| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略词表(ABBREVIATIONS) | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-17页 |
| 1.1 课题的提出 | 第11-12页 |
| 1.2 前人研究进展 | 第12-16页 |
| 1.2.1 果树芽变研究 | 第12-13页 |
| 1.2.2 植物NAC转录因子家族概况 | 第13-14页 |
| 1.2.3 NAC转录因子家族基因的结构 | 第14页 |
| 1.2.4 NAC转录因子的分类 | 第14-15页 |
| 1.2.5 NAC转录因子的生物学功能 | 第15-16页 |
| 1.3 本研究目的及内容 | 第16-17页 |
| 1.3.1 主要研究内容 | 第17页 |
| 2 实验材料 | 第17-18页 |
| 2.1 植物材料 | 第17页 |
| 2.2 菌株及载体 | 第17-18页 |
| 2.3 主要试剂 | 第18页 |
| 3 实验方法 | 第18-29页 |
| 3.1 引物序列 | 第18-20页 |
| 3.1.1 扩增基因全长引物 | 第18页 |
| 3.1.2 亚细胞定位引物 | 第18-19页 |
| 3.1.3 构建超量表达载体引物 | 第19页 |
| 3.1.4 构建RNAi抑制载体引物 | 第19页 |
| 3.1.5 转基因番茄检测引物 | 第19-20页 |
| 3.2 扩增citNAC1和citNAC2编码区全长 | 第20-21页 |
| 3.3 载体构建 | 第21-23页 |
| 3.3.1 构建超量表达载体 | 第21-22页 |
| 3.3.2 RNAi抑制载体构建 | 第22-23页 |
| 3.3.3 亚细胞定位载体构建 | 第23页 |
| 3.4 遗传转化 | 第23-27页 |
| 3.4.1 亚细胞定位载体转化洋葱表皮细胞 | 第23-24页 |
| 3.4.2 农杆菌介导超量载体转化番茄 | 第24-25页 |
| 3.4.3 RNAi抑制载体转化山金柑 | 第25-27页 |
| 3.5 转基因番茄和山金柑DNA提取 | 第27-29页 |
| 4 结果与分析 | 第29-39页 |
| 4.1 基因克隆 | 第29-30页 |
| 4.2 超量表达载体构建结果 | 第30-32页 |
| 4.3 RNAi抑制载体构建结果 | 第32-33页 |
| 4.4 亚细胞定位结果分析 | 第33-34页 |
| 4.5 正义(超量)表达载体转化番茄 | 第34-36页 |
| 4.5.1 转基因番茄再生植株的获得 | 第34-35页 |
| 4.5.2 转基因番茄的分子鉴定 | 第35-36页 |
| 4.6 RNAi载体遗传转化山金柑 | 第36-39页 |
| 4.6.1 转基因山金柑再生植株的获得 | 第36-37页 |
| 4.6.2 转基因山金柑分子鉴定 | 第37-39页 |
| 5 讨论 | 第39-42页 |
| 5.1 山金柑在柑橘RNAi载体转基因研究中的应用 | 第39页 |
| 5.2 转基因山金柑生根困难的可能原因 | 第39-40页 |
| 5.3 E8启动子应用于柑橘基因转化番茄 | 第40页 |
| 5.4 基于本课题的后续研究 | 第40-42页 |
| 参考文献 | 第42-48页 |
| 附录Ⅰ citNAC1的ORF加PstI和NcoI酶切位点序列 | 第48-49页 |
| 附录Ⅱ citNAC2的ORF加PstI和NcoI酶切位点序列 | 第49-50页 |
| 附录Ⅲ citNAC1的RNAi干涉片段序列 | 第50-51页 |
| 附录Ⅳ citNAC2的RNAi干涉片段序列 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52页 |
