| 符号说明 | 第4-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-25页 |
| 1.1 卵母细胞老化 | 第11-17页 |
| 1.1.1 卵母细胞老化概述 | 第11页 |
| 1.1.2 卵母细胞老化后果 | 第11-12页 |
| 1.1.3 卵母细胞老化和激活率 | 第12-13页 |
| 1.1.4 卵母细胞老化和线粒体功能 | 第13-14页 |
| 1.1.5 卵母细胞老化和钙 | 第14-15页 |
| 1.1.6 卵母细胞老化和纺锤体 | 第15-16页 |
| 1.1.7 卵母细胞老化和氧化应激 | 第16页 |
| 1.1.8 卵母细胞老化和表观遗传 | 第16-17页 |
| 1.2 自噬 | 第17-25页 |
| 1.2.1 自噬概述 | 第17-18页 |
| 1.2.2 自噬发生过程 | 第18-19页 |
| 1.2.3 自噬调节机制 | 第19-22页 |
| 1.2.3.1 AMPK通路机制 | 第19-20页 |
| 1.2.3.2 TOR通路机制 | 第20页 |
| 1.2.3.3 胰岛素/生长因子途径 | 第20-22页 |
| 1.2.4 氧化应激和自噬 | 第22-23页 |
| 1.2.5 自噬和老化 | 第23-24页 |
| 1.2.6 研究的目的与意义 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-26页 |
| 2.1.1 主要试剂及配置 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-31页 |
| 2.2.1 小鼠超排处理 | 第26页 |
| 2.2.2 卵母细胞获取 | 第26-27页 |
| 2.2.3 条件培养基制备 | 第27页 |
| 2.2.4 免疫荧光染色 | 第27页 |
| 2.2.5 蛋白质杂交(Western Blot) | 第27-29页 |
| 2.2.5.1 westernblot试剂及溶液 | 第27-28页 |
| 2.2.5.2 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第28-29页 |
| 2.2.5.3 抗原抗体的结合及显色 | 第29页 |
| 2.2.6 卵母细胞酒精联合6-DMAP激活 | 第29页 |
| 2.2.7 卵母细胞SrCl_2激活 | 第29页 |
| 2.2.8 卵母细胞激活的判定 | 第29页 |
| 2.2.9 胚胎培养 | 第29-30页 |
| 2.2.10 卵母细胞内活性氧物质的检测 | 第30页 |
| 2.2.11 卵母细胞内钙离子储量的检测 | 第30-31页 |
| 2.2.12 JC-1染色方法 | 第31页 |
| 2.2.13 纺锤体(α-微管)染色 | 第31页 |
| 2.3 数据统计 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-43页 |
| 3.1 自噬和小鼠卵母细胞老化密切相关 | 第32-33页 |
| 3.2 RAPA或3-MA对小鼠老化卵母细胞激活率的影响 | 第33-34页 |
| 3.3 Western Blot验证RAPA和3-MA药物效果 | 第34-35页 |
| 3.4 RAPA或3-MA对小鼠老化卵母细胞Caspase-3表达量的影响 | 第35-36页 |
| 3.5 RAPA或3-MA对小鼠老化卵母细胞发育的影响 | 第36页 |
| 3.6 RAPA或3-MA对小鼠老化卵母细胞钙离子的影响 | 第36-38页 |
| 3.7 RAPA或3-MA对小鼠老化卵母细胞ROS水平的影响 | 第38-39页 |
| 3.8 RAPA或3-MA对小鼠老化卵母细胞线粒体膜电位的影响。 | 第39-41页 |
| 3.9 RAPA或3-MA对小鼠老化卵母细胞纺锤体的影响 | 第41-43页 |
| 4 讨论 | 第43-45页 |
| 5 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第65页 |
