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构建ANG-shRNA慢病毒载体及其对糖尿病大鼠眼底病变的影响

摘要第4-5页
abstract第5页
引言第9-11页
第1章 实验研究第11-53页
    1.1 实验材料第11-14页
        1.1.1 实验动物及实验用细胞第11页
        1.1.2 实验试剂及其配置第11-13页
        1.1.3 实验仪器第13-14页
        1.1.4 引物及ANG-shRNA序列信息第14页
    1.2 实验方法第14-22页
        1.2.1 ANG-shRNA慢病毒载体的制备第15-16页
        1.2.2 体外细胞实验筛选干扰效率最高的ANG-shRNA慢病毒载体第16-17页
        1.2.3 NC组与ANG-shRNA-1、ANG-shRNA-2 及ANG-shRNA-3 稳定转染株的筛选第17页
        1.2.4 实时荧光定量PCR(qPCR)筛选ANG-shRNA慢病毒的载体序列的干扰效率第17-19页
        1.2.5 糖尿病大鼠动物模型的建立及分组第19页
        1.2.6 玻璃体腔注射ANG-shRNA慢病毒载体及空载慢病毒第19-20页
        1.2.7 冰冻切片检测糖尿病大鼠视网膜病毒感染情况第20页
        1.2.8 Evans蓝活体灌注视网膜铺片第20页
        1.2.9 PAS染色第20-21页
        1.2.10 电镜观察第21页
        1.2.11 qPCR检测各组大鼠ANG、VEGF、Bcl-2、Bax及Hsp27mRNA相对表达量第21页
        1.2.12 Western blot检测各组大鼠ANG、VEGF、Bcl-2、Bax及Hsp27蛋白质的相对表达量第21-22页
        1.2.13 统计学分析第22页
    1.3 结果第22-39页
        1.3.1 病毒滴度第22-23页
        1.3.2 RH-35 细胞慢病毒最佳感染复数MOI值的筛选第23页
        1.3.3 NC组与ANG-sh RNA-1、ANG-shRNA-2 及ANG-shRNA-3 稳定转染株的筛选第23-24页
        1.3.4 ANG-shRNA-1 组、ANG-shRNA-2 组及ANG-shRNA-3 组ANGmRNA的干扰效率的筛选第24-25页
        1.3.5 糖尿病大鼠模型建立情况第25页
        1.3.6 荧光显微镜观察大鼠视网膜慢病毒感染情况第25-26页
        1.3.7 糖尿病大鼠视网膜ANG-shRNA慢病毒载体干扰效率的筛选第26-27页
        1.3.8 Evans蓝活体关注视网膜铺片结果第27-28页
        1.3.9 大鼠视网膜PAS染色结果第28页
        1.3.10 视网膜电镜切片结果第28-30页
        1.3.11 各组大鼠视网膜ANG、VEGF、Bcl-2、Bax及Hsp27因子的相对表达量第30-39页
    1.4 讨论第39-47页
        1.4.1 RNA干扰技术(RNAi)第39-40页
        1.4.2 血管生成素(ANG)在DR中的表达第40-41页
        1.4.3 ANG-shRNA慢病毒干扰效率筛选第41-42页
        1.4.4 糖尿病大鼠模型的建立及玻璃体腔注射第42-43页
        1.4.5 糖尿病大鼠形态学的检测第43-44页
        1.4.6 电镜观察视网膜超微结构第44-45页
        1.4.7 糖尿病大鼠视网膜VEGF的表达第45-46页
        1.4.8 糖尿病视网膜病变与细胞凋亡及保护相关的细胞因子表达第46-47页
    1.5 小结第47页
    参考文献第47-53页
第2章 综述 血管生成素及RNAi技术的研究进展第53-63页
    2.1 血管生成素的研究第53-56页
        2.1.1 血管生成素的生物学特性第53-54页
        2.1.2 血管生成素的生物学功能第54-55页
        2.1.3 血管生成素在医学中的应用第55-56页
    2.2 RNA干扰(RNAi)技术的研究进展第56-59页
        2.2.1 RNAi的定义第56-57页
        2.2.2 RNAi技术的作用机制第57-58页
        2.2.3 RNAi技术的应用第58-59页
    2.3 总结第59-60页
    参考文献第60-63页
结论第63-64页
致谢第64-65页
导师简介第65-66页
作者简介第66-67页
学位论文数据集第67页

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