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枯草芽孢杆菌B25抗真菌活性物质的部分特性分析及分离纯化

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
上篇 文献综述第11-24页
    1 香蕉枯萎病研究概况第11-15页
        1.1 香蕉枯萎病的分布情况第11-12页
        1.2 香蕉枯萎病致病机理第12-13页
        1.3 香蕉枯萎病综合防控研究进展第13-15页
            1.3.1 培育抗病品种第13页
            1.3.2 植物检验检疫第13页
            1.3.3 栽培管理措施第13页
            1.3.4 化学防治第13-14页
            1.3.5 生物防治第14-15页
    2 枯草芽孢杆菌研究概况第15-19页
        2.1 枯草芽孢杆菌在植物病害防治中的作用机制第16-17页
            2.1.1 竞争作用第16页
            2.1.2 拮抗作用第16-17页
            2.1.3 诱导植物抗性作用第17页
        2.2 枯草芽孢杆菌产生活性代谢产物第17-19页
            2.2.1 非核糖体途径合成的活性物质第17页
            2.2.2 脂肽抗生素第17-18页
            2.2.3 多肽类抑菌物质第18页
            2.2.4 核糖体合成的抗菌蛋白第18页
            2.2.5 细菌素第18页
            2.2.6 几丁质酶和葡聚糖酶第18-19页
            2.2.7 其他抗菌蛋白第19页
    3 蛋白质的分离纯化第19-21页
        3.1 蛋白质的粗分离第19-20页
            3.1.1 蛋白质的盐析第19-20页
            3.1.2 等电点沉淀法第20页
            3.1.3 低温有机溶剂沉淀法第20页
            3.1.4 透析与超滤第20页
        3.2 蛋白质的细分离第20-21页
            3.2.1 电泳法第20页
            3.2.2 层析法第20-21页
    4 质谱分析第21-22页
    5 研究的目的、意义及技术路线第22-24页
下篇 研究内容第24-54页
    1 材料与方法第24-35页
        1.1 材料第24-26页
            1.1.1 菌株第24页
            1.1.2 培养基配方第24页
            1.1.3 主要仪器第24-25页
            1.1.4 主要试剂第25页
            1.1.5 主要方法第25-26页
        1.2 API50CHB生化鉴定及B25对常见的病原真菌的抑制作用第26-27页
            1.2.1 API 50 CHB生化鉴定第26-27页
            1.2.2 枯草芽孢杆菌B25对病原真菌的抑制测定第27页
        1.3 枯草芽孢杆菌B25发酵条件的优化第27-29页
            1.3.1 种子液的制备第27页
            1.3.2 无菌发酵液的制备方法第27页
            1.3.3 枯草芽孢杆菌B25生长阶段与抑菌物质活性之间的关系第27页
            1.3.4 培养基组分筛选单因素实验第27-28页
            1.3.5 培养基组分的正交试验第28页
            1.3.6 培养条件的优化第28-29页
        1.4 活性物质的部分性质的研究第29-31页
            1.4.1 活性抗菌物质的提取第29页
            1.4.2 蛋白含量测定方法第29-30页
            1.4.3 最佳硫酸铵饱和度的确定第30页
            1.4.4 抗菌活性物质的部分特性分析第30-31页
        1.5 抗菌蛋白的分离纯化第31-35页
            1.5.1 粗提液的大量制备第31-32页
            1.5.2 冷冻干燥浓缩第32页
            1.5.3 DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析第32-33页
            1.5.4 Sephadex G100层析第33页
            1.5.5 SDS-PAGE检测第33-35页
        1.6 抗菌蛋白的质谱分析第35页
    2 结果与分析第35-51页
        2.1 芽孢杆菌B25的生化鉴定及B25对常见的病原真菌的拮抗作用第35-37页
            2.1.1 API 50 CHB生化鉴定第35-36页
            2.1.2 对几种病原真菌的拮抗作用第36-37页
        2.2 发酵条件的优化第37-43页
            2.2.1 枯草芽孢杆菌B25生长阶段与抑菌活性物质之间的关系第37-38页
            2.2.2 培养基组分筛选单因素试验第38-41页
            2.2.3 培养条件的优化第41-43页
            2.2.4 活性上清液对离体叶片上芒果炭疽病的防治第43页
        2.3 活性物质的提取及其部分性质第43-48页
            2.3.1 抑菌活性物质的提取第43-44页
            2.3.2 蛋白质含量标准曲线绘制第44页
            2.3.3 硫酸铵分级盐析条件确定第44页
            2.3.4 枯草芽孢菌株B25活性抗菌物质的性质第44-46页
            2.3.5 抗菌活性物质经不同截流分子量超滤管试验第46页
            2.3.6 活性上清液的蛋白酶、纤维素酶(β-1,4-葡聚糖酶)、几丁质酶第46-47页
            2.3.7 拮抗菌B25活性粗提液对指示菌的影响第47-48页
        2.4 活性抑菌物质分离纯化第48-51页
            2.4.1 DEAE-Sepharose fast flow离子交换第48-50页
            2.4.2 Sephadex G100层析第50-51页
            2.4.3 纯化过程及回收率第51页
        2.5 抗菌蛋白的LC-MS/MS分析第51页
    3 分析与讨论第51-54页
结论第54-55页
参考文献第55-60页
附录第60-61页
攻读硕士期间发表或者待发表的文章第61-62页
致谢第62页

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