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禾谷镰刀菌中FgKAR9及其互作蛋白的鉴定与功能分析

摘要第5-6页
abstract第6-7页
第一章 文献综述第10-15页
    1.1 禾谷镰刀菌的生物学特征第10-11页
    1.2 禾谷镰刀菌危害第11页
    1.3 禾谷镰刀菌研究进展第11-12页
    1.4 微管和微管相关蛋白的研究背景第12-14页
    1.5 本研究的目的和意义第14-15页
第二章 Fgtub2突变体角变子的收集和重测序分析第15-20页
    2.1 材料、试剂、仪器第15页
        2.1.1 材料第15页
        2.1.2 试剂第15页
        2.1.3 仪器第15页
    2.2 实验方法第15-16页
    2.3 实验结果第16-19页
        2.3.1 Fgtub2突变体在V8培养基上发生角变第16页
        2.3.2 角变子的收集和分类第16页
        2.3.3 角变子重测序结果分析第16-19页
    2.4 讨论第19-20页
第三章 FgKAR9突变位点的验证和角变子的表型分析第20-31页
    3.1 材料、试剂、仪器第20页
        3.1.1 材料第20页
        3.1.2 试剂第20页
        3.1.3 仪器第20页
    3.2 实验方法第20-26页
        3.2.1 Fgtub2kar9双敲除突变体的获得第20-25页
        3.2.2 菌落形态观察及生长速度测定第25页
        3.2.3 产孢率测定第25页
        3.2.4 有性杂交第25页
        3.2.5 小麦穗接种实验第25页
        3.2.6 玉米须接种实验第25-26页
    3.3 结果第26-30页
        3.3.1 Fgtub2Fgkar9双敲除突变体的检测第26页
        3.3.2 角变子和双敲除突变体的表型变化第26-28页
        3.3.3 角变子和双敲除突变体的致病力测定第28-29页
        3.3.4 角变子和双敲除突变体的有性生殖正常第29-30页
    3.4 讨论第30-31页
第四章 Fgkar9基因敲除盒的构建和southernblot验证第31-42页
    4.1 材料、试剂、仪器第31-33页
        4.1.1 材料第31页
        4.1.2 试剂第31-33页
        4.1.3 仪器第33页
    4.2 实验方法第33-39页
        4.2.1 FgKAR9基因的敲除引物设计第33-34页
        4.2.2 SplitPCR方法构建FgKAR9基因敲除体系第34-35页
        4.2.3 野生型禾谷镰刀菌原生质体转化第35-36页
        4.2.4 Fgkar9缺失突变体的获得第36-37页
        4.2.5 用southernblot方法验证Fgkar9突变体第37-39页
    4.3 结果第39-41页
        4.3.1 FgKAR9基因的序列分析第39-40页
        4.3.2 Southernblot检测得到Fgkar9突变体第40-41页
    4.4 讨论第41-42页
第五章 FgKAR9基因的功能分析第42-54页
    5.1 材料、试剂、仪器第42-43页
        5.1.1 材料第42页
        5.1.2 试剂第42-43页
        5.1.3 仪器第43页
    5.2 实验方法第43-49页
        5.2.1 过表达菌株的获得第43-45页
        5.2.2 亚细胞定位第45-46页
        5.2.3 双分子荧光互补(BiFC)第46-47页
        5.2.4 酵母双杂实验第47-49页
    5.3 结果第49-52页
        5.3.1 FgKAR9过表达菌株及Fgkar9敲除突变体的表型第49页
        5.3.2 FgKAR9的亚细胞定位第49-51页
        5.3.3 FgKar9与FgTub2的互作关系第51页
        5.3.4 FgKar9与其他微管相关蛋白的互作第51-52页
    5.4 讨论第52-54页
第六章 全文总结第54-55页
参考文献第55-59页
致谢第59-60页
作者简介第60页

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