| 摘要 | 第10-13页 |
| ABSTRACT | 第13-15页 |
| 第一章 猪呼肠孤病毒研究进展 | 第16-23页 |
| 1. 猪呼肠孤病毒基因及其编码蛋白 | 第17-20页 |
| 2. 呼肠孤病毒的复制周期 | 第20-22页 |
| 3. 猪呼肠孤病毒流行情况 | 第22-23页 |
| 第二章 猪冠状病毒的研究进展 | 第23-33页 |
| 1. 基因组结构与蛋白功能 | 第23-26页 |
| 2. 冠状病毒复制周期 | 第26-28页 |
| 3. 冠状病毒感染与细胞自噬 | 第28-30页 |
| 4. 猪冠状病毒流行情况 | 第30-33页 |
| 4.1 猪流行性腹泻病毒流行情况 | 第30-31页 |
| 4.2 猪丁型冠状病毒流行情况 | 第31-32页 |
| 4.3 猪传染性胃肠炎病毒流行情况 | 第32-33页 |
| 第二部分 试验研究 | 第33-103页 |
| 第一章 猪呼肠孤病毒分离及生物学特性研究 | 第34-52页 |
| 1 材料与方法 | 第35-42页 |
| 1.1 材料 | 第35-36页 |
| 1.1.1 病料 | 第35页 |
| 1.1.2 试剂与溶液配制 | 第35-36页 |
| 1.1.3 质粒和菌株 | 第36页 |
| 1.1.4 实验动物和病毒液 | 第36页 |
| 1.2 实验方法 | 第36-42页 |
| 1.2.1 病毒分离与未知病毒确认 | 第36-37页 |
| 1.2.2 病毒感染细胞条件摸索 | 第37-38页 |
| 1.2.3 间接免疫荧光 | 第38页 |
| 1.2.4 空斑试验 | 第38页 |
| 1.2.5 猪呼肠孤病毒生长曲线测定 | 第38-39页 |
| 1.2.6 透射电镜观察病毒侵染细胞 | 第39-40页 |
| 1.2.7 猪呼肠孤病毒对温度敏感性的测定 | 第40页 |
| 1.2.8 δ1蛋白原核表达与纯化 | 第40-41页 |
| 1.2.9 抗猪呼肠孤病毒δ 1蛋白兔多克隆抗体制备 | 第41-42页 |
| 1.2.10 MRV-ZJ2013毒株致病性试验 | 第42页 |
| 2 结果 | 第42-49页 |
| 2.1 MRV-ZJ2013毒株细胞生物学特性 | 第42-45页 |
| 2.2 δ1蛋白表达纯化与多克隆抗体制备 | 第45-47页 |
| 2.3 MRV-ZJ2013致病性试验 | 第47-49页 |
| 3 讨论 | 第49-52页 |
| 第二章 猪呼肠孤病毒基因组分子克隆及进化分析 | 第52-68页 |
| 1 材料与方法 | 第53-57页 |
| 1.1 材料 | 第53页 |
| 1.1.1 试剂 | 第53页 |
| 1.1.2 溶液配制 | 第53页 |
| 1.2 实验方法 | 第53-57页 |
| 1.2.1 病毒基因组RNA抽提和反转录 | 第53-54页 |
| 1.2.2 病毒基因组扩增 | 第54-55页 |
| 1.2.3 感受态细胞制备 | 第55-56页 |
| 1.2.4 基因组分子克隆与测序 | 第56-57页 |
| 1.2.5 猪呼肠孤病毒的序列分析 | 第57页 |
| 1.2.6 猪呼肠孤病毒的序列重排分析 | 第57页 |
| 2 结果 | 第57-66页 |
| 3 讨论 | 第66-68页 |
| 第三章 猪呼肠孤病毒流行病学调查 | 第68-81页 |
| 1 材料与方法 | 第69-72页 |
| 1.1 材料 | 第69页 |
| 1.1.1 病料 | 第69页 |
| 1.1.2 试剂与溶液配制 | 第69页 |
| 1.2 实验方法 | 第69-72页 |
| 1.2.1 猪呼肠孤病毒巢式RT-PCR检测方法建立 | 第69-71页 |
| 1.2.2 抗猪呼肠孤病毒血清中和试验方法建立 | 第71页 |
| 1.2.3 基于猪呼肠孤病毒δ1蛋白间接ELISA方法建立 | 第71-72页 |
| 2 结果 | 第72-80页 |
| 2.1 巢式RT-PCR检测方法的建立 | 第72-73页 |
| 2.2 巢式RT-PCR检测结果 | 第73-75页 |
| 2.3 猪呼肠孤病毒阳性血清的筛选及间接ELISA方法的建立 | 第75-76页 |
| 2.4 间接ELISA方法与中和抗体测定方法对比 | 第76-77页 |
| 2.5 临床样本间接ELISA检测结果 | 第77-80页 |
| 3 讨论 | 第80-81页 |
| 第四章 猪丁型冠状病毒入侵细胞的生物学特性研究 | 第81-93页 |
| 1 材料与方法 | 第82-84页 |
| 1.1 实验材料 | 第82页 |
| 1.1.1 细胞和病毒 | 第82页 |
| 1.1.2 实验试剂 | 第82页 |
| 1.2 实验方法 | 第82-84页 |
| 1.2.1 PDCoV在LLC-PK1细胞中生长动力学研究 | 第82-83页 |
| 1.2.2 透射电镜观察PDCoV在细胞中增殖过程 | 第83页 |
| 1.2.3 PDCoV感染LLC-PK1细胞诱导细胞自噬初步研究 | 第83-84页 |
| 2 结果 | 第84-89页 |
| 2.1 PDCoV在LLC-PK1细胞中生长动力学研究 | 第84页 |
| 2.2 透射电镜观察PDCoV在细胞中增殖过程 | 第84-87页 |
| 2.3 PDCoV感染细胞过程中膜重排 | 第87-88页 |
| 2.4 PDCoV感染LLC-PK1细胞诱导细胞自噬初步研究 | 第88-89页 |
| 3. 讨论 | 第89-93页 |
| 参考文献 | 第93-101页 |
| 全文总结 | 第101-102页 |
| 展望 | 第102-103页 |
| 第三部分 附录 | 第103-107页 |
| 附录A 缩略词 | 第103-105页 |
| 攻读博士学位期间发表的文章 | 第105-106页 |
| 致谢 | 第106-107页 |
