| 中文摘要 | 第3-4页 |
| Absrtact | 第4-5页 |
| 第一章 绪论 | 第9-17页 |
| 1.1 根瘤菌共生固氮 | 第9-11页 |
| 1.2 细菌中的群体感应效应系统介绍 | 第11页 |
| 1.3 根瘤菌中的群体感应效应的研究 | 第11-12页 |
| 1.4 慢生型根瘤菌中(Bradyrhizobium)群体感应效应系统研究 | 第12-13页 |
| 1.5 在大豆慢生型根瘤菌中参与群体感应效应系统两个基因的介绍 | 第13-14页 |
| 1.6 根瘤菌基因组学的研究 | 第14-15页 |
| 1.6.1 根瘤菌基因组组成 | 第14-15页 |
| 1.7 基因功能的常用研究思路 | 第15-17页 |
| 1.7.1 基因功能的预测 | 第15-16页 |
| 1.7.2 基因功能实验验证 | 第16-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-39页 |
| 2.1 实验器材 | 第17-18页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第17页 |
| 2.1.2 主要药品 | 第17页 |
| 2.1.3 培养基的制备 | 第17-18页 |
| 2.2 实验重叠PCR原理及使用菌株 | 第18-21页 |
| 2.2.1 重叠PCR原理 | 第18-19页 |
| 2.2.2 使用菌株及生长条件 | 第19-21页 |
| 2.3 各种PCR体系反应 | 第21-24页 |
| 2.3.1 目标基因的PCR反应 | 第21-22页 |
| 2.3.2 构建含有目标基因的重组质粒PCR反应 | 第22页 |
| 2.3.3 限制性内切酶消化质粒和DNA目的片段 | 第22-23页 |
| 2.3.4 突变体筛选PCR反应 | 第23页 |
| 2.3.5 pZB32质粒确认PCR反应 | 第23-24页 |
| 2.4 构建突变体 | 第24-33页 |
| 2.4.1 感受态细胞的制备 | 第25-26页 |
| 2.4.2 目的基因的克隆 | 第26-33页 |
| 2.5 分析比较突变体与野生体的表型差异 | 第33-37页 |
| 2.5.1 OD600生长曲线 | 第33页 |
| 2.5.2 菌落形态 | 第33-34页 |
| 2.5.3 生物膜的形成 | 第34-35页 |
| 2.5.4 菌株的运动性 | 第35页 |
| 2.5.5 β-半乳糖苷酶比活性 | 第35-36页 |
| 2.5.6 抑菌片实验 | 第36-37页 |
| 2.6 接种实验 | 第37-39页 |
| 第三章 结果与分析 | 第39-56页 |
| 3.1 突变体的构建 | 第39-44页 |
| 3.1.1 目标基因blr1062,blr1063在染色体上的位置 | 第39页 |
| 3.1.2 包含B.d110目的基因片段的PCR产物 | 第39-40页 |
| 3.1.3 大肠杆菌重组质粒构建图谱 | 第40页 |
| 3.1.4 阳性重组质粒的的验证及转化 | 第40-42页 |
| 3.1.5 阳性大肠杆菌重组质粒的筛选结合验证 | 第42-43页 |
| 3.1.6 小结 | 第43-44页 |
| 3.2 分析比较突变体与野生体菌株的表型差异及表型分析 | 第44-53页 |
| 3.2.1 生长曲线 | 第44页 |
| 3.2.2 菌落形态 | 第44-45页 |
| 3.2.3 生物被膜的形成 | 第45-47页 |
| 3.2.4 细菌的运动性 | 第47-48页 |
| 3.2.5 β-半乳糖苷酶比活性 | 第48-51页 |
| 3.2.6 菌株对抗生素及其他有害物质的耐受性 | 第51-53页 |
| 3.2.7 小结 | 第53页 |
| 3.3 结瘤分析 | 第53-56页 |
| 3.3.1 种植环境 | 第53-54页 |
| 3.3.2 接种实验 | 第54-55页 |
| 3.3.3 小结 | 第55-56页 |
| 第四章 讨论 | 第56-59页 |
| 4.1 目的基因的克隆 | 第56-57页 |
| 4.1.1 基因blr1062,blr1063序列比对和确认 | 第56页 |
| 4.1.2 构建并筛选突变体 | 第56页 |
| 4.1.3 目的基因引物设计 | 第56-57页 |
| 4.2 深入生理生化实验的必要性 | 第57-58页 |
| 4.3 结瘤实验的设计 | 第58-59页 |
| 第五章 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
