| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 1 前言 | 第16-28页 |
| 1.1 甘蔗联合固氮菌的分离鉴定 | 第16-18页 |
| 1.2 联合固氮菌在甘蔗体内的定殖 | 第18-20页 |
| 1.3 联合固氮菌对甘蔗的促生作用 | 第20页 |
| 1.4 联合固氮菌对甘蔗生长生理的影响 | 第20-21页 |
| 1.5 甘蔗基因型和环境因子对甘蔗联合固氮的影响 | 第21-22页 |
| 1.6 甘蔗联合固氮的分子机理 | 第22-26页 |
| 1.6.1 固氮酶的结构和基因 | 第22-23页 |
| 1.6.2 固氮酶基因的检测 | 第23-24页 |
| 1.6.3 甘蔗与联合固氮菌互作的基因组学和蛋白质组学研究 | 第24-26页 |
| 1.7 研究的目的和意义 | 第26-27页 |
| 1.8 研究的技术路线 | 第27-28页 |
| 2 固氮菌DX120E在甘蔗植株内的定殖 | 第28-39页 |
| 2.1 材料和方法 | 第28-31页 |
| 2.1.1 材料 | 第28-29页 |
| 2.1.2 甘蔗组培苗的培养 | 第29页 |
| 2.1.3 无菌条件下固氮菌DX120E的接种 | 第29-30页 |
| 2.1.4 荧光显微镜检测GFP标记的DX120E在甘蔗植株内的定殖 | 第30页 |
| 2.1.5 内生固氮菌DX120E重分离培养的平板实验 | 第30-31页 |
| 2.2 结果和分析 | 第31-36页 |
| 2.2.1 DX120E在甘蔗组培苗根和叶中的定殖 | 第31-33页 |
| 2.2.2 不同接菌水平下固氮菌DX120E在培养基中群体密度 | 第33-34页 |
| 2.2.3 不同接菌水平下DX120E在甘蔗组培苗植株内的群体数量 | 第34-35页 |
| 2.2.4 同一接菌水平下DX120E在甘蔗组培苗不同器官内的的群体动态 | 第35-36页 |
| 2.3 讨论 | 第36-39页 |
| 3 固氮菌DX120E接种甘蔗后对甘蔗生长生理的影响 | 第39-53页 |
| 3.1 材料和方法 | 第39-42页 |
| 3.1.1 材料 | 第39页 |
| 3.1.2 盆栽试验设计 | 第39-40页 |
| 3.1.3 DX120E在甘蔗体内定殖量的检测 | 第40页 |
| 3.1.4 株高的测定 | 第40-41页 |
| 3.1.5 叶片叶绿素含量、氮代谢相关酶活性和硝态氮含量的测定 | 第41页 |
| 3.1.6 生物量和矿质元素含量的测定 | 第41页 |
| 3.1.7 光合生理参数的测定 | 第41页 |
| 3.1.8 接种处理后的甘蔗组培苗不同部位固氮基因nifH的扩增 | 第41-42页 |
| 3.1.9 数据处理 | 第42页 |
| 3.2 结果和分析 | 第42-51页 |
| 3.2.1 固氮菌DX120E在甘蔗植株体内的定殖数量 | 第42-43页 |
| 3.2.2 接种固氮菌DX120E对甘蔗株高的影响 | 第43-44页 |
| 3.2.3 接种固氮菌DX120E对甘蔗叶片叶绿素、硝态氮含量和氮代谢相关酶活性的影响 | 第44-45页 |
| 3.2.4 接种固氮菌DX120E对甘蔗植株生物量的影响 | 第45-46页 |
| 3.2.5 接种固氮菌DX120E对甘蔗植株矿质元素含量的影响 | 第46-47页 |
| 3.2.6 接种固氮菌DX120E对甘蔗植株矿质元素积累量的影响 | 第47-48页 |
| 3.2.7 接种固氮菌DX120E对甘蔗光合生理的影响 | 第48-49页 |
| 3.2.8 接种后两个甘蔗品种组培苗不同部位nifH基因片段扩增结果 | 第49-51页 |
| 3.3 讨论 | 第51-53页 |
| 4 广西本地分离的内生固氮菌Klebsiella sp.DX120E与巴西分离的内生固氮模式菌株Gluconacetobacter diazotrophicus PAL5的比较研究 | 第53-68页 |
| 4.1 材料与方法 | 第53-55页 |
| 4.1.1 材料 | 第53-54页 |
| 4.1.2 盆栽试验设计 | 第54页 |
| 4.1.3 株高的测定 | 第54页 |
| 4.1.4 生物量的测定 | 第54-55页 |
| 4.1.5 N含量和~(15)N原子百分超的测定 | 第55页 |
| 4.1.6 光合生理参数的测定 | 第55页 |
| 4.1.7 数据处理 | 第55页 |
| 4.2 结果与分析 | 第55-66页 |
| 4.2.1 接种固氮菌DX120E和PAL5对两个甘蔗品种株高的影响 | 第55-56页 |
| 4.2.2 接种固氮菌DX120E和PAL5对两个甘蔗品种苗期生物量的影响 | 第56-58页 |
| 4.2.3 接种固氮菌DX120E和PAL5对两个甘蔗品种苗期氮含量的影响 | 第58页 |
| 4.2.4 接种固氮菌DX120E和PAL5对两个甘蔗品种苗期~(15)N原子百分超、固氮百分率和固氮量的影响 | 第58-60页 |
| 4.2.5 接种固氮菌DX120E和PAL5对两个甘蔗品种伸长期生物量的影响 | 第60-61页 |
| 4.2.6 接种固氮菌DX120E和PAL5对两个甘蔗品种伸长期氮含量的影响 | 第61-62页 |
| 4.2.7 接种固氮菌DX120E和PAL5对两个甘蔗品种伸长期~(15)N原子百分超、固氮百分率和固氮量的影响 | 第62-64页 |
| 4.2.8 接种固氮菌DX120E和PAL5对两个甘蔗品种伸长期光合生理参数的影响 | 第64-66页 |
| 4.3 讨论 | 第66-68页 |
| 5 内生固氮菌DX120E的鉴定和全基因组测序 | 第68-80页 |
| 5.1 材料和方法 | 第68-72页 |
| 5.1.1 试验材料 | 第68-69页 |
| 5.1.2 试剂和仪器 | 第69页 |
| 5.1.3 细菌DNA的提取 | 第69页 |
| 5.1.4 细菌单菌落裂解液的制备 | 第69页 |
| 5.1.5 16S rRNA、rpoB和gyrA基因的克隆和测序 | 第69-70页 |
| 5.1.6 系统进化树的构建 | 第70-71页 |
| 5.1.7 基因组测序 | 第71页 |
| 5.1.8 基因预测及注释 | 第71-72页 |
| 5.2 结果和分析 | 第72-78页 |
| 5.2.1 16S rRNA、rpoB和gyrA基因的PCR扩增结果 | 第72-73页 |
| 5.2.2 16S rRNA、rpoB和gyrA基因的系统进化树分析 | 第73-74页 |
| 5.2.3 DX120E基因组的组装 | 第74页 |
| 5.2.4 DX120E基因组的概况 | 第74-77页 |
| 5.2.5 基因组的COG功能分类 | 第77-78页 |
| 5.3 讨论 | 第78-80页 |
| 6 固氮菌DX120E与甘蔗组培苗互作的蛋白质组学研究 | 第80-104页 |
| 6.1 材料与方法 | 第80-87页 |
| 6.1.1 植物材料和菌种 | 第80页 |
| 6.1.2 材料处理和取样 | 第80-81页 |
| 6.1.3 主要仪器设备和生化试剂 | 第81页 |
| 6.1.4 细菌总蛋白的双向凝胶电泳 | 第81-84页 |
| 6.1.5 甘蔗组培苗接种固氮菌DX120E后的蛋白质组分析 | 第84-87页 |
| 6.2 结果与分析 | 第87-101页 |
| 6.2.1 固氮菌DX120E菌体总蛋白的SDS-PAGE | 第87-88页 |
| 6.2.2 固氮菌DX120E菌体总蛋白的双向电泳条件的筛选 | 第88-89页 |
| 6.2.3 固氮菌DX120E的菌体总蛋白与甘蔗组培苗共培养后的双向电泳分析 | 第89-90页 |
| 6.2.4 固氮菌DX120E与甘蔗组培苗共培养后的差异蛋白点的质谱鉴定 | 第90-93页 |
| 6.2.5 鉴定的固氮菌DX120E的差异表达蛋白质的功能分类 | 第93-94页 |
| 6.2.6 与固氮菌DX120E共培养后的甘蔗组培苗根以上部分的蛋白组鉴定结果 | 第94-100页 |
| 6.2.7 甘蔗组培苗与固氮菌DX120E共培养后根以上部分差异表达蛋白功能分类 | 第100-101页 |
| 6.3 讨论 | 第101-104页 |
| 6.3.1 甘蔗组培苗对固氮菌DX120E蛋白质的影响 | 第101-102页 |
| 6.3.2 固氮菌DX120E对甘蔗组培苗根以上部分蛋白质的影响 | 第102-104页 |
| 7 结论 | 第104-108页 |
| 7.1 全文总结 | 第104-106页 |
| 7.2 本论文的创新点 | 第106页 |
| 7.3 问题与展望 | 第106-108页 |
| 致谢 | 第108-109页 |
| 参考文献 | 第109-124页 |
| 附录 | 第124-125页 |
