| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1 前言 | 第11-30页 |
| 1.1 嗜水气单胞菌概述 | 第11-15页 |
| 1.1.1 嗜水气单胞菌生物学研究 | 第11-12页 |
| 1.1.2 嗜水气单胞菌的致病性 | 第12-13页 |
| 1.1.3 嗜水气单胞菌的防治 | 第13-15页 |
| 1.2 铁氧还蛋白还原酶(FNR)介绍 | 第15-22页 |
| 1.2.1 FNR的结构和系统分类 | 第16-20页 |
| 1.2.2 FNR的催化机制 | 第20-22页 |
| 1.3 异分支酸合酶概述 | 第22-27页 |
| 1.3.1 异分支酸合酶的调控机制 | 第23-24页 |
| 1.3.2 异分支酸合酶的结构和序列特性 | 第24-26页 |
| 1.3.3 异分支酸合酶的活性位点和突变体研究 | 第26-27页 |
| 1.4 药物靶标酶的研究概况 | 第27-28页 |
| 1.5 本文的研究目的、意义及主要内容 | 第28-30页 |
| 1.5.1 研究目的和意义 | 第28-29页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第29-30页 |
| 2 材料与方法 | 第30-39页 |
| 2.1 材料 | 第30-31页 |
| 2.1.1 菌株、宿主菌和质粒载体 | 第30页 |
| 2.1.2 试剂、酶及仪器 | 第30-31页 |
| 2.1.3 引物 | 第31页 |
| 2.2 方法 | 第31-39页 |
| 2.2.1 嗜水气单胞菌FNR、ICS基因的扩增 | 第31-32页 |
| 2.2.2 嗜水气单胞菌FNR、ICS基因的回收与连接 | 第32页 |
| 2.2.3 连接产物的转化 | 第32-33页 |
| 2.2.4 重组质粒的构建与验证 | 第33-34页 |
| 2.2.5 嗜水气单胞菌FNR、EntC及MenF的诱导表达 | 第34-35页 |
| 2.2.6 嗜水气单胞菌FNR、EntC及MenF的分离纯化 | 第35-36页 |
| 2.2.7 纯化蛋白FNR、EntC及MenF的酶活分析 | 第36-37页 |
| 2.2.8 FNR、EntC及MenF的生物信息学分析预测 | 第37-38页 |
| 2.2.9 EntC的突变体的初步构建与分析 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-55页 |
| 3.1 嗜水气单胞菌FNR、EntC及MenF基因的克隆 | 第39-42页 |
| 3.2 嗜水气单胞菌FNR、EntC及MenF的系统进化树分析 | 第42-43页 |
| 3.3 重组表达质粒的验证及表达 | 第43-46页 |
| 3.3.1 重组表达质粒pET42a-fnr及pET28a-entC、pET28a-menF的验证 | 第43-44页 |
| 3.3.2 重组表达质粒pET42a-fnr及pET28a-entC、pET28a-menF的表达 | 第44-46页 |
| 3.4 嗜水气单胞菌FNR、EntC及MenF的分离纯化及含量测定 | 第46-47页 |
| 3.4.1 嗜水气单胞菌FNR的分离纯化 | 第46页 |
| 3.4.2 嗜水气单胞菌EntC及MenF的分离纯化 | 第46-47页 |
| 3.5 嗜水气单胞菌FNR、EntC及MenF的酶活分析 | 第47-48页 |
| 3.5.1 嗜水气单胞菌FNR的酶活分析 | 第47-48页 |
| 3.5.2 嗜水气单胞菌EntC及MenF的酶活分析 | 第48页 |
| 3.6 嗜水气单胞菌FNR、EntC及MenF结构预测与分析 | 第48-55页 |
| 3.6.1 嗜水气单胞菌FNR的三维结构预测与分析 | 第48-49页 |
| 3.6.2 嗜水气单胞菌EntC及MenF的三维结构预测与分析 | 第49-50页 |
| 3.6.3 嗜水气单胞菌EntC及MenF二级结构分析 | 第50-51页 |
| 3.6.4 嗜水气单胞菌EntC突变体初步构建 | 第51-55页 |
| 4 讨论 | 第55-58页 |
| 5 小结 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 附录 | 第66-68页 |
| 硕士期间发表的学术论文 | 第68页 |
| 衷心感谢以下基金资助 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
