摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
文献综述 | 第13-24页 |
第一章 口蹄疫病毒诱导细胞凋亡的研究进展 | 第13-24页 |
1.1 前言 | 第13页 |
1.2 口蹄疫病毒(FMDV) | 第13-14页 |
1.3 细胞凋亡 | 第14页 |
1.3.1 细胞凋亡的概念 | 第14页 |
1.3.2 细胞凋亡的形态学特征 | 第14页 |
1.4 细胞凋亡信号通路 | 第14-21页 |
1.4.1 细胞凋亡的线粒体途径 | 第15-16页 |
1.4.2 细胞凋亡的内质网途径 | 第16-19页 |
1.4.3 细胞凋亡的死亡受体通路 | 第19-21页 |
1.5 口蹄疫病毒诱导细胞凋亡的研究 | 第21-23页 |
1.6 结论 | 第23-24页 |
试验研究 | 第24-55页 |
第二章 犊牛甲状腺初代细胞的制备 | 第24-28页 |
2.1 主要试验材料和仪器 | 第24-25页 |
2.1.1 主要试剂 | 第24页 |
2.1.2 主要器械 | 第24页 |
2.1.3 甲状腺组织 | 第24-25页 |
2.2 试验方法 | 第25-26页 |
2.2.1 犊牛甲状腺的无菌处理 | 第25页 |
2.2.2 培养基的配制 | 第25页 |
2.2.3 犊牛甲状腺初代细胞制备 | 第25-26页 |
2.2.4 犊牛甲状腺初代细胞的培养 | 第26页 |
2.3 试验结果 | 第26页 |
2.4 讨论 | 第26-27页 |
2.5 小结 | 第27-28页 |
第三章 FMDV VP1 蛋白的重组构建及诱导犊牛甲状腺细胞凋亡的检测 | 第28-47页 |
3.1 试验材料与方法 | 第28-31页 |
3.1.1 病毒、菌株、载体、细胞 | 第28-29页 |
3.1.2 试验主要试剂及试剂盒 | 第29-30页 |
3.1.3 试验主要器材 | 第30页 |
3.1.4 主要试剂的配制 | 第30-31页 |
3.2 试验方法 | 第31-39页 |
3.2.1 重组质粒的构建与培养 | 第31-36页 |
3.2.2 细胞凋亡的检测 | 第36-39页 |
3.3 试验结果 | 第39-44页 |
3.3.1 重组质粒的酶切鉴定 | 第39-40页 |
3.3.2 Western-Blot 检测 FMDV VP1 的表达 | 第40-41页 |
3.3.3 显微镜观察细胞凋亡情况 | 第41页 |
3.3.4 Annexin-V-FITC/PI 双染检测细胞凋亡 | 第41-42页 |
3.3.5 JC-1 检测线粒体膜电位变化 | 第42-43页 |
3.3.6 Hoechst-33258 荧光染色 | 第43-44页 |
3.4 讨论 | 第44-45页 |
3.5 小结 | 第45-47页 |
第四章 FMDV VP1 蛋白引起细胞凋亡功能域的鉴定 | 第47-55页 |
4.1 试验材料 | 第47-48页 |
4.1.1 病毒、菌株、载体、细胞 | 第47页 |
4.1.2 试验主要试剂及试剂 | 第47页 |
4.1.3 试验主要器材 | 第47-48页 |
4.1.4 主要试剂的配制 | 第48页 |
4.2 试验方法 | 第48-50页 |
4.2.1 口蹄疫病毒 VP1 各截断重组质粒的构建 | 第48-49页 |
4.2.2 细胞培养和接种细胞培板 | 第49页 |
4.2.3 脂质体转染 | 第49-50页 |
4.2.4 Annexin-V-FITC/PI 双染检测细胞凋亡 | 第50页 |
4.3 试验结果 | 第50-53页 |
4.3.1 重组质粒的构建 | 第50页 |
4.3.2 VP1 截短片段的酶切结果 | 第50-51页 |
4.3.3 Annexin-V-FITC/PI 双染检测细胞凋亡 | 第51-53页 |
4.4 讨论 | 第53-54页 |
4.5 小结 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-62页 |
致谢 | 第62-64页 |
作者简介 | 第64页 |