| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 第1章 绪论 | 第10-28页 |
| 1.1 褐藻胶 | 第10-12页 |
| 1.1.1 褐藻胶简介 | 第10-11页 |
| 1.1.2 褐藻胶的应用 | 第11-12页 |
| 1.2 褐藻寡糖 | 第12-19页 |
| 1.2.1 褐藻寡糖简介 | 第12页 |
| 1.2.2 褐藻寡糖的制备方法 | 第12-14页 |
| 1.2.3 褐藻寡糖的生物活性 | 第14-18页 |
| 1.2.4 褐藻寡糖的纯化 | 第18-19页 |
| 1.3 褐藻胶裂解酶 | 第19-26页 |
| 1.3.1 褐藻胶裂解酶简介 | 第19-20页 |
| 1.3.2 褐藻胶裂解酶的来源 | 第20-23页 |
| 1.3.3 褐藻胶裂解酶的分类 | 第23-24页 |
| 1.3.4 褐藻胶裂解酶的活性测定方法 | 第24-25页 |
| 1.3.5 褐藻胶裂解酶的应用 | 第25-26页 |
| 1.4 本研究的意义 | 第26-28页 |
| 第2章 南极真菌产褐藻胶裂解酶菌株的筛选与鉴定 | 第28-37页 |
| 2.1 材料与方法 | 第28-32页 |
| 2.1.1 材料来源 | 第28页 |
| 2.1.2 主要试剂及配制 | 第28-29页 |
| 2.1.3 培养基及成分 | 第29页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第29页 |
| 2.1.5 产褐藻胶裂解酶菌株的筛选 | 第29-30页 |
| 2.1.6 褐藻胶裂解酶活力测定 | 第30-32页 |
| 2.1.7 褐藻胶裂解酶活性菌株的种属鉴定 | 第32页 |
| 2.2 实验结果 | 第32-36页 |
| 2.2.1 初筛及复筛结果 | 第32-33页 |
| 2.2.2 DNS法测定褐藻胶酶活结果 | 第33-34页 |
| 2.2.3 褐藻胶裂解酶菌株的种属鉴定结果 | 第34-36页 |
| 2.3 讨论 | 第36页 |
| 2.4 小结 | 第36-37页 |
| 第3章 南极真菌褐藻胶裂解酶基因的克隆及表达 | 第37-50页 |
| 3.1 材料与方法 | 第37-42页 |
| 3.1.1 材料 | 第37-38页 |
| 3.1.2 试验用缓冲液配制 | 第38页 |
| 3.1.3 培养基 | 第38-39页 |
| 3.1.4 SDS-PAGE电泳 | 第39页 |
| 3.1.5 工程菌的构建 | 第39-41页 |
| 3.1.6 重组蛋白的诱导表达及纯化 | 第41-42页 |
| 3.1.7 诱导表达条件的优化 | 第42页 |
| 3.2 实验结果 | 第42-48页 |
| 3.2.1 褐藻胶裂解酶基因Aly-i7的序列分析 | 第42-45页 |
| 3.2.2 南极真菌藻胶裂解酶基因Aly-i7的克隆 | 第45页 |
| 3.2.3 重组质粒的双酶切鉴定 | 第45页 |
| 3.2.4 重组酶的诱导表达与蛋白纯化 | 第45-47页 |
| 3.2.5 重组酶的诱导表达条件优化 | 第47-48页 |
| 3.3 讨论 | 第48页 |
| 3.4 小结 | 第48-50页 |
| 第4章 重组褐藻胶裂解酶的酶学性质研究 | 第50-59页 |
| 4.1 实验材料 | 第50-51页 |
| 4.1.1 出发菌株与培养基 | 第50页 |
| 4.1.2 实验试剂及配制 | 第50-51页 |
| 4.1.3 实验设备 | 第51页 |
| 4.2 实验方法 | 第51-53页 |
| 4.2.1 底物选择性 | 第51页 |
| 4.2.2 温度对褐藻胶裂解酶Aly-i7的影响 | 第51页 |
| 4.2.3 pH对褐藻胶裂解酶Aly-i7的影响 | 第51-52页 |
| 4.2.4 不同金属离子对Aly-i7的酶活力影响 | 第52页 |
| 4.2.5 Aly-i7的酶解产物分析 | 第52-53页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第53-57页 |
| 4.3.1 Aly-i7的底物选择性 | 第53页 |
| 4.3.2 Aly-i7最适反应温度 | 第53-54页 |
| 4.3.3 Aly-i7的热稳定性 | 第54页 |
| 4.3.4 Aly-i7最适pH | 第54-55页 |
| 4.3.5 Aly-i7的pH稳定性 | 第55-56页 |
| 4.3.6 金属离子对Aly-i7的酶活力影响 | 第56页 |
| 4.3.7 Aly-i7的产物分析 | 第56-57页 |
| 4.4 讨论 | 第57-58页 |
| 4.5 小结 | 第58-59页 |
| 第5章 褐藻寡糖对黄瓜白粉病的防治效果研究 | 第59-66页 |
| 5.1 实验材料 | 第59-60页 |
| 5.1.1 菌种与培养基 | 第59页 |
| 5.1.2 主要试剂和材料 | 第59-60页 |
| 5.1.3 主要仪器 | 第60页 |
| 5.2 实验方法 | 第60-62页 |
| 5.2.1 褐藻寡糖的制备及药剂配制 | 第60-61页 |
| 5.2.2 褐藻寡糖对黄瓜白粉病菌的毒力测定 | 第61-62页 |
| 5.2.3 褐藻寡糖防治黄瓜白粉病的盆栽实验 | 第62页 |
| 5.3 结果与分析 | 第62-64页 |
| 5.3.1 褐藻寡糖的室内毒力测定结果 | 第62-63页 |
| 5.3.2 5%褐藻寡糖对黄瓜白粉病的盆栽防效实验 | 第63-64页 |
| 5.4 讨论 | 第64-65页 |
| 5.5 小结 | 第65-66页 |
| 第6章 总结与展望 | 第66-68页 |
| 6.1 总结 | 第66-67页 |
| 6.2 展望 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第77-78页 |
