| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1 文献综述 | 第12-28页 |
| 1.1 肺炎链球菌及其致病性 | 第12-17页 |
| 1.1.1 肺炎链球菌生物学特征 | 第12-13页 |
| 1.1.2 肺炎链球菌致病概况 | 第13页 |
| 1.1.3 肺炎球菌疾病的防治 | 第13-17页 |
| 1.2 多糖结合疫苗设计策略 | 第17-20页 |
| 1.2.1 多糖抗原的选择及修饰 | 第17-18页 |
| 1.2.2 载体蛋白的选择及修饰 | 第18-19页 |
| 1.2.3 糖蛋白偶联方式及结合策略 | 第19-20页 |
| 1.3 结合疫苗的分离纯化技术 | 第20-22页 |
| 1.3.1 离子交换层析 | 第20-21页 |
| 1.3.2 超滤 | 第21-22页 |
| 1.3.3 尺寸排阻层析 | 第22页 |
| 1.4 结合疫苗的物理化学性质检测方法 | 第22-25页 |
| 1.4.1 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第23页 |
| 1.4.2 尺寸排阻层析 | 第23页 |
| 1.4.3 核磁共振 | 第23-24页 |
| 1.4.4 圆二色光谱 | 第24页 |
| 1.4.5 内源荧光光谱 | 第24页 |
| 1.4.6 多糖蛋白测定方法 | 第24-25页 |
| 1.4.7 动态光散射 | 第25页 |
| 1.5 结合疫苗免疫学性质检测方法 | 第25-26页 |
| 1.6 立题依据及研究思路 | 第26-28页 |
| 1.6.1 立题依据 | 第26页 |
| 1.6.2 研究思路 | 第26-28页 |
| 2 14型肺炎多糖结合疫苗的制备 | 第28-42页 |
| 2.1 材料与方法 | 第29-36页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第29-30页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第30-31页 |
| 2.1.2.1 14型肺炎多糖(PS)的衍化 | 第30-31页 |
| 2.1.2.2 破伤风类毒素(TT)的衍生化 | 第31页 |
| 2.1.2.3 多糖与破伤风类毒素的偶联 | 第31页 |
| 2.1.3 多糖结合疫苗偶联效果鉴定及分离纯化 | 第31-32页 |
| 2.1.3.1 SDS-PAGE电泳法鉴定 | 第31页 |
| 2.1.3.2 尺寸排阻层析法分离纯化 | 第31-32页 |
| 2.1.4 多糖结合疫苗的结构分析 | 第32-36页 |
| 2.1.4.1 总糖量的测定 | 第32-33页 |
| 2.1.4.2 游离多糖的测定 | 第33-34页 |
| 2.1.4.3 蛋白浓度的测定 | 第34页 |
| 2.1.4.4 多糖修饰程度的测定 | 第34-36页 |
| 2.1.4.5 动态光散射 | 第36页 |
| 2.1.4.6 ~1H核磁波谱鉴定 | 第36页 |
| 2.2 结果与讨论 | 第36-41页 |
| 2.2.1 SDS-PAGE电泳 | 第36-37页 |
| 2.2.2 多糖蛋白衍化 | 第37页 |
| 2.2.3 尺寸排阻层析 | 第37-38页 |
| 2.2.4 蛋白浓度测定 | 第38页 |
| 2.2.5 游离多糖比例和多糖蛋白比率的测定 | 第38-39页 |
| 2.2.6 动态光散射测定 | 第39-40页 |
| 2.2.7 核磁共振氢谱鉴定 | 第40-41页 |
| 2.3 本章小结 | 第41-42页 |
| 3 肺炎多糖结合疫苗免疫学评价 | 第42-60页 |
| 3.1 材料与方法 | 第42-51页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第42-43页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第43-51页 |
| 3.1.2.1 动物免疫 | 第43页 |
| 3.1.2.2 包被抗原的制备 | 第43-45页 |
| 3.1.2.3 抗体滴度检测 | 第45-47页 |
| 3.1.2.4 抗14型肺炎荚膜多糖IgG抗体特异性检测 | 第47-48页 |
| 3.1.2.5 抗14型肺炎荚膜多糖IgG抗体亲合性检测 | 第48-49页 |
| 3.1.2.6 抗原的完整性检测 | 第49页 |
| 3.1.2.7 脾细胞细胞因子分泌水平检测 | 第49-51页 |
| 3.2 结果与讨论 | 第51-57页 |
| 3.2.1 抗体水平检测 | 第51-56页 |
| 3.2.1.1 抗肺炎14型荚膜多糖IgM、IgG及其亚型的抗体滴度测定 | 第51-53页 |
| 3.2.1.2 连接分子特异性IgG检测 | 第53页 |
| 3.2.1.3 苯环特异性IgG检测 | 第53页 |
| 3.2.1.4 抗TT的IgG及其亚型的抗体滴度测定 | 第53-54页 |
| 3.2.1.5 抗肺炎14型荚膜多糖抗体特异性检测 | 第54页 |
| 3.2.1.6 抗肺炎14型荚膜多糖抗体亲合力 | 第54-55页 |
| 3.2.1.7 抗原完整性检测 | 第55-56页 |
| 3.2.2 脾细胞培养上清细胞因子水平检测 | 第56-57页 |
| 3.3 本章小结 | 第57-60页 |
| 4 结论 | 第60-62页 |
| 4.1 主要研究成果 | 第60页 |
| 4.2 论文创新点 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 致谢 | 第68-70页 |
| 个人简历及发表文章目录 | 第70页 |
