摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-20页 |
·动物分子育种的研究进展 | 第13页 |
·分子遗传标记技术 | 第13-14页 |
·MAS 在动物育种中的应用 | 第13-14页 |
·转基因技术及在动物育种中的应用 | 第14页 |
·FGF21 的研究进展 | 第14-18页 |
·FGF21 的发现和基因结构 | 第14-16页 |
·FGF21 作用的分子基础 | 第16页 |
·FGF21 的主要功能 | 第16-18页 |
·本研究的目的和意义 | 第18-20页 |
第二章 FGF21 基因多态位点的检测及遗传效应分析 | 第20-35页 |
·试验材料 | 第20页 |
·试验动物 | 第20页 |
·主要试剂 | 第20页 |
·仪器设备 | 第20页 |
·试验方法 | 第20-23页 |
·血样的采集及基因组 DNA 的提取 | 第20-21页 |
·DNA 质量检测、纯化及稀释 | 第21页 |
·混合 DNA 池构建 | 第21页 |
·扫描多态的引物设计 | 第21页 |
·测序 | 第21页 |
·多态位点的 CRS-PCR-RFLP 分析 | 第21-22页 |
·PCR 扩增的条件及程序 | 第22页 |
·试验结果的统计与分析 | 第22-23页 |
·试验结果 | 第23-32页 |
·黄牛基因组 DNA 样品的检测 | 第23页 |
·DNA 测序检测黄牛 FGF21 基因多态位点 | 第23-24页 |
·FGF21 基因 4 个多态位点的 CRS-PCR-RFLP 检测 | 第24-27页 |
·FGF21 基因 4 个多态位点的群体遗传学分析 | 第27-28页 |
·FGF21 基因 4 个多态位点的连锁不平衡分析 | 第28-30页 |
·FGF21 基因的单倍型分析 | 第30-31页 |
·FGF21 基因 4 个多态位点与黄牛生长性状的关联分析 | 第31-32页 |
·讨论 | 第32-35页 |
·FGF21 基因在 5 个黄牛群体中的遗传多样性 | 第32页 |
·连锁不平衡和单倍型分析 | 第32-33页 |
·FGF21 多态性与黄牛生长性状的相关分析 | 第33-35页 |
第三章 FGF21 基因的克隆及原核表达研究 | 第35-46页 |
·试验材料 | 第35-36页 |
·试验样品 | 第35页 |
·主要试剂 | 第35页 |
·溶液的配制 | 第35-36页 |
·仪器设备 | 第36页 |
·菌株和载体 | 第36页 |
·试验方法 | 第36-39页 |
·FGF21 的生物信息学分析 | 第36页 |
·引物的设计与合成 | 第36页 |
·肝脏组织 RNA 提取及 cDNA 的合成 | 第36-37页 |
·FGF21 基因克隆与 pET-28a-FGF21 重组质粒的构建 | 第37-38页 |
·秦川牛 FGF21 基因的原核表达 | 第38-39页 |
·目的蛋白的 Western blot 检测 | 第39页 |
·试验结果 | 第39-45页 |
·FGF21 的生物信息学分析 | 第39-41页 |
·肝脏组织 RNA 提取 | 第41-42页 |
·RT-PCR 法克隆秦川牛 FGF21 基因 CDS 区 | 第42页 |
·pET-28a-FGF21 重组质粒的构建 | 第42-43页 |
·秦川牛 FGF21 在大肠杆菌 BL21(DE3)中的表达 | 第43-44页 |
·Western blot 检测结果 | 第44-45页 |
·讨论 | 第45页 |
·小结 | 第45-46页 |
第四章 结论与创新点 | 第46-47页 |
·结论 | 第46页 |
·创新点 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-50页 |
附录 | 第50-64页 |
附录 1-A 多态试验中的溶液及配制方法 | 第50-51页 |
附录 1-B 克隆及原核表达中溶液及配制方法 | 第51-54页 |
附录 2 主要仪器设备 | 第54-55页 |
附录 3 基因组 DNA 的提取及纯化 | 第55-57页 |
附录 4 检测 FGF21 基因 SNP 多态性的 PCR 引物设计方案 | 第57-58页 |
附录 5 试验结果的统计与分析 | 第58-60页 |
附录 6 感受态细胞的制备方法(CaCl2法) | 第60-61页 |
附录 7 秦川牛肝脏组织 RNA 的提取及质量鉴定方法 | 第61-62页 |
附录 8 基因克隆与原核表达方面的试验步骤 | 第62-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
作者简介 | 第65页 |