.1 PPT选择压的确定 | 第41-42页 |
| 3.3.2 Hyg B选择压的确定 | 第42-43页 |
| 3.4 洋葱AccLFY基因对拟南芥的遗传转化 | 第43-53页 |
| 3.4.1 转基因植株拟南芥T0代种子的获得 | 第43-44页 |
| 3.4.2 T1代转基因植株拟南芥的筛选 | 第44-46页 |
| 3.4.3 转基因植株的分子检测 | 第46-48页 |
| 3.4.4 RT-PCR检测转基因拟南芥AaLFY的表达水平 | 第48-50页 |
| 3.4.5 转基因植株拟南芥的表型分析及功能验证 | 第50-53页 |
| 4 讨论 | 第53-55页 |
| 4.1 正、反义及RNA干扰表达载体的构建 | 第53页 |
| 4.2 植物表达载体的酶切 | 第53-54页 |
| 4.3 AcLFY基因的功能验证 | 第54-55页 |
| 5 结论 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-66页 |
| 附录 | 第66-71页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第71页 |