内容摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6页 |
第一章 文献综述 | 第9-24页 |
第一节 无脊椎动物先天免疫概述 | 第9-17页 |
1.1 引言 | 第9页 |
1.2 细胞免疫 | 第9-13页 |
1.3 体液免疫 | 第13-17页 |
第二节 清道夫受体概述 | 第17-22页 |
2.1 引言 | 第17页 |
2.2 清道夫受体的分类 | 第17-19页 |
2.3 清道夫受体的结构和功能 | 第19-20页 |
2.4 B型清道夫受体 | 第20-22页 |
第三节 本研究的意义及技术路线 | 第22-24页 |
3.1 本研究的意义 | 第22-23页 |
3.2 技术路线 | 第23-24页 |
第二章 B类清道夫受体(EsSR-B1)基因的克隆与表达模式 | 第24-41页 |
第一节 前言 | 第24-25页 |
第二节 材料与方法 | 第25-32页 |
2.1 中华绒螯蟹体内细菌刺激、样品收集 | 第25-28页 |
2.2 EsSR-B1cDNA全长克隆 | 第28-29页 |
2.3 生物信息学分析 | 第29-30页 |
2.4 qRT-PCR分析检测EsSR-B1各组织表达和细菌刺激后诱导表达 | 第30-32页 |
第三节 结果 | 第32-39页 |
3.1 EsSR-B1的cDNA全长分析 | 第32-36页 |
3.2 EsSR-B1的组织表达分析 | 第36-37页 |
3.3 EsSR-B1在细菌刺激后的血细胞中表达模式分析 | 第37-39页 |
第四节 讨论 | 第39-41页 |
第三章 B类清道夫受体(EsSR-B1)的吞噬功能研究 | 第41-58页 |
第一节 前言 | 第41-42页 |
第二节 材料与方法 | 第42-51页 |
2.1 EsSR-B1重组蛋白表达载体的构建 | 第42-44页 |
2.2 EsSR-B1重组蛋白的表达、纯化与复性 | 第44-47页 |
2.3 细菌结合实验 | 第47-48页 |
2.4 EsSR-B1的体外干扰 | 第48-49页 |
2.5 荧光标记细菌和吞噬试验 | 第49-51页 |
第三节 结果 | 第51-56页 |
3.1 EsSR-B1重组蛋白的表达,纯化和复性 | 第51-52页 |
3.2 rEsSR-B1与不同细菌的结合分析 | 第52-53页 |
3.3 EsSR-B1调控中华绒螯蟹的吞噬作用 | 第53-56页 |
第四节 讨论 | 第56-58页 |
第四章 EsSR-B1对抗菌肽表达的调控 | 第58-64页 |
第一节 前言 | 第58-59页 |
第二节 材料与方法 | 第59-60页 |
2.1 血细胞的培养和EsSR-B1的体外干扰 | 第59页 |
2.2 细菌刺激 | 第59页 |
2.3 利用RT-qPCR进行抗菌肽基因表达量检测 | 第59-60页 |
第三节 结果 | 第60-63页 |
3.1 原代血细胞培养 | 第60页 |
3.2 EsSR-B1调控抗菌肽的表达 | 第60-63页 |
第四节 讨论 | 第63-64页 |
总结与展望 | 第64-66页 |
参考文献 | 第66-74页 |
附录 攻读硕士期间发表论文 | 第74-75页 |
致谢 | 第75-76页 |