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益生菌分离株L5和B3抗小肠结肠炎耶尔森氏菌感染的作用与机制研究

摘要第10-12页
英文摘要第12-14页
1 前言第15-20页
    1.1 小肠结肠炎耶尔森氏菌的研究进展第15-16页
        1.1.1 小肠结肠炎耶尔森氏菌的危害第15页
        1.1.2 Y.enterocolitica感染机制的研究进展第15-16页
    1.2 益生菌的抗感染机制第16-19页
        1.2.1 益生菌保护微生物屏障的作用第17页
        1.2.2 益生菌促进黏液分泌第17页
        1.2.3 益生菌促进肠道蛋白分泌第17-18页
        1.2.4 益生菌激发肠黏膜免疫应答第18页
        1.2.5 益生菌抑制肠上皮细胞凋亡的作用机制第18-19页
    1.3 研究目的和意义第19-20页
2 材料与方法第20-33页
    2.1 材料第20-22页
        2.1.1 样品采集第20页
        2.1.2 主要试剂第20页
        2.1.3 实验动物第20-21页
        2.1.4 菌株第21页
        2.1.5 引物第21-22页
    2.2 Y. enterocolitica的分离及致病性的研究第22-24页
        2.2.1 Y.enterocolitica的分离第22-23页
        2.2.2 Y.enterocolitica的形态学观察及生化鉴定第23页
        2.2.3 Y.enterocolitica的分子鉴定第23页
        2.2.4 毒力基因的检测第23页
        2.2.5 小鼠致病性试验第23-24页
        2.2.6 断奶仔猪致病性试验第24页
    2.3 益生菌的筛选第24-25页
        2.3.1 乳酸菌的分离鉴定第24-25页
        2.3.2 双歧杆菌的分离鉴定第25页
    2.4 益生菌体外益生活性的测定第25-26页
        2.4.1 抑菌试验第25页
        2.4.2 强酸耐受试验第25-26页
        2.4.3 耐胆盐试验第26页
        2.4.4 耐胰蛋白酶试验第26页
        2.4.5 体外抗氧化试验第26页
    2.5 药敏实验第26-27页
    2.6 益生菌拮抗Y.enterocolitica感染体内保护性实验第27-32页
        2.6.1 建立动物模型前预实验第27页
        2.6.2 动物模型的分组及各组的处理第27-28页
        2.6.3 各组小鼠体重变化的检测第28页
        2.6.4 样品的采集第28-29页
        2.6.5 盲肠内容物和粪便细菌计数第29页
        2.6.6 抗体水平检测第29页
        2.6.7 病理切片的制作和观察第29页
        2.6.8 氧化应激相关物质和酶水平的检测第29-30页
        2.6.9 肠道粘膜屏障相关功能基因mRNA水平检测第30-31页
        2.6.10 炎症相关的信号通路蛋白的表达水平的检测第31-32页
    2.7 统计学分析第32-33页
3 结果第33-58页
    3.1 Y. enterocolitica的分离及致病性研究第33-36页
        3.1.1 细菌分离及生化鉴定结果第33页
        3.1.2 分子鉴定结果第33-34页
        3.1.3 毒力基因的检测结果第34页
        3.1.4 小鼠致病性试验结果第34-36页
        3.1.5 断奶仔猪致病性试验结果第36页
    3.2 益生菌的筛选结果第36-43页
        3.2.1 乳酸菌的分离鉴定结果第36-38页
        3.2.2 双歧杆菌的分离鉴定结果第38-39页
        3.2.3 抑菌试验第39页
        3.2.4 益生菌对酸、胆盐和胰酶耐受性试验结果第39-40页
        3.2.5 益生菌的体外抗氧化试验结果第40-42页
        3.2.6 药敏实验结果第42-43页
    3.3 益生菌拮抗Y.enterocolitica感染体内保护性实验结果第43-58页
        3.3.1 建立动物模型的菌液灌喂量第43页
        3.3.2 各组小鼠体重变化的检测结果第43-44页
        3.3.3 盲肠内容物和粪便细菌计数结果第44-45页
        3.3.4 抗体水平检测结果第45页
        3.3.5 病理切片结果第45-48页
        3.3.6 氧化应激相关物质和酶水平的检测结果第48-50页
        3.3.7 肠道粘膜屏障相关功能基因mRNA水平检测结果第50-55页
        3.3.8 炎症相关信号通路蛋白表达的检测结果第55-58页
4 讨论第58-65页
    4.1 Y. enterocolitica断奶仔猪源分离株的致病性第58-59页
    4.2 益生菌分离株生物学特性第59-60页
    4.3 短乳杆菌L5和短双歧杆菌B3对感染模型小鼠体重的影响第60页
    4.4 短乳杆菌L5和短双歧杆菌B3对Y.enterocolitica定植的影响第60页
    4.5 短乳杆菌L5和短双歧杆菌B3对抗体水平的影响第60-61页
    4.6 短乳杆菌L5和短双歧杆菌B3对组织病理变化的影响第61页
    4.7 短乳杆菌L5和短双歧杆菌B3对氧化应激反应的影响第61-62页
    4.8 短乳杆菌L5和短双歧杆菌B3对肠粘膜屏障相关功能基因转录水平的影响第62-63页
    4.9 短乳杆菌L5和短双歧杆菌B3对炎症相关信号通路蛋白表达的影响第63-65页
5 结论第65-66页
致谢第66-67页
参考文献第67-73页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第73页

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