摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
上篇 文献综述 | 第11-24页 |
1 香蕉枯萎病研究概况 | 第11-15页 |
1.1 香蕉枯萎病的分布情况 | 第11-12页 |
1.2 香蕉枯萎病致病机理 | 第12-13页 |
1.3 香蕉枯萎病综合防控研究进展 | 第13-15页 |
1.3.1 培育抗病品种 | 第13页 |
1.3.2 植物检验检疫 | 第13页 |
1.3.3 栽培管理措施 | 第13页 |
1.3.4 化学防治 | 第13-14页 |
1.3.5 生物防治 | 第14-15页 |
2 枯草芽孢杆菌研究概况 | 第15-19页 |
2.1 枯草芽孢杆菌在植物病害防治中的作用机制 | 第16-17页 |
2.1.1 竞争作用 | 第16页 |
2.1.2 拮抗作用 | 第16-17页 |
2.1.3 诱导植物抗性作用 | 第17页 |
2.2 枯草芽孢杆菌产生活性代谢产物 | 第17-19页 |
2.2.1 非核糖体途径合成的活性物质 | 第17页 |
2.2.2 脂肽抗生素 | 第17-18页 |
2.2.3 多肽类抑菌物质 | 第18页 |
2.2.4 核糖体合成的抗菌蛋白 | 第18页 |
2.2.5 细菌素 | 第18页 |
2.2.6 几丁质酶和葡聚糖酶 | 第18-19页 |
2.2.7 其他抗菌蛋白 | 第19页 |
3 蛋白质的分离纯化 | 第19-21页 |
3.1 蛋白质的粗分离 | 第19-20页 |
3.1.1 蛋白质的盐析 | 第19-20页 |
3.1.2 等电点沉淀法 | 第20页 |
3.1.3 低温有机溶剂沉淀法 | 第20页 |
3.1.4 透析与超滤 | 第20页 |
3.2 蛋白质的细分离 | 第20-21页 |
3.2.1 电泳法 | 第20页 |
3.2.2 层析法 | 第20-21页 |
4 质谱分析 | 第21-22页 |
5 研究的目的、意义及技术路线 | 第22-24页 |
下篇 研究内容 | 第24-54页 |
1 材料与方法 | 第24-35页 |
1.1 材料 | 第24-26页 |
1.1.1 菌株 | 第24页 |
1.1.2 培养基配方 | 第24页 |
1.1.3 主要仪器 | 第24-25页 |
1.1.4 主要试剂 | 第25页 |
1.1.5 主要方法 | 第25-26页 |
1.2 API50CHB生化鉴定及B25对常见的病原真菌的抑制作用 | 第26-27页 |
1.2.1 API 50 CHB生化鉴定 | 第26-27页 |
1.2.2 枯草芽孢杆菌B25对病原真菌的抑制测定 | 第27页 |
1.3 枯草芽孢杆菌B25发酵条件的优化 | 第27-29页 |
1.3.1 种子液的制备 | 第27页 |
1.3.2 无菌发酵液的制备方法 | 第27页 |
1.3.3 枯草芽孢杆菌B25生长阶段与抑菌物质活性之间的关系 | 第27页 |
1.3.4 培养基组分筛选单因素实验 | 第27-28页 |
1.3.5 培养基组分的正交试验 | 第28页 |
1.3.6 培养条件的优化 | 第28-29页 |
1.4 活性物质的部分性质的研究 | 第29-31页 |
1.4.1 活性抗菌物质的提取 | 第29页 |
1.4.2 蛋白含量测定方法 | 第29-30页 |
1.4.3 最佳硫酸铵饱和度的确定 | 第30页 |
1.4.4 抗菌活性物质的部分特性分析 | 第30-31页 |
1.5 抗菌蛋白的分离纯化 | 第31-35页 |
1.5.1 粗提液的大量制备 | 第31-32页 |
1.5.2 冷冻干燥浓缩 | 第32页 |
1.5.3 DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析 | 第32-33页 |
1.5.4 Sephadex G100层析 | 第33页 |
1.5.5 SDS-PAGE检测 | 第33-35页 |
1.6 抗菌蛋白的质谱分析 | 第35页 |
2 结果与分析 | 第35-51页 |
2.1 芽孢杆菌B25的生化鉴定及B25对常见的病原真菌的拮抗作用 | 第35-37页 |
2.1.1 API 50 CHB生化鉴定 | 第35-36页 |
2.1.2 对几种病原真菌的拮抗作用 | 第36-37页 |
2.2 发酵条件的优化 | 第37-43页 |
2.2.1 枯草芽孢杆菌B25生长阶段与抑菌活性物质之间的关系 | 第37-38页 |
2.2.2 培养基组分筛选单因素试验 | 第38-41页 |
2.2.3 培养条件的优化 | 第41-43页 |
2.2.4 活性上清液对离体叶片上芒果炭疽病的防治 | 第43页 |
2.3 活性物质的提取及其部分性质 | 第43-48页 |
2.3.1 抑菌活性物质的提取 | 第43-44页 |
2.3.2 蛋白质含量标准曲线绘制 | 第44页 |
2.3.3 硫酸铵分级盐析条件确定 | 第44页 |
2.3.4 枯草芽孢菌株B25活性抗菌物质的性质 | 第44-46页 |
2.3.5 抗菌活性物质经不同截流分子量超滤管试验 | 第46页 |
2.3.6 活性上清液的蛋白酶、纤维素酶(β-1,4-葡聚糖酶)、几丁质酶 | 第46-47页 |
2.3.7 拮抗菌B25活性粗提液对指示菌的影响 | 第47-48页 |
2.4 活性抑菌物质分离纯化 | 第48-51页 |
2.4.1 DEAE-Sepharose fast flow离子交换 | 第48-50页 |
2.4.2 Sephadex G100层析 | 第50-51页 |
2.4.3 纯化过程及回收率 | 第51页 |
2.5 抗菌蛋白的LC-MS/MS分析 | 第51页 |
3 分析与讨论 | 第51-54页 |
结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-60页 |
附录 | 第60-61页 |
攻读硕士期间发表或者待发表的文章 | 第61-62页 |
致谢 | 第62页 |