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口蹄疫病毒VP1蛋白诱导犊牛甲状腺细胞凋亡及其功能域的鉴定

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-10页
文献综述第13-24页
    第一章 口蹄疫病毒诱导细胞凋亡的研究进展第13-24页
        1.1 前言第13页
        1.2 口蹄疫病毒(FMDV)第13-14页
        1.3 细胞凋亡第14页
            1.3.1 细胞凋亡的概念第14页
            1.3.2 细胞凋亡的形态学特征第14页
        1.4 细胞凋亡信号通路第14-21页
            1.4.1 细胞凋亡的线粒体途径第15-16页
            1.4.2 细胞凋亡的内质网途径第16-19页
            1.4.3 细胞凋亡的死亡受体通路第19-21页
        1.5 口蹄疫病毒诱导细胞凋亡的研究第21-23页
        1.6 结论第23-24页
试验研究第24-55页
    第二章 犊牛甲状腺初代细胞的制备第24-28页
        2.1 主要试验材料和仪器第24-25页
            2.1.1 主要试剂第24页
            2.1.2 主要器械第24页
            2.1.3 甲状腺组织第24-25页
        2.2 试验方法第25-26页
            2.2.1 犊牛甲状腺的无菌处理第25页
            2.2.2 培养基的配制第25页
            2.2.3 犊牛甲状腺初代细胞制备第25-26页
            2.2.4 犊牛甲状腺初代细胞的培养第26页
        2.3 试验结果第26页
        2.4 讨论第26-27页
        2.5 小结第27-28页
    第三章 FMDV VP1 蛋白的重组构建及诱导犊牛甲状腺细胞凋亡的检测第28-47页
        3.1 试验材料与方法第28-31页
            3.1.1 病毒、菌株、载体、细胞第28-29页
            3.1.2 试验主要试剂及试剂盒第29-30页
            3.1.3 试验主要器材第30页
            3.1.4 主要试剂的配制第30-31页
        3.2 试验方法第31-39页
            3.2.1 重组质粒的构建与培养第31-36页
            3.2.2 细胞凋亡的检测第36-39页
        3.3 试验结果第39-44页
            3.3.1 重组质粒的酶切鉴定第39-40页
            3.3.2 Western-Blot 检测 FMDV VP1 的表达第40-41页
            3.3.3 显微镜观察细胞凋亡情况第41页
            3.3.4 Annexin-V-FITC/PI 双染检测细胞凋亡第41-42页
            3.3.5 JC-1 检测线粒体膜电位变化第42-43页
            3.3.6 Hoechst-33258 荧光染色第43-44页
        3.4 讨论第44-45页
        3.5 小结第45-47页
    第四章 FMDV VP1 蛋白引起细胞凋亡功能域的鉴定第47-55页
        4.1 试验材料第47-48页
            4.1.1 病毒、菌株、载体、细胞第47页
            4.1.2 试验主要试剂及试剂第47页
            4.1.3 试验主要器材第47-48页
            4.1.4 主要试剂的配制第48页
        4.2 试验方法第48-50页
            4.2.1 口蹄疫病毒 VP1 各截断重组质粒的构建第48-49页
            4.2.2 细胞培养和接种细胞培板第49页
            4.2.3 脂质体转染第49-50页
            4.2.4 Annexin-V-FITC/PI 双染检测细胞凋亡第50页
        4.3 试验结果第50-53页
            4.3.1 重组质粒的构建第50页
            4.3.2 VP1 截短片段的酶切结果第50-51页
            4.3.3 Annexin-V-FITC/PI 双染检测细胞凋亡第51-53页
        4.4 讨论第53-54页
        4.5 小结第54-55页
参考文献第55-62页
致谢第62-64页
作者简介第64页

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