摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
本文所用英文缩略词表 | 第11-12页 |
第1章 绪论 | 第12-31页 |
1.1 前列腺癌 | 第12-16页 |
1.1.1 前列腺癌的概述 | 第12-14页 |
1.1.2 前列腺癌的诊断研究进展 | 第14-16页 |
1.2 SELEX技术 | 第16-22页 |
1.2.1 SELEX技术简介 | 第16-18页 |
1.2.2 SELEX技术的发展现状 | 第18-22页 |
1.3 核酸适配体在肿瘤细胞检测及成像中的应用 | 第22-29页 |
1.3.1 核酸适配体性质 | 第22-23页 |
1.3.2 核酸适配体在肿瘤细胞检测中的应用 | 第23-26页 |
1.3.3 核酸适配体在肿瘤细胞成像中的应用 | 第26-29页 |
1.4 本论文拟开展的工作 | 第29-31页 |
第2章 人前列腺癌细胞株核酸适配体的筛选 | 第31-53页 |
2.1 前言 | 第31页 |
2.2 实验部分 | 第31-41页 |
2.2.1 试剂和仪器 | 第31-34页 |
2.2.2 溶液的配制 | 第34页 |
2.2.3 细胞的培养、传代及细胞悬液的配置 | 第34-35页 |
2.2.4 PCR条件的优化 | 第35-36页 |
2.2.5 琼脂糖凝胶电泳及成像 | 第36-37页 |
2.2.6 前列腺癌细胞株核酸适配体的筛选 | 第37-40页 |
2.2.7 筛选进程的监测 | 第40页 |
2.2.8 克隆测序及序列分析 | 第40页 |
2.2.9 序列特异性考察 | 第40-41页 |
2.2.10 序列亲和力考察 | 第41页 |
2.2.11 激光共聚焦验证 | 第41页 |
2.3 结果与讨论 | 第41-52页 |
2.3.1 引物的设计及PCR条件的优化 | 第41-43页 |
2.3.2 筛选条件的选择 | 第43-44页 |
2.3.3 筛选过程的表征 | 第44-45页 |
2.3.4 筛选文库的进化表征及终点判断 | 第45-47页 |
2.3.5 克隆测序结果及序列分析 | 第47-49页 |
2.3.6 核酸适配体的特异性考察 | 第49-50页 |
2.3.7 核酸适配体的亲和力考察 | 第50-52页 |
2.3.8 激光共聚焦验证结果 | 第52页 |
2.4 小结 | 第52-53页 |
第3章 人前列腺癌细胞株核酸适配体的性质考察及初步应用研究 | 第53-60页 |
3.1 前言 | 第53页 |
3.2 实验部分 | 第53-55页 |
3.2.1 试剂和仪器 | 第53-54页 |
3.2.2 优化后序列的性质考察 | 第54页 |
3.2.3 温度对核酸适配体结合能力的影响 | 第54-55页 |
3.2.4 酶对核酸适配体结合情况的影响 | 第55页 |
3.3 结果与讨论 | 第55-59页 |
3.3.1 核酸适配体的序列优化 | 第55-56页 |
3.3.2 优化后序列的性质考察 | 第56-58页 |
3.3.3 温度对核酸适配体结合能力的影响 | 第58页 |
3.3.4 酶对核酸适配体结合情况的影响 | 第58-59页 |
3.4 小结 | 第59-60页 |
结论 | 第60-61页 |
附篇 基于GO-淬灭的荧光aptasensor用于肝癌细胞SMMC-7721的高灵敏检测 | 第61-68页 |
1.1 前言 | 第61页 |
1.2 实验部分 | 第61-63页 |
1.3 结果与讨论 | 第63-67页 |
1.4 小结 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-75页 |
附录A 攻读硕士学位期间所发表的学术论文 | 第75-76页 |
致谢 | 第76-77页 |