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基于PCR-DGGE技术的不同饲喂模式下草鱼肠道菌群多样性分析

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
第一章 文献综述第10-21页
    1.1 鱼类肠道菌群的研究现状与进展第10-14页
        1.1.1 鱼类肠道菌群的数量及其组成第10-11页
        1.1.2 肠道菌群的作用第11-13页
        1.1.3 影响鱼类肠道菌群的因素第13-14页
    1.2 肠道微生物多样性的研究方法第14-15页
        1.2.1 传统方法在肠道微生物多样性研究中的应用第14-15页
        1.2.2 分子生物学方法在肠道微生物多样性研究中的应用第15页
    1.3 PCR-DGGE(变性梯度凝胶电泳)第15-19页
        1.3.1 变性梯度凝胶电泳技术简介第15-16页
        1.3.2 变性梯度凝胶电泳技术基本原理第16-17页
        1.3.3 PCR-DGGE在菌群多样性研究中的应用第17-18页
        1.3.4 PCR-DGGE技术的优缺点与对策第18-19页
    1.4 本研究的立题背景及研究意义第19-21页
第二章 不同饲喂模式下草鱼肠道菌群的PCR-DGGE分析第21-48页
    2.1 材料第21-22页
        2.1.1 饲喂模式与实验动物第21-22页
        2.1.2 主要仪器设备第22页
    2.2 方法第22-33页
        2.2.1 肠道样品的制备第22-23页
            2.2.1.1 肠道内容物的采集第23页
            2.2.1.2 肠道壁的采集第23页
            2.2.1.3 水样与底泥的采集第23页
        2.2.2 样品总DNA的提取第23-27页
            2.2.2.1 肠道细菌总DNA的提取第23-24页
            2.2.2.2 水样细菌总DNA的提取第24-25页
            2.2.2.3 底泥细菌总DNA的提取第25-27页
        2.2.3 细菌16S rDNA-V3片段的PCR扩增第27-28页
        2.2.4 DNA片段的纯化第28-29页
        2.2.5 变性梯度凝胶电泳(DGGE)第29-31页
            2.2.5.1 DGGE分析中所用到的试剂配方第29-30页
            2.2.5.2 DGGE分析的实验步骤第30-31页
        2.2.6 优势条带的回收第31页
        2.2.7 优势条带的克隆与测序第31-32页
            2.2.7.1 优势条带DNA的PCR扩增第31-32页
            2.2.7.2 优势条带的克隆与测序第32页
        2.2.8 数据分析第32-33页
        2.2.9 构建系统发育树第33页
    2.3 结果与分析第33-44页
        2.3.1 微生物总DNA的提取第33-34页
            2.3.1.1 肠道细菌总DNA的提取第33页
            2.3.1.2 水样及底泥细菌总DNA的提取第33-34页
        2.3.2 细菌16S rDNA-V3片段的PCR扩增第34-35页
            2.3.2.1 肠道细菌16S rDNA-V3片段的PCR扩增第34页
            2.3.2.2 水样及底泥细菌16S rDNA-V3片段的PCR扩增第34-35页
        2.3.3 DGGE指纹图谱及肠道菌群群落差异第35-40页
        2.3.4 优势条带的克隆、测序及系统发育分析第40-44页
    2.4 讨论第44-48页
        2.4.1 PCR-DGGE技术可有效的研究肠道微生物区系第44-45页
        2.4.2 不同饲喂模式下草鱼肠道菌群结构的PCR-DGGE分析第45-46页
        2.4.3 水样和底泥微生物与草鱼肠道菌群的关系第46页
        2.4.4 投喂牧草可提高草鱼肠道菌的多样性第46-47页
        2.4.5 饲喂牧草的草鱼体内含分解消化纤维素的细菌第47-48页
结论第48-49页
参考文献第49-57页
致谢第57-58页
作者简介第58页

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