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农杆菌VirD5在农杆菌介导的植物遗传转化过程中的功能研究

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
缩略词表第10-11页
1 前言第11-20页
    1.1 研究问题的由来第11-12页
    1.2 农杆菌介导的植物遗传转化分子机理研究进展第12-19页
        1.2.1 农杆菌Ti质粒的分区第12-13页
        1.2.2 农杆菌介导的遗传转化过程第13-19页
    1.3 研究的目的和意义第19-20页
2 实验材料与方法第20-35页
    2.1 实验材料第20-21页
        2.1.1 实验植物材料第20页
        2.1.2 实验所用菌株、载体第20页
        2.1.3 实验所用主要试剂及仪器第20-21页
    2.2 实验方法第21-35页
        2.2.1 农杆菌菌株RNA的提取以及RT-PCR第21-23页
        2.2.2 酵母转化载体的构建与转化第23-27页
        2.2.3 亚细胞定位第27-29页
        2.2.4 蛋白相互作用分析第29-35页
3 结果与分析第35-50页
    3.1 农杆菌VirD5位于VirD操纵子上第35-36页
    3.2 农杆菌VirD5受乙酰丁香酮(AS)诱导表达第36-38页
    3.3 农杆菌VirD5在酵母细胞中有转录激活活性和微弱的结合特定DNA的活性第38-40页
    3.4 酵母双杂交确定农杆菌VirD5自激活区域第40-41页
    3.5 农杆菌VirD5可以进入植物细胞核第41-44页
        3.5.1 提取的水稻原生质体第41页
        3.5.2 VirD5定位在植物细胞核第41-44页
    3.6 农杆菌VirD5在植物细胞核中形成二聚体或多聚体第44-47页
        3.6.1 BiFC验证VirD5在植物细胞中形成二聚体或多聚体第44-45页
        3.6.2 GST pull down实验技术验证VirD5自身相互作用第45-47页
    3.7 农杆菌VirD5和AtVIP1的相互作用第47-50页
        3.7.1 BiFC验证农杆菌VirD5和AtVIP1相互作用第47-48页
        3.7.2 GST pull down实验技术验证农杆菌VirD5和AtVIP1的相互作用第48-50页
4 讨论第50-52页
参考文献第52-60页
致谢第60页

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