摘要 | 第5-6页 |
abstract | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第10-15页 |
1.1 禾谷镰刀菌的生物学特征 | 第10-11页 |
1.2 禾谷镰刀菌危害 | 第11页 |
1.3 禾谷镰刀菌研究进展 | 第11-12页 |
1.4 微管和微管相关蛋白的研究背景 | 第12-14页 |
1.5 本研究的目的和意义 | 第14-15页 |
第二章 Fgtub2突变体角变子的收集和重测序分析 | 第15-20页 |
2.1 材料、试剂、仪器 | 第15页 |
2.1.1 材料 | 第15页 |
2.1.2 试剂 | 第15页 |
2.1.3 仪器 | 第15页 |
2.2 实验方法 | 第15-16页 |
2.3 实验结果 | 第16-19页 |
2.3.1 Fgtub2突变体在V8培养基上发生角变 | 第16页 |
2.3.2 角变子的收集和分类 | 第16页 |
2.3.3 角变子重测序结果分析 | 第16-19页 |
2.4 讨论 | 第19-20页 |
第三章 FgKAR9突变位点的验证和角变子的表型分析 | 第20-31页 |
3.1 材料、试剂、仪器 | 第20页 |
3.1.1 材料 | 第20页 |
3.1.2 试剂 | 第20页 |
3.1.3 仪器 | 第20页 |
3.2 实验方法 | 第20-26页 |
3.2.1 Fgtub2kar9双敲除突变体的获得 | 第20-25页 |
3.2.2 菌落形态观察及生长速度测定 | 第25页 |
3.2.3 产孢率测定 | 第25页 |
3.2.4 有性杂交 | 第25页 |
3.2.5 小麦穗接种实验 | 第25页 |
3.2.6 玉米须接种实验 | 第25-26页 |
3.3 结果 | 第26-30页 |
3.3.1 Fgtub2Fgkar9双敲除突变体的检测 | 第26页 |
3.3.2 角变子和双敲除突变体的表型变化 | 第26-28页 |
3.3.3 角变子和双敲除突变体的致病力测定 | 第28-29页 |
3.3.4 角变子和双敲除突变体的有性生殖正常 | 第29-30页 |
3.4 讨论 | 第30-31页 |
第四章 Fgkar9基因敲除盒的构建和southernblot验证 | 第31-42页 |
4.1 材料、试剂、仪器 | 第31-33页 |
4.1.1 材料 | 第31页 |
4.1.2 试剂 | 第31-33页 |
4.1.3 仪器 | 第33页 |
4.2 实验方法 | 第33-39页 |
4.2.1 FgKAR9基因的敲除引物设计 | 第33-34页 |
4.2.2 SplitPCR方法构建FgKAR9基因敲除体系 | 第34-35页 |
4.2.3 野生型禾谷镰刀菌原生质体转化 | 第35-36页 |
4.2.4 Fgkar9缺失突变体的获得 | 第36-37页 |
4.2.5 用southernblot方法验证Fgkar9突变体 | 第37-39页 |
4.3 结果 | 第39-41页 |
4.3.1 FgKAR9基因的序列分析 | 第39-40页 |
4.3.2 Southernblot检测得到Fgkar9突变体 | 第40-41页 |
4.4 讨论 | 第41-42页 |
第五章 FgKAR9基因的功能分析 | 第42-54页 |
5.1 材料、试剂、仪器 | 第42-43页 |
5.1.1 材料 | 第42页 |
5.1.2 试剂 | 第42-43页 |
5.1.3 仪器 | 第43页 |
5.2 实验方法 | 第43-49页 |
5.2.1 过表达菌株的获得 | 第43-45页 |
5.2.2 亚细胞定位 | 第45-46页 |
5.2.3 双分子荧光互补(BiFC) | 第46-47页 |
5.2.4 酵母双杂实验 | 第47-49页 |
5.3 结果 | 第49-52页 |
5.3.1 FgKAR9过表达菌株及Fgkar9敲除突变体的表型 | 第49页 |
5.3.2 FgKAR9的亚细胞定位 | 第49-51页 |
5.3.3 FgKar9与FgTub2的互作关系 | 第51页 |
5.3.4 FgKar9与其他微管相关蛋白的互作 | 第51-52页 |
5.4 讨论 | 第52-54页 |
第六章 全文总结 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
作者简介 | 第60页 |