| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 英文缩写词表 | 第9-12页 |
| 文献综述 | 第12-18页 |
| 引言 | 第18-19页 |
| 主要技术路线 | 第19-20页 |
| 1 材料与方法 | 第20-33页 |
| 1.1 实验材料 | 第20-22页 |
| 1.1.1 菌株与载体 | 第20页 |
| 1.1.2 主要工具酶及试剂盒 | 第20页 |
| 1.1.3 其他相关试剂 | 第20页 |
| 1.1.4 标准参照物 | 第20页 |
| 1.1.5 缓冲液的配制 | 第20-21页 |
| 1.1.6 仪器设备 | 第21-22页 |
| 1.2 实验方法 | 第22-33页 |
| 1.2.1 目的基因的合成 | 第22-23页 |
| 1.2.2 表达载体pET32a-phoP/Q的构建 | 第23-27页 |
| 1.2.3 重组PhoP蛋白的诱导表达 | 第27-29页 |
| 1.2.4 重组PhoP蛋白的Ni-NTA纯化 | 第29-30页 |
| 1.2.5 重组PhoQ蛋白的诱导表达 | 第30页 |
| 1.2.6 重组PhoQ蛋白的Ni-NTA纯化 | 第30页 |
| 1.2.7 禽致病性大肠杆菌PhoP蛋白与毒力基因的相关性分析 | 第30-33页 |
| 2 结果与分析 | 第33-42页 |
| 2.1 表达载体pET32a-phoP/Q的构建 | 第33-35页 |
| 2.2 重组PhoP蛋白的诱导表达 | 第35-37页 |
| 2.2.1 重组PhoP蛋白的IPTG诱导表达 | 第35页 |
| 2.2.2 重组PhoP蛋白诱导温度的优化 | 第35-36页 |
| 2.2.3 重组PhoP蛋白IPTG诱导浓度的优化 | 第36-37页 |
| 2.3 重组PhoP蛋白的Ni-NTA纯化 | 第37-38页 |
| 2.4 重组PhoQ蛋白的诱导表达 | 第38-39页 |
| 2.5 重组PhoQ蛋白的Ni-NTA纯化 | 第39页 |
| 2.6 禽致病性大肠杆菌PhoP蛋白与毒力基因的相关性分析 | 第39-42页 |
| 2.6.1 禽致病性大肠杆菌毒力相关基因的获得 | 第39-40页 |
| 2.6.2 禽致病性大肠杆菌PhoP与毒力相关基因启动子的结合检测分析 | 第40-42页 |
| 3 讨论 | 第42-46页 |
| 3.1 禽致病性大肠杆菌phoP/Q基因的序列分析 | 第42-43页 |
| 3.2 表达菌株和载体的选择 | 第43页 |
| 3.3 禽致病性大肠杆菌PhoP/Q重组蛋白的表达及纯化 | 第43-44页 |
| 3.4 禽致病性大肠杆菌PhoP蛋白与毒力基因的相关性分析 | 第44-45页 |
| 3.5 本实验的安排依据及后续研究 | 第45-46页 |
| 4 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 个人简介 | 第53页 |
