摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
缩略词表 | 第7-10页 |
引言 | 第10-18页 |
1 无花果研究现状 | 第10-11页 |
1.1 无花果应用研究现状 | 第11页 |
1.2 无花果贮藏保鲜研究现状 | 第11页 |
2 乙烯与果实的成熟衰老 | 第11-13页 |
2.1 乙烯生物合成途径 | 第12页 |
2.2 ACC 合成酶 | 第12-13页 |
2.3 ACC 氧化酶 | 第13页 |
3 调控果实成熟的相关基因工程技术研究 | 第13-16页 |
3.1 反义 RNA 技术 | 第13-14页 |
3.2 RNA 干扰技术 | 第14-16页 |
4 研究的设计思想及内容 | 第16-18页 |
4.1 本研究的目的、意义 | 第16页 |
4.2 研究内容 | 第16-18页 |
第二章 无花果 ACC 合成酶基因片段的克隆 | 第18-26页 |
1 实验材料与试剂 | 第18-19页 |
1.1 植物材料 | 第18页 |
1.2 质粒载体和菌株 | 第18页 |
1.3 试剂及试剂盒 | 第18页 |
1.4 仪器设备 | 第18-19页 |
1.5 主要试剂溶液的配制 | 第19页 |
2 试验内容与方法 | 第19-22页 |
2.1 无花果基因组 DNA 的提取 | 第19-20页 |
2.2 引物设计与合成 | 第20页 |
2.3 PCR 扩增 | 第20页 |
2.4 目的片段的回收 | 第20-21页 |
2.5 目的片段与 T 载体连接 | 第21页 |
2.6 连接产物的转化 | 第21页 |
2.7 阳性克隆的鉴定 | 第21-22页 |
3 结果与分析 | 第22-26页 |
3.1 电泳检测 PCR 产物 | 第22-23页 |
3.2 阳性克隆的菌落 PCR 检测 | 第23页 |
3.3 阳性克隆的酶切鉴定 | 第23-24页 |
3.4 阳性克隆的序列测定及同源性分析 | 第24-26页 |
第三章 无花果 ACS1 基因植物表达载体的构建 | 第26-43页 |
1 实验材料与试剂 | 第26页 |
1.1 质粒和载体 | 第26页 |
1.2 试剂及试剂盒 | 第26页 |
1.3 主要试剂溶液的配制 | 第26页 |
2 试验方法 | 第26-34页 |
2.1 引物设计 | 第26-27页 |
2.2 无花果 ACS1 基因反义植物表达载体的构建 | 第27-30页 |
2.3 无花果 ACS1 基因 RNAi 表达载体的构建 | 第30-34页 |
2.4 无花果 ACS1 基因植物表达载体向农杆菌中转化 | 第34页 |
3 结果与分析 | 第34-43页 |
3.1 电泳检测正、反向片段 PCR 产物 | 第34-35页 |
3.2 反义中间表达载体 pBI221-Anti-ACS1 的构建及检测 | 第35-37页 |
3.3 反义植物表达载体的构建与检测 | 第37-38页 |
3.4 RNAi 中间表达载体 pBI221-Anti-ACS1 的构建检测 | 第38-40页 |
3.5 RNAi 植物表达载体的构建与检测 | 第40-42页 |
3.6 农杆菌中表达载体的菌液 PCR 鉴定 | 第42-43页 |
第四章 讨论 | 第43-45页 |
1 无花果 ACS1 基因的克隆 | 第43页 |
2 无花果 ACS1 基因载体的构建 | 第43-45页 |
2.1 载体的选择 | 第43页 |
2.2 引物设计 | 第43-44页 |
2.3 载体的连接转化 | 第44页 |
2.4 菌液的浓度对质粒提取的影响 | 第44-45页 |
第五章 结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-51页 |
在读期间发表的学术论文 | 第51-52页 |
作者简介 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |