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枯草芽孢杆菌WL17抗菌物质的分离制备及抗菌特性研究

摘要第9-10页
Abstract第10-11页
第一章 前言第12-22页
    1 枯草芽孢杆菌代谢活性物质的种类和特点第12-17页
        1.1 非核糖体途径合成的抗菌物质第12-15页
            1.1.1 表面活性素(surfactin)第13页
            1.1.2 伊枯草菌素(Iturin)第13-14页
            1.1.3 芬枯草菌素(Fengycin)第14-15页
            1.1.4 多肽类抗菌物质第15页
        1.2 核糖体途径合成的抗菌物质第15-17页
            1.2.1 细菌素第15-16页
            1.2.2 蛋白类抗菌物质第16页
            1.2.3 活性酶类抗菌物质第16-17页
    2 抗菌肽类物质的分离纯化及其鉴定技术第17-18页
        2.1 抗菌肽的分离纯化技术第17-18页
        2.2 抗菌肽的定性检测方法第18页
            2.2.1 薄层原位酸水解-茚三酮显色法第18页
            2.2.2 水显色法第18页
    3 抗菌肽的生物活性和抗菌机理研究第18-20页
        3.1 抗菌肽的生物活性及测定方法第18-19页
        3.2 抗菌肽的作用机理第19-20页
            3.2.1 膜结合型抗菌机制第19-20页
            3.2.2 非膜结合型抗菌机理第20页
    4 本课题研究的意义、目的和内容第20-22页
        4.1 本课题研究的意义和目的第20-21页
        4.2 本课题的研究内容第21-22页
第二章 枯草芽孢杆菌WL17产抗菌物质的发酵条件优化研究第22-32页
    1 材料与方法第22-26页
        1.1 材料、试剂与仪器第22-24页
            1.1.1 菌株和培养基第22-23页
            1.1.2 主要试剂第23页
            1.1.3 主要仪器设备第23-24页
        1.2 试验方法第24页
            1.2.1 种子液的制备第24页
            1.2.2 抗菌粗提物的制备第24页
            1.2.3 抗菌物质活性的测定第24页
            1.2.4 菌体细胞生长与抗菌物质合成的关系研究第24页
        1.3 试验设计第24-26页
            1.3.1 Plackett-Burman实验筛选影响抗菌物质合成的关键因素第24-25页
            1.3.2 最陡爬坡实验研究关键影响因素的最优水平区域第25页
            1.3.3 Box-Behnken实验设计确定关键因素的最优水平第25-26页
    2 结果与分析第26-31页
        2.1 菌体细胞生长与抗菌物质合成关系第26页
        2.2 抗菌物质合成的关键影响因素的确定第26-27页
        2.3 响应面法优化抗菌物质的发酵条件第27-31页
            2.3.1 响应曲面模型的建立及回归分析检验第27-29页
            2.3.2 发酵条件的响应面分析及条件优化第29-31页
    3 本章小结第31-32页
第三章 枯草芽孢杆菌WL17产抗菌物质稳定性的研究第32-41页
    1 材料与方法第32-35页
        1.1 材料、试剂和仪器第32-33页
            1.1.1 菌株第32-33页
            1.1.2 主要试剂第33页
            1.1.3 主要仪器第33页
        1.2 方法第33-35页
            1.2.1 枯草芽孢杆菌WL17抗菌物质的制备第33-34页
            1.2.2 抗菌物质对食品常见致病菌和腐败真菌抑菌能力的测定第34页
            1.2.3 抗菌物质的稳定性分析第34-35页
        1.3 数据统计分析第35页
    2 结果分析第35-40页
        2.1 抗菌物质对食品致病菌和腐败菌的抑制作用第35-36页
        2.2 抗菌物质的稳定性分析第36-40页
            2.2.1 酸碱性对抗菌物质稳定性影响的结果分析第36-37页
            2.2.2 温度对抗菌物质稳定性影响的结果分析第37页
            2.2.3 温度与pH对抗菌物质稳定性影响结果分析第37-39页
            2.2.4 不同能量脉冲强光处理对抗菌物质稳定性影响的结果分析第39页
            2.2.5 胃蛋白酶和胰蛋白酶对抗菌物质稳定性的影响第39-40页
    3 本章小结第40-41页
第四章 枯草芽孢杆菌WL17产抗菌物质抑菌机理的初步研究第41-50页
    1 材料与方法第41-44页
        1.1 材料、试剂与仪器第41-42页
            1.1.1 实验菌株第41页
            1.1.2 主要试剂第41-42页
            1.1.3 主要仪器第42页
        1.2 实验方法第42-44页
            1.2.1 枯草芽孢杆菌WL17抗菌活性物质的制备第42页
            1.2.2 抗菌物质最小抑菌浓度的测定第42-43页
            1.2.3 抗菌物质对大肠杆菌生长曲线的影晌第43页
            1.2.4 抗菌物质对大肠杆菌细胞通透性的影晌第43页
            1.2.5 抗菌物质对大肠杆菌细胞显微特征的影响第43-44页
    2 结果分析第44-48页
        2.1 抗菌物质最小抑菌浓度的测定结果第44页
        2.2 抗菌物质对大肠杆菌生长曲线的影响第44-45页
        2.3 抗菌物质对大肠杆菌细胞通透性的影晌第45-47页
            2.3.1 二乙酸荧光素法测定大肠杆菌细胞通透性的变化第45-46页
            2.3.2 Fluo 3/AM荧光探针法测定细胞内钙离子浓度的变化第46-47页
        2.4 抗菌物质对大肠杆菌细胞显微特征的影响第47-48页
    3 本章小结第48-50页
第五章 枯草芽孢杆菌WL17抗菌物质的分离纯化及结构初探第50-67页
    1 材料与方法第50-54页
        1.1 材料、试剂与仪器第50-52页
            1.1.1 菌株第50-51页
            1.1.2 主要试剂与材料第51页
            1.1.3 主要仪器第51-52页
        1.2 实验方法第52-54页
            1.2.1 抗菌物质粗提物组成的初步分析第52页
            1.2.2 抗菌物质粗提物的分离纯化第52-53页
            1.2.3 高效液相制备色谱分离组分的活性研究第53页
            1.2.4 高效液相制备色谱分离组分的ESI/MS分析第53-54页
    2 结果分析第54-66页
        2.1 抗菌物质粗提物组成的初步研究第54-56页
            2.1.1 抗菌物质粗提物的波长扫描第54页
            2.1.2 抗菌物质粗提物的薄层色谱(TLC)分析第54-55页
            2.1.3 抗菌物质粗提物的HPLC分析第55-56页
        2.2 抗菌物质粗提物的分离纯化第56-60页
            2.2.1 抗菌物质粗提物的Sephadex G-75分离第56-57页
            2.2.2 抗菌物质粗提物的Sephadex LH-20分离第57-59页
            2.2.3 Sephadex LH-20分离级分的HPLC分析第59-60页
            2.2.4 级分4的HPLC分离纯化第60页
        2.3 高效液相制备色谱分离组分的活性研究第60-62页
            2.3.1 高效液相制备色谱分离组分的抗菌活性分析第60-61页
            2.3.2 高效液相制备色谱分离组分的抗氧化活性分析第61-62页
        2.4 高效液相制备色谱分离组分结构的初步探讨第62-66页
            2.4.1 组分Ⅰ的HPLC和ESI-MS分析第62-64页
            2.4.2 组分Ⅴ的HPLC和ESI-MS分析第64-65页
            2.4.3 组分Ⅵ的HPLC和ESI-MS分析第65-66页
    3 本章小结第66-67页
第六章 枯草芽孢杆菌WL17抗菌物质在鱼丸保鲜中的应用研究第67-82页
    1 材料与方法第67-69页
        1.1 主要材料与仪器第67-68页
            1.1.1 材料第67页
            1.1.2 主要试剂第67-68页
            1.1.3 主要仪器第68页
        1.2 方法第68-69页
            1.2.1 鱼丸的制作工艺第68页
            1.2.2 细菌总数的测定第68页
            1.2.3 TBA(硫代巴比妥酸)值的测定第68页
            1.2.4 TVB-N(挥发性盐基氮)值的测定第68-69页
            1.2.5 质构特性的测定第69页
        1.3 实验设计第69页
        1.4 数据统计分析第69页
    2 结果分析第69-80页
        2.1 不同添加浓度对鱼丸储藏品质的影响第69-74页
            2.1.1 抗菌物质添加浓度对细菌总数的影响第69-70页
            2.1.2 抗菌物质添加浓度对TBA值的影响第70-71页
            2.1.3 抗菌物质添加浓度对TVB-N值的影响第71-72页
            2.1.4 抗菌物质添加浓度对硬度、弹性和咀嚼性的影响第72-73页
            2.1.5 品质变化指标的相关性分析第73-74页
        2.2 抗菌物质与脉冲强光联合运用对鱼丸储藏品质的影响第74-80页
    3 本章小结第80-82页
第七章 结论与展望第82-84页
参考文献第84-93页
致谢第93-94页
硕士在读期间发表的学术论文第94页

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