| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 第1章 绪论 | 第9-25页 |
| 1.1 课题背景及研究的目的和意义 | 第9-10页 |
| 1.2 miRNA研究进展 | 第10-18页 |
| 1.2.1 miRNA的发现及作用机制 | 第10-13页 |
| 1.2.2 miRNA靶基因的预测 | 第13-14页 |
| 1.2.3 miRNA与癌症的关系 | 第14-17页 |
| 1.2.4 miR-1188 研究进展 | 第17-18页 |
| 1.3 Slc9a8及其基因家族的研究进展 | 第18-21页 |
| 1.3.1 SLC9/NHE基因家族研究进展 | 第18-20页 |
| 1.3.2 Slc9a8研究进展 | 第20-21页 |
| 1.4 IL-4 研究进展 | 第21-23页 |
| 1.4.1 IL-4 简介 | 第21-22页 |
| 1.4.2 IL-4 与肿瘤的关系 | 第22-23页 |
| 1.5 研究内容及技术路线 | 第23-25页 |
| 1.5.1 主要研究内容 | 第23页 |
| 1.5.2 主要研究技术路线 | 第23-25页 |
| 第2章 材料与方法 | 第25-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-27页 |
| 2.1.1 实验载体及细胞系 | 第25页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第26-27页 |
| 2.1.4 实验分析中的网站及软件 | 第27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-37页 |
| 2.2.1 总RNA的提取 | 第27页 |
| 2.2.2 miRNA定量PCR | 第27-28页 |
| 2.2.3 miRNA定量PCR | 第28-30页 |
| 2.2.4 细胞培养及转染 | 第30-31页 |
| 2.2.5 靶基因重组载体构建 | 第31-33页 |
| 2.2.6 双荧光素酶报告基因检测 | 第33页 |
| 2.2.7 过表达载体的构建 | 第33-34页 |
| 2.2.8 Western Blot | 第34-36页 |
| 2.2.9 统计学分析 | 第36-37页 |
| 第3章 MIR-1188 靶向调控SLC9A8的表达 | 第37-52页 |
| 3.1 引言 | 第37页 |
| 3.2 生物信息学预测miR-1188 的靶基因 | 第37-43页 |
| 3.2.1 RNA-seq数据分析 | 第37-42页 |
| 3.2.2 预测软件分析显著差异表达基因 | 第42-43页 |
| 3.3 miR-1188 靶基因的鉴定 | 第43-48页 |
| 3.3.1 荧光素酶报告基因重组载体的构建 | 第43-46页 |
| 3.3.2 双荧光报告系统验证miR-1188 靶基因 | 第46-48页 |
| 3.4 miR-1188 调控Slc9a8的表达 | 第48-50页 |
| 3.4.1 miR-1188 对Slc9a8 mRNA表达水平的影响 | 第48-50页 |
| 3.4.2 miR-1188 对Slc9a8蛋白表达水平的影响 | 第50页 |
| 3.5 讨论 | 第50-51页 |
| 3.6 本章小结 | 第51-52页 |
| 第4章 MIR-1188 通过靶基因SLC9A8对IL-4 的影响 | 第52-58页 |
| 4.1 引言 | 第52-53页 |
| 4.2 过表达Slc9a8对其下游基因IL-4 表达的影响 | 第53-55页 |
| 4.2.1 Slc9a8过表达载体的构建 | 第53-54页 |
| 4.2.2 Slc9a8调控IL-4 的表达 | 第54-55页 |
| 4.3 miR-1188 通过Slc9a8对IL-4 表达的影响 | 第55-56页 |
| 4.3.1 miR-1188 对IL-4 m RNA表达水平的影响 | 第55页 |
| 4.3.2 miR-1188 通过Slc9a8调控IL-4 的表达 | 第55-56页 |
| 4.4 讨论 | 第56-57页 |
| 4.5 本章小结 | 第57-58页 |
| 第5章 小鼠体内MIR-1188 对SLC9A8及IL-4 的影响 | 第58-62页 |
| 5.1 引言 | 第58页 |
| 5.2 体内实验验证miR-1188 对Slc9a8表达的影响 | 第58-59页 |
| 5.2.1 miR-1188 对Slc9a8 mRNA表达水平的影响 | 第58-59页 |
| 5.2.2 miR-1188 对Slc9a8蛋白水平的影响 | 第59页 |
| 5.3 体内实验验证miR-1188 对IL-4 表达的影响 | 第59-60页 |
| 5.4 讨论 | 第60-61页 |
| 5.5 本章小结 | 第61-62页 |
| 结论 | 第62-63页 |
| 展望 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 附录 | 第72-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
