| 摘要 | 第8-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-26页 |
| 1 小麦白粉病的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.1 小麦白粉病的危害 | 第14页 |
| 1.2 小麦抗白粉病相关基因的研究进展 | 第14-15页 |
| 2 植物的防御反应 | 第15-16页 |
| 3 植物钙信号系统 | 第16-24页 |
| 3.1 植物防御反应中早期的钙离子增加 | 第16-18页 |
| 3.1.1 不同植物诱导反应中的钙信号 | 第16-17页 |
| 3.1.2 胞外钙信号和质膜钙信号在钙信号介导的反应中的作用 | 第17-18页 |
| 3.2 植物防御反应中的钙离子传感蛋白 | 第18-21页 |
| 3.2.1 钙调素和钙调素结合蛋白 | 第18-19页 |
| 3.2.2 钙离子依赖型蛋白激酶 | 第19-20页 |
| 3.2.3 类钙调神经素B亚基蛋白 | 第20-21页 |
| 3.3 钙离子浓度的增加与防御信号途径之间的关系 | 第21-24页 |
| 3.3.1 蛋白磷酸化和MAPK的激活 | 第21-22页 |
| 3.3.2 活性氧和一氧化氮的产生 | 第22-23页 |
| 3.3.3 基因表达、植物抗毒素的产生、细胞死亡 | 第23-24页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第24-26页 |
| 第二章 钙信号参与PM21介导的白粉病广谱抗性研究 | 第26-52页 |
| 1 材料与方法 | 第26-29页 |
| 1.1 试验材料 | 第26页 |
| 1.2 试验方法 | 第26-29页 |
| 1.2.1 LaCl_3处理南农9918根系 | 第26页 |
| 1.2.2 白粉菌接菌方法和取样方法 | 第26-27页 |
| 1.2.3 检测植物叶片与白粉菌互作时活性氧积累的方法 | 第27页 |
| 1.2.4 检测植物叶片和白粉菌互作时细胞死亡的方法 | 第27页 |
| 1.2.5 检测处理组和对照组植物叶片上白粉菌发育情况的方法 | 第27-28页 |
| 1.2.6 植物总RNA的提取 | 第28页 |
| 1.2.7 实时荧光定量PCR | 第28-29页 |
| 1.2.8 数据分析 | 第29页 |
| 2 结果与分析 | 第29-50页 |
| 2.1 LaCl_3处理南农9918后叶片组织样观察 | 第29-47页 |
| 2.1.1 LaCl_3处理后白粉菌孢子发育情况观察 | 第30-36页 |
| 2.1.2 LaCl_3处理后活性氧积累情况观察 | 第36-42页 |
| 2.1.3 LaCl_3处理后细胞过敏性死亡情况观察 | 第42-47页 |
| 2.2 LaCl_3处理南农991 8后,钙信号相关基因和抗病相关基因表达特征分析 | 第47-50页 |
| 2.2.1 LaCl_3处理南农9918后,钙信号相关基因表达特征 | 第47-48页 |
| 2.2.2 LaCl_3处理南农9918后,抗病相关基因表达特征 | 第48-50页 |
| 3 讨论 | 第50-52页 |
| 3.1 钙离子通道的阻断促进了白粉菌在侵染前期的发育 | 第50页 |
| 3.2 钙离子通道的阻断抑制了白粉菌诱导的活性氧的积累 | 第50-51页 |
| 3.3 钙离子通道的阻断抑制了水杨酸通路相关抗性基因的表达 | 第51-52页 |
| 第三章 抗白粉病相关的钙信号途径基因的表达和功能的初步分析 | 第52-80页 |
| 1 材料与方法 | 第52-56页 |
| 1.1 试验材料 | 第52页 |
| 1.2 试验方法 | 第52-56页 |
| 1.2.1 Hv-MPK12、Hv-CaMBP4、Hv-CBL1、Hv-CPK12表达特征分析 | 第52-53页 |
| 1.2.2 Hv-MPK12、Hv-CaMBP4、Hv-CBL1、Hv-CPK12的染色体定位 | 第53-54页 |
| 1.2.3 用VIGS进行Hv-MPK12、Hv-CaMBP4、Hv-CBL1、Hv-CPK12功能分析 | 第54-56页 |
| 2 结果与分析 | 第56-76页 |
| 2.1 簇毛麦抗白粉病相关钙信号途径EST探针的筛选获得 | 第56-59页 |
| 2.2 Hv-MPK12、Hv-CaMBP4、Hv-CBL1、Hv-CPK12的染色体定位 | 第59-60页 |
| 2.3 Hv-MPK12、Hv-CaMBP4、Hv-CBL1、Hv-CPK12的表达特征分析 | 第60-69页 |
| 2.3.1 Hv-MPK12、Hv-CaMBP4、Hv-CBL1、Hv-CPK12在白粉病诱导后的簇毛麦叶片中的表达特征分析 | 第60-61页 |
| 2.3.2 Hv-MPK12、Hv-CaMBP4、Hv-CBL1、Hv-CPK12的小麦直系同源基因在白粉菌诱导后的不同抗感材料叶片中的表达特征分析 | 第61-66页 |
| 2.3.3 Hv-MPK12、Hv-CaMBP4、Hv-CBL1、Hv-CPK12在活性氧激活剂或抑制剂处理的簇毛麦叶片中的表达特征分析 | 第66-67页 |
| 2.3.4 Hv-MPK12、Hv-CaMBP4、Hv-CBL1、Hv-CPK12在非生物胁迫诱导后的簇毛麦叶片中的表达特征分析 | 第67-69页 |
| 2.4 利用VIGS技术鉴定Hv-MPK12、Hv-CaMBP4、Hv-CBL1、Hv-CPK12的小麦直系同源基因参与白粉病抗性的功能 | 第69-76页 |
| 2.4.1 VIGS载体的构建 | 第69-70页 |
| 2.4.2 VIGS载体线性化和体外转录 | 第70-71页 |
| 2.4.3 接种病毒后的表型观察 | 第71-72页 |
| 2.4.4 接种白粉菌后的表型观察 | 第72-74页 |
| 2.4.5 qRT-PCR对目标基因沉默效率的分析 | 第74-75页 |
| 2.4.6 沉默的植株中相关抗病基因的表达分析 | 第75-76页 |
| 3 讨论 | 第76-80页 |
| 3.1 Hv-MPK12、HvCaMBP4、Hv-CBL1、Hv-CPK12参与小麦抗白粉病反应途径 | 第76-77页 |
| 3.2 Hv-MPK12 Hv-CaMBP4、HvCBL1 Hv-CPK12正向调控活性氧积累 | 第77-80页 |
| 第四章 HV-MPK12基因的克隆及基于转基因的功能初步研究 | 第80-94页 |
| 1 材料与方法 | 第80-84页 |
| 1.1 试验材料 | 第80-81页 |
| 1.2 试验方法 | 第81-84页 |
| 1.2.1 Hv-MPK12基因cDNA全长的克隆 | 第81-82页 |
| 1.2.2 Hv-MPK12基因载体的构建 | 第82页 |
| 1.2.3 微弹制备及基因枪轰击 | 第82-83页 |
| 1.2.4 转基因阳性植株的鉴定 | 第83-84页 |
| 1.2.5 转基因植株抗白粉病鉴定 | 第84页 |
| 2 结果与分析 | 第84-91页 |
| 2.1 Hv-MPK12基因cDNA全长的克隆 | 第84-88页 |
| 2.2 Hv-MPK12转基因表达载体的构建 | 第88页 |
| 2.3 Hv-MPK12转基因植株的获得 | 第88-89页 |
| 2.4 阳性转基因植株的分子鉴定 | 第89-90页 |
| 2.5 T_0代转基因植株的白粉病抗性鉴定 | 第90-91页 |
| 3 讨论 | 第91-94页 |
| 全文结论 | 第94-96页 |
| 参考文献 | 第96-104页 |
| 附录 | 第104-106页 |
| 致谢 | 第106页 |
