| 中文摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 英文缩写词注释 | 第10-11页 |
| 引言 | 第11-12页 |
| 第一篇 文献综述 | 第12-19页 |
| 1 猪流行性腹泻简介 | 第12-17页 |
| 1.1 猪流行性腹泻病毒的生物学研究 | 第12-15页 |
| 1.1.1 PEDV的分子特征 | 第12-15页 |
| 1.2 猪流行性腹泻的诊断 | 第15页 |
| 1.3 猪流行性腹泻病毒的疫苗研究 | 第15-17页 |
| 1.3.1 灭活疫苗 | 第16页 |
| 1.3.2 细胞弱毒苗 | 第16页 |
| 1.3.3 转基因植物疫苗 | 第16-17页 |
| 1.3.4 核酸疫苗 | 第17页 |
| 2 昆虫杆状病毒表达系统 | 第17-19页 |
| 2.1 杆状病毒 | 第17-18页 |
| 2.2 杆状病毒表达系统的优点 | 第18-19页 |
| 2.2.1 基因容量大 | 第18页 |
| 2.2.2 外源蛋白的表达量高且具有生物活性 | 第18页 |
| 2.2.3 生物安全性高 | 第18-19页 |
| 第二篇 研究内容 | 第19-53页 |
| 第1章 猪流行性腹泻病毒E、M基因的原核表达及多克隆抗体的制备 | 第19-38页 |
| 1.1 实验材料与试剂 | 第19-21页 |
| 1.1.1 实验材料 | 第19页 |
| 1.1.2 实验动物 | 第19-20页 |
| 1.1.3 仪器设备 | 第20页 |
| 1.1.4 主要实验试剂 | 第20-21页 |
| 1.2 实验方法 | 第21-28页 |
| 1.2.1 猪腹泻三联疫苗总RNA的提取 | 第21页 |
| 1.2.2 PEDV E、M基因引物的设计和合成 | 第21-22页 |
| 1.2.3 PEDV E、M目的基因的获取 | 第22-23页 |
| 1.2.4 重组表达载体p ET-32a-E、p ET-32a-M的构建与鉴定 | 第23-24页 |
| 1.2.5 PEDV E、M蛋白的表达及鉴定 | 第24-26页 |
| 1.2.6 PEDV E、M蛋白的纯化 | 第26-27页 |
| 1.2.7 小鼠抗E、M蛋白多克隆抗体的制备及特异性鉴定 | 第27-28页 |
| 1.3 结果 | 第28-37页 |
| 1.3.1 猪腹泻三联疫苗总RNA的提取 | 第28页 |
| 1.3.2 PEDV E、M目的基因的获取 | 第28-29页 |
| 1.3.3 重组表达载体p ET32a-E、p ET32a-M的构建与鉴定 | 第29-32页 |
| 1.3.4 PEDV E、M蛋白的鉴定 | 第32-34页 |
| 1.3.5 纯化后重组蛋白的SDS-PAGE分析 | 第34-36页 |
| 1.3.6 多抗的鉴定 | 第36-37页 |
| 1.4 讨论 | 第37页 |
| 1.5 小结 | 第37-38页 |
| 第2章 猪流行性腹泻病毒样E、M蛋白的真核表达及鉴定 | 第38-53页 |
| 2.1 实验材料与试剂 | 第38-39页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第38页 |
| 2.1.2 仪器设备 | 第38-39页 |
| 2.1.4 实验试剂 | 第39页 |
| 2.2 实验方法 | 第39-46页 |
| 2.2.1 PEDV E、M基因引物的设计和合成 | 第39-40页 |
| 2.2.2 PEDV E、M目的基因的获取 | 第40页 |
| 2.2.3 转移载体p Fast Bac Dual-E-M的构建 | 第40-41页 |
| 2.2.4 转移载体p Fast Bac Dual-E-M的初步鉴定及测序 | 第41-42页 |
| 2.2.5 重组Bacmid的构建、提取 | 第42-44页 |
| 2.2.6 重组Bacmid转染Sf9昆虫细胞 | 第44页 |
| 2.2.7 重组杆状病毒的分离与扩增 | 第44-45页 |
| 2.2.8 重组蛋白在昆虫细胞Sf9中的表达及鉴定 | 第45-46页 |
| 2.3 结果 | 第46-51页 |
| 2.3.1 PEDV E、M目的基因的合成 | 第46-47页 |
| 2.3.2 转移载体p Fast Bac Dual-E-M的鉴定 | 第47-48页 |
| 2.3.3 重组Bacmid DNA的鉴定 | 第48-49页 |
| 2.3.4 重组杆状病毒的制备 | 第49-50页 |
| 2.3.5 重组蛋白的检测 | 第50-51页 |
| 2.4 讨论 | 第51-52页 |
| 2.5 小结 | 第52-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 导师及作者简介 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
