摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 文献综述 | 第10-32页 |
1.1 传统的RNA检测方法 | 第10-25页 |
1.1.1 反转录聚合酶链式扩增反应 | 第11-14页 |
1.1.2 基于恒温扩增的RNA检测方法 | 第14-25页 |
1.1.2.1 依赖核酸序列的扩增 | 第15-18页 |
1.1.2.2 转录介导的扩增 | 第18页 |
1.1.2.3 同步扩增检测 | 第18-19页 |
1.1.2.4 反转录环介导等温扩增反应 | 第19-20页 |
1.1.2.5 基于滚环扩增检测RNA | 第20-24页 |
1.1.2.6 基于脱氧核酶的RNA信号扩增方法 | 第24-25页 |
1.2 DNA变性泡简介 | 第25-27页 |
1.2.1 DNA变性泡在生物体的作用 | 第25-26页 |
1.2.2 DNA变性泡在核酸检测中的应用 | 第26-27页 |
1.3 RNA快速检测方法的发展与市场需求 | 第27-29页 |
1.4 本论文的研究意义与主要内容 | 第29-32页 |
2 DNA变性泡介导的链交换引发的恒温核酸检测方法的建立 | 第32-54页 |
2.1 引言 | 第32-33页 |
2.2 实验部分 | 第33-37页 |
2.2.1 仪器与试剂 | 第33页 |
2.2.2 RNA的提取与浓度估计 | 第33-34页 |
2.2.3 实时荧光检测 | 第34-35页 |
2.2.4 电泳检测产物 | 第35-36页 |
2.2.5 产物测序 | 第36-37页 |
2.3 实验方案设计 | 第37-41页 |
2.4 结果与讨论 | 第41-52页 |
2.4.1 实验机理验证 | 第41-42页 |
2.4.2 实验条件的优化 | 第42-50页 |
2.4.2.1 不同长度的检测 | 第43-45页 |
2.4.2.2 引物浓度的优化 | 第45-46页 |
2.4.2.3 不同温度的优化 | 第46-47页 |
2.4.2.4 不同酶量的优化 | 第47-48页 |
2.4.2.5 不同Mg~(2+)的优化 | 第48-49页 |
2.4.2.6 不同PEG浓度的优化 | 第49-50页 |
2.4.3 灵敏性的检测 | 第50页 |
2.4.4 特异性检测 | 第50-51页 |
2.4.5 实际样品的检测 | 第51-52页 |
2.5 本章小结 | 第52-54页 |
3 基于DNA变性泡与内切酶的恒温核酸检测方法的建立 | 第54-70页 |
3.1 引言 | 第54页 |
3.2 实验部分 | 第54-56页 |
3.2.1 仪器与试剂 | 第54-56页 |
3.2.1.1 基因组DNA的获取 | 第55页 |
3.2.1.2 检测体系 | 第55-56页 |
3.3 结果与讨论 | 第56-65页 |
3.3.1 实验设计方案一 | 第56-59页 |
3.3.1.1 核酸链的设计 | 第57页 |
3.3.1.2 实验可行性验证 | 第57-58页 |
3.3.1.3 原因分析 | 第58-59页 |
3.3.2 指数等温扩增反应 | 第59-60页 |
3.3.3 实验设计方案二 | 第60-62页 |
3.3.3.1 核酸链的设计 | 第61-62页 |
3.3.3.2 方案二可行性的验证 | 第62页 |
3.3.3.3 原因分析 | 第62页 |
3.3.4 实验设计方案三 | 第62-65页 |
3.3.4.1 方案三可行性的验证 | 第63-64页 |
3.3.4.2 原因分析 | 第64-65页 |
3.4 关于非特异性的探讨研究 | 第65-67页 |
3.5 本章小结 | 第67-70页 |
结论 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-82页 |
附录:论文中使用的缩略词 | 第82-84页 |
致谢 | 第84-86页 |
读硕士学位期间发表的论文目录 | 第86-88页 |