| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 前言 | 第11-18页 |
| 1.1 叶绿体结构和功能 | 第11-12页 |
| 1.2 PSII结构和功能 | 第12-13页 |
| 1.3 光抑制和光保护机制 | 第13-15页 |
| 1.4 PSB27的研究进展 | 第15-16页 |
| 1.5 本研究的主要内容和意义 | 第16-18页 |
| 第二章 Psb27抗体制备 | 第18-26页 |
| 2.1 实验背景 | 第18页 |
| 2.2 实验材料 | 第18-19页 |
| 2.2.1 动物材料 | 第18-19页 |
| 2.2.2 实验菌株和载体 | 第19页 |
| 2.2.3 实验试剂 | 第19页 |
| 2.2.4 实验仪器 | 第19页 |
| 2.3 实验方法 | 第19-23页 |
| 2.3.1 构建表达载体psb27-pGEX4T.3 | 第19页 |
| 2.3.2 蛋白表达及提纯 | 第19-22页 |
| 2.3.3 抗体制备和检测 | 第22-23页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第23-26页 |
| 2.4.1 PSB27蛋白的提取与纯化 | 第23-24页 |
| 2.4.2 PSB27蛋白浓度的检测 | 第24-25页 |
| 2.4.3 抗体检测 | 第25-26页 |
| 第三章 psb27突变体鉴定 | 第26-37页 |
| 3.1 实验背景 | 第26页 |
| 3.2 实验材料 | 第26-27页 |
| 3.2.1 植物材料 | 第26页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第26-27页 |
| 3.2.3 实验仪器 | 第27页 |
| 3.3 实验方法 | 第27-33页 |
| 3.3.1 植物环境控制 | 第27页 |
| 3.3.2 DNA水平鉴定突变体 | 第27-28页 |
| 3.3.3 RNA水平鉴定突变 | 第28-30页 |
| 3.3.4 蛋白水平鉴定突变体 | 第30-33页 |
| 3.4 实验结果与讨论 | 第33-37页 |
| 3.4.1 DNA水平上验证突变体的纯合性 | 第33-34页 |
| 3.4.2 RNA水平上鉴定psb27的表达 | 第34页 |
| 3.4.3 蛋白水平上鉴定PSB27的表达 | 第34页 |
| 3.4.4 cp26基因是否正常 | 第34-37页 |
| 第四章 调PSB27互作蛋白 | 第37-52页 |
| 4.1 实验背景 | 第37页 |
| 4.2 实验材料 | 第37-38页 |
| 4.2.1 植物材料 | 第37页 |
| 4.2.2 菌液和质粒 | 第37-38页 |
| 4.2.3 实验试剂 | 第38页 |
| 4.3 实验方法 | 第38-47页 |
| 4.3.1 psb27-PMD18-T载体构建 | 第38-41页 |
| 4.3.2 构建psb27带His和2HA标签至双元载体pB003 | 第41-42页 |
| 4.3.3 侵花法获得转基因植物 | 第42-43页 |
| 4.3.4 筛选转基因植株 | 第43-44页 |
| 4.3.5 对His-2号转基因苗进行定量分析 | 第44页 |
| 4.3.6 PSB27蛋白的定位 | 第44-45页 |
| 4.3.7 提取转基因和野生型植物的叶绿体 | 第45-46页 |
| 4.3.8 目的蛋白纯化 | 第46页 |
| 4.3.9 浓缩目的蛋白 | 第46-47页 |
| 4.4 实验结果与讨论 | 第47-52页 |
| 4.4.1 载体构建 | 第47页 |
| 4.4.2 带His或2HA的psb27转基因植物获得和鉴定 | 第47-49页 |
| 4.4.3 PSB27蛋白的定位 | 第49-50页 |
| 4.4.4 PSB27蛋白的提取 | 第50页 |
| 4.4.5 质谱结果 | 第50-52页 |
| 第五章 PSB27功能互补实验 | 第52-62页 |
| 5.1 实验背景 | 第52-55页 |
| 5.2 实验材料 | 第55-56页 |
| 5.2.1 植物材料 | 第55-56页 |
| 5.2.2 菌液和质粒 | 第56页 |
| 5.2.3 实验试剂 | 第56页 |
| 5.2.4 实验仪器 | 第56页 |
| 5.3 实验方法 | 第56-59页 |
| 5.3.1 构建含有20种不同点突变的双元载体 | 第56-57页 |
| 5.3.2 获得20种不同点突变的转基因苗 | 第57页 |
| 5.3.3 鉴定所获得的转基因植物 | 第57页 |
| 5.3.4 构建蓝藻和莱茵衣藻psb27基因的双元载体 | 第57-59页 |
| 5.3.5 获得蓝藻和衣藻Psb27的转基因植物 | 第59页 |
| 5.4 实验结果与讨论 | 第59-62页 |
| 5.4.1 载体构建 | 第59页 |
| 5.4.2 蛋白鉴定转基因植物 | 第59-61页 |
| 5.4.3 含有蓝藻衣藻psb27基因的双元载体构建 | 第61-62页 |
| 结论 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-69页 |
| 附录一: 英文缩写 | 第69-71页 |
| 附录二: 引物 | 第71-74页 |
| 附录三: 仪器药品 | 第74-76页 |
| 附录四: 溶液配置 | 第76-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
