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稻瘟菌激酶Mst11激活机制与Mobud7分子功能初析

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
缩略语表第10-12页
第一章 绪论第12-27页
    1.1 引言第12-14页
    1.2 稻瘟菌的生物学特征第14-15页
        1.2.1 稻瘟菌分类地位及主要寄主第14页
        1.2.2 稻瘟菌的生活史第14-15页
    1.3 稻瘟菌致病性的分子机制研究第15-24页
        1.3.1 分生孢子形成的分子机制研究第15-16页
        1.3.2 附着胞形成的分子机制研究第16-21页
        1.3.3 稻瘟菌侵染寄主植物的分子机制研究第21-24页
    1.4 Pmk1-MAPK信号通路中MEK激酶的研究进展第24-25页
    1.5 本研究的目的和意义第25-27页
第二章 实验材料与方法第27-45页
    2.1 实验材料第27-28页
        2.1.1 稻瘟菌菌株第27页
        2.1.2 细菌菌株第27页
        2.1.3 酵母菌株第27页
        2.1.4 供试植物材料第27页
        2.1.5 常用载体第27-28页
    2.2 各类工具酶,常用试剂盒和化学试剂第28-29页
        2.2.1 DNA操作相关第28页
        2.2.2 RNA操作相关第28页
        2.2.3 蛋白质操作相关第28-29页
        2.2.4 酵母转化和酵母双杂交相关第29页
        2.2.5 常用筛选抗生素第29页
    2.3 常用培养基和试剂的配方第29-33页
        2.3.1 常用培养基的配方第29-30页
        2.3.2 常用试剂的配方第30-33页
    2.4 实验仪器和耗材第33页
    2.5 实验方法第33-45页
        2.5.1 聚类分析第33-34页
        2.5.2 常规分析生物学操作第34-41页
        2.5.3 稻瘟菌研究相关实验技术第41-45页
第三章 稻瘟菌激酶Mst11激活机制的研究第45-67页
    3.1 稻瘟菌激酶Mst11蛋白结构分析第45页
    3.2 Mst11中RA domain缺失突变体的生物学表型分析第45-53页
        3.2.1 RA domain抑制稻瘟菌芽管的分支第45-46页
        3.2.2 RA domain影响稻瘟菌附着胞侵入寄主体内第46-47页
        3.2.3 RA domain缺失突变体附着胞内膨压降低第47-48页
        3.2.4 MRD-2突变体致病力减弱第48-50页
        3.2.5 外源cAMP处理有效降低MRD-2突变体的芽管分支现象第50页
        3.2.6 激活状态下的Ras2增强其与Mst11的互作第50-52页
        3.2.7 RA domain缺失不影响Pmk1,Mps1和Osm1的激活第52-53页
    3.3 Mst11中段结构域的功能研究第53-58页
        3.3.1 Mst11的中段结构(aa263-565)是其发挥功能所必需的第53-55页
        3.3.2 Mst11中段结构中两个保守的磷酸化位点对于其激活具有重要的作用第55-56页
        3.3.3 Mst11中S453和S458位点的突变影响其附着胞形态第56-58页
    3.4 Mst11存在具有自我抑制功能的互作第58-63页
        3.4.1 Mst11的N端结合到其自身的kinase domain第58-59页
        3.4.2 Mst11第789位丝氨酸对于其自我抑制的互作至关重要第59-60页
        3.4.3 S789G的点突变过量激活Mst11的表达第60-62页
        3.4.4 表达MST11S789G载体无法互补mst50敲除体的表型第62-63页
    3.5 本章讨论第63-67页
第四章 一个影响稻瘟菌附着胞和侵染钉形成基因MoBud7的功能初析第67-83页
    4.1 稻瘟菌Bud基因的鉴定和敲除第67-68页
        4.1.1 稻瘟菌Bud基因的鉴定第67-68页
        4.1.2 Bud基因的敲除第68页
    4.2 Mobud7敲除体的基本生物学表型测定和分子功能解析第68-78页
        4.2.1 MoBud7基因的表达谱分析第69页
        4.2.2 Mobud7敲除体营养菌丝生长减慢第69-70页
        4.2.3 Mobud7敲除体的致病力下降第70-71页
        4.2.4 Mobud7敲除体附着胞形成和侵染植物细胞的能力显著下降第71-72页
        4.2.5 MoBud7敲除体附着胞内甘油代谢过程异常第72-75页
        4.2.6 Mobud7影响稻瘟菌表面识别信号通路第75-76页
        4.2.7 Mobud7的亚细胞定位第76-77页
        4.2.8 稻瘟菌Mobud7互作蛋白的筛选和鉴定第77-78页
    4.3 其他Bud基因敲除体的生物学表型分析第78-80页
        4.3.1 Mobud16敲除体的表型分析第78-79页
        4.3.2 Mobud20敲除体的表型分析第79-80页
    4.4 本章讨论第80-83页
第五章 结论第83-85页
参考文献第85-93页
致谢第93-95页
附录第95-115页
作者简介第115页

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