| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| Table of Contents | 第8-11页 |
| 第1章 引言 | 第11-22页 |
| 1.1 骨性关节炎简述 | 第11-12页 |
| 1.1.1 骨性关节炎的发病机制 | 第11-12页 |
| 1.1.2 骨性关节炎的治疗进展与欧凯疗法 | 第12页 |
| 1.2 自噬分子机制简介 | 第12-16页 |
| 1.2.1 自噬的核心蛋白复合体 | 第13-14页 |
| 1.2.2 调节自噬的重要信号通路 | 第14-16页 |
| 1.3 自噬与凋亡 | 第16-18页 |
| 1.3.1 凋亡机制简介 | 第16-17页 |
| 1.3.2 自噬与凋亡的相互作用 | 第17-18页 |
| 1.4 自噬与骨性关节炎 | 第18-20页 |
| 1.5 本课题研究目标、内容与意义 | 第20-22页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第22-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-28页 |
| 2.1.1 实验所用细胞 | 第22页 |
| 2.1.2 主要实验试剂、耗材与设备 | 第22-25页 |
| 2.1.3 主要自配实验试剂配置方法 | 第25-28页 |
| 2.2 实验方法、步骤 | 第28-34页 |
| 2.2.1 人软骨细胞的分离与培养 | 第28页 |
| 2.2.2 人软骨细胞换液与传代 | 第28-29页 |
| 2.2.3 细胞爬片 | 第29页 |
| 2.2.4 蛋白提取 | 第29-30页 |
| 2.2.5 人软骨细胞增值存活率测定 | 第30-31页 |
| 2.2.6 甲苯胺蓝细胞爬片染色 | 第31页 |
| 2.2.7 免疫组化 | 第31-32页 |
| 2.2.8 鬼笔环肽—MDC—DAPI联合染色 | 第32页 |
| 2.2.9 Western Blotting蛋白表达检测 | 第32-33页 |
| 2.2.10 统计学方法 | 第33-34页 |
| 第3章 结果与分析 | 第34-55页 |
| 3.1 人OA软骨细胞的形态与鉴定 | 第34-35页 |
| 3.2 不同浓度胎牛血清对人OA软骨细胞基质的作用 | 第35-37页 |
| 3.3 不同浓度胎牛血清对人OA软骨细胞的自噬作用的影响 | 第37-41页 |
| 3.3.1 不同浓度血清对人OA软骨细胞中自噬标记分子LC3B、Beclin1及AMPK信号通路的影响 | 第37-39页 |
| 3.3.2 不同浓度血清对人OA软骨细胞中自噬溶酶体表达量的影响 | 第39-41页 |
| 3.4 血清诱导人OA软骨细胞自噬同时伴随细胞存活提高并抑制其凋亡 | 第41-44页 |
| 3.4.1 一定浓度血清促进人OA软骨细胞存活率的提高 | 第41-42页 |
| 3.4.2 不同浓度血清对人OA软骨细胞增殖活性的影响 | 第42-43页 |
| 3.4.3 不同浓度血清对人OA软骨细胞凋亡的影响 | 第43-44页 |
| 3.5 一定浓度血清对人OA软骨细胞自噬作用的机制探索 | 第44-55页 |
| 3.5.1 不同浓度血清对AKT与mTOR的作用 | 第44-46页 |
| 3.5.2 5%浓度血清对人OA软骨细胞自噬的调控受mTOR和AKT两条信号通路的影响,但mTOR信号通路占主导位置 | 第46-49页 |
| 3.5.3 5%浓度血清促进人OA软骨细胞存活(抑制凋亡)的作用受mTOR和AKT两条信号通路的综合影响 | 第49-51页 |
| 3.5.4 mTOR和AKT两条信号通路对人OA软骨细胞基质代谢的调节 | 第51-55页 |
| 第4章 讨论 | 第55-59页 |
| 第5章 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
