摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第一部分 文献综述 | 第10-24页 |
一、高等植物启动子的结构特征 | 第10-11页 |
1. 转录起始位点 | 第10页 |
2. ATA框 | 第10页 |
3. 一般上游启动子元件 | 第10-11页 |
二、植物启动子的分类 | 第11-14页 |
1. 组成型启动子 | 第11-12页 |
2. 组织或器官特异性启动子 | 第12页 |
3. 诱导型启动子 | 第12-14页 |
三、启动子的克隆方法 | 第14-19页 |
1. 利用基因组文库筛选启动子 | 第14页 |
2. 利用启动子探针质粒载体筛选启动子 | 第14-15页 |
3. 利用启动子捕获方法分离和鉴别启动子 | 第15页 |
4. 利用PCR技术克隆启动子 | 第15-19页 |
四、启动子的功能研究方法 | 第19-21页 |
1. 生物信息学法 | 第19-20页 |
2. 实验分析法 | 第20-21页 |
五、启动子克隆的意义 | 第21-23页 |
六、本研究的目的 | 第23-24页 |
第二部分 研究报告 | 第24-72页 |
第一章 Stpk-V启动子及其直系同源基因启动子的克隆及特征分析 | 第24-62页 |
一 材料与方法 | 第24-36页 |
1. 植物材料 | 第24页 |
2. 引物设计 | 第24-25页 |
3. 叶片基因组DNA提取 | 第25-26页 |
4. Stpk-V及其同源基因启动子基因组DNA序列的克隆 | 第26-29页 |
5. 构建启动子瞬间表达载体 | 第29-32页 |
6. 基因枪介导外源基因的瞬间表达 | 第32-34页 |
7. 对含有报告基因表达的细胞进行统计 | 第34-36页 |
二、结果与分析 | 第36-60页 |
1. Stpk-V及其同源基因启动子克隆的引物设计 | 第36-37页 |
2. Stpk-V及其同源基因启动子基因组DNA序列的克隆 | 第37-43页 |
3. 启动子序列特征分析 | 第43-51页 |
4 Stpk-V及其同源基因启动子序列的顺式作用元件的差异比较 | 第51-53页 |
5. 簇毛麦Stpk-V基因的启动子的分段克隆 | 第53页 |
6. 启动子组成性启动活性分析 | 第53-56页 |
7. 启动子诱导启动活性分析 | 第56-60页 |
三 讨论 | 第60-62页 |
第二章 Ta-D-Stpk的白粉病抗性功能分析 | 第62-72页 |
一 材料和方法 | 第62-66页 |
1. 植物材料 | 第62页 |
2. 生化试剂 | 第62页 |
3. 基因枪转化载体 | 第62页 |
4. 基因枪转化实验 | 第62-66页 |
5 转基因植株的白粉病抗性鉴定 | 第66页 |
二、结果与分析 | 第66-70页 |
1. 基因枪转化及具有除草剂抗性植株的筛选和再生 | 第67-68页 |
2. 转基因T_0植株的分子鉴定 | 第68页 |
3. T_1代转基因植株的抗病性分析 | 第68-70页 |
三 讨论 | 第70-72页 |
全文结论 | 第72-74页 |
参考文献 | 第74-80页 |
致谢 | 第80页 |