| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 缩略语表 | 第13-14页 |
| 第一部分 文献综述 | 第14-30页 |
| 1 前言 | 第14-15页 |
| 2 肝脏分区与氨的代谢 | 第15-20页 |
| 2.1 肝脏的分区与功能 | 第15-17页 |
| 2.1.1 肝脏的结构分区 | 第15-16页 |
| 2.1.2 肝脏功能分区 | 第16-17页 |
| 2.2 肝脏氨来源及分区代谢 | 第17-20页 |
| 2.2.1 肝脏氨的来源 | 第18-19页 |
| 2.2.2 肝脏氨的分区代谢 | 第19-20页 |
| 3 肝脏氨代谢调控研究进展 | 第20-25页 |
| 3.1 尿素循环的调控 | 第21-24页 |
| 3.1.1 pH对尿素循环的调控 | 第21页 |
| 3.1.2 去乙酰化酶对尿素循环的调控 | 第21-23页 |
| 3.1.3 内分泌激素对尿素循环的调控 | 第23页 |
| 3.1.4 营养素对尿素循环的调控 | 第23-24页 |
| 3.1.5 转录因子在尿素循环调控中的作用 | 第24页 |
| 3.2 谷氨酰胺循环的调控 | 第24-25页 |
| 3.2.1 谷氨酰胺酶的调控作用 | 第24-25页 |
| 3.2.2 谷氨酸脱氢酶的调控作用 | 第25页 |
| 4 猪肝脏氨基酸代谢及对氨的作用 | 第25-28页 |
| 4.1 肝脏氨基酸的代谢特点 | 第26-27页 |
| 4.1.1 必需氨基酸在肝脏的代谢 | 第26-27页 |
| 4.1.2 非必需氨基酸在肝脏的代谢 | 第27页 |
| 4.2 肝脏氨基酸对氨代谢的影响 | 第27-28页 |
| 4.2.1 氨基酸对氨代谢的底物驱动 | 第27-28页 |
| 4.2.2 氨基酸对氨代谢的营养调控 | 第28页 |
| 5 猪门静脉灌注技术及应用 | 第28-29页 |
| 6 研究的目的意义 | 第29-30页 |
| 第二部分 试验材料与方法 | 第30-45页 |
| 1 材料及仪器 | 第30-32页 |
| 1.1 试验动物 | 第30页 |
| 1.2 试验材料 | 第30-31页 |
| 1.2.1 试验试剂 | 第30-31页 |
| 1.2.2 试验耗材 | 第31页 |
| 1.2.3 手术器械包 | 第31页 |
| 1.3 试验仪器 | 第31-32页 |
| 2 试验方法 | 第32-45页 |
| 2.1 门静脉-肝静脉血管插管的安装 | 第32-34页 |
| 2.1.1 动物术前的处理 | 第32页 |
| 2.1.2 动物诱导麻醉 | 第32页 |
| 2.1.3 保定动物 | 第32页 |
| 2.1.4 动物呼吸麻醉 | 第32页 |
| 2.1.5 备皮 | 第32-33页 |
| 2.1.6 开创 | 第33页 |
| 2.1.7 门静脉-肝静脉插管的安装 | 第33-34页 |
| 2.1.8 插管固定 | 第34页 |
| 2.1.9 术后护理 | 第34页 |
| 2.2 仔猪门静脉灌注与样品采集 | 第34-37页 |
| 2.2.1 门静脉氨基酸与NH4Cl灌注量的确定 | 第34-36页 |
| 2.2.2 氨基酸和NH4Cl溶液的配制 | 第36页 |
| 2.2.3 仔猪门静脉灌注 | 第36页 |
| 2.2.4 样品采样 | 第36-37页 |
| 2.3 基于LC-MS∕MS的氨基酸定量检测 | 第37-39页 |
| 2.3.1 样本前处理 | 第37页 |
| 2.3.2 试验参数 | 第37-38页 |
| 2.3.3 上机检测 | 第38-39页 |
| 2.4 实时荧光定量PCR检测 | 第39-41页 |
| 2.4.1 肝组织总RNA的提取和检测 | 第39页 |
| 2.4.2 cDNA的制备 | 第39-40页 |
| 2.4.3 实时荧光定量PCR | 第40-41页 |
| 2.5 SIRT4蛋白表达量的检测 | 第41-43页 |
| 2.5.1 猪肝组织蛋白样品制备 | 第41-42页 |
| 2.5.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第42-43页 |
| 2.6 猪肝脏代谢酶活性的测定 | 第43页 |
| 2.7 肝静脉尿素氮及葡萄糖的测定 | 第43-44页 |
| 2.8 数据分析 | 第44-45页 |
| 第三部分 结果与讨论 | 第45-66页 |
| 第一章 亮氨酸对门静脉血氨代谢的调控作用 | 第45-53页 |
| 1 前言 | 第45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-50页 |
| 2.1 亮氨酸对肝脏尿素生成的影响 | 第45-46页 |
| 2.2 亮氨酸对肝脏氨基酸生成的影响 | 第46-49页 |
| 2.2.1 亮氨酸对肝脏谷氨酸和谷氨酰胺生成的影响 | 第46-48页 |
| 2.2.2 亮氨酸对其它非必需氨基酸生成的影响 | 第48-49页 |
| 2.3 亮氨酸对肝脏氨代谢酶活及基因表达的影响 | 第49-50页 |
| 2.4 亮氨酸对肝脏线粒体SIRT4基因表达的影响 | 第50页 |
| 3 讨论 | 第50-52页 |
| 4 小结 | 第52-53页 |
| 第二章 亮氨酸对丙氨酸来源氨代谢的调控作用 | 第53-60页 |
| 1 前言 | 第53页 |
| 2 结果与分析 | 第53-58页 |
| 2.1 亮氨酸对肝脏尿素和葡萄糖生成的影响 | 第53-54页 |
| 2.2 亮氨酸对肝脏氨基酸生成的影响 | 第54-57页 |
| 2.2.1 亮氨酸对肝脏谷氨酸和谷氨酰胺生成的影响 | 第54-56页 |
| 2.2.2 亮氨酸对其它非必需氨基酸生成的影响 | 第56-57页 |
| 2.3 亮氨酸对肝脏氨代谢酶活及基因表达的影响 | 第57-58页 |
| 2.4 亮氨酸对肝脏线粒体SIRT4基因表达的影响 | 第58页 |
| 3 讨论 | 第58-59页 |
| 4 小结 | 第59-60页 |
| 第三章 亮氨酸对混合氨基酸来源氨代谢的调控作用 | 第60-66页 |
| 1 前言 | 第60页 |
| 2 结果与分析 | 第60-64页 |
| 2.1 亮氨酸对肝脏尿素生成的影响 | 第60-61页 |
| 2.2 亮氨酸对肝脏氨基酸生成的影响 | 第61-63页 |
| 2.2.1 亮氨酸对肝脏谷氨酸和谷氨酰胺生成的影响 | 第61-62页 |
| 2.2.2 亮氨酸对其它非必需氨基酸生成的影响 | 第62-63页 |
| 2.3 亮氨酸对肝脏氨代谢酶活及基因表达的影响 | 第63-64页 |
| 2.4 亮氨酸对肝脏线粒体SIRT4基因表达的影响 | 第64页 |
| 3 讨论 | 第64-65页 |
| 4 小结 | 第65-66页 |
| 第四部分 结语 | 第66-67页 |
| 1 成果与结论 | 第66页 |
| 2 创新点 | 第66页 |
| 3 不足与展望 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-76页 |
| 附录 研究生在读期间发表学术论文 | 第76-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
