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中国黄牛FGF21基因的遗传变异、克隆及原核表达研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-13页
第一章 文献综述第13-20页
   ·动物分子育种的研究进展第13页
   ·分子遗传标记技术第13-14页
     ·MAS 在动物育种中的应用第13-14页
     ·转基因技术及在动物育种中的应用第14页
   ·FGF21 的研究进展第14-18页
     ·FGF21 的发现和基因结构第14-16页
     ·FGF21 作用的分子基础第16页
     ·FGF21 的主要功能第16-18页
   ·本研究的目的和意义第18-20页
第二章 FGF21 基因多态位点的检测及遗传效应分析第20-35页
   ·试验材料第20页
     ·试验动物第20页
     ·主要试剂第20页
     ·仪器设备第20页
   ·试验方法第20-23页
     ·血样的采集及基因组 DNA 的提取第20-21页
     ·DNA 质量检测、纯化及稀释第21页
     ·混合 DNA 池构建第21页
     ·扫描多态的引物设计第21页
     ·测序第21页
     ·多态位点的 CRS-PCR-RFLP 分析第21-22页
     ·PCR 扩增的条件及程序第22页
     ·试验结果的统计与分析第22-23页
   ·试验结果第23-32页
     ·黄牛基因组 DNA 样品的检测第23页
     ·DNA 测序检测黄牛 FGF21 基因多态位点第23-24页
     ·FGF21 基因 4 个多态位点的 CRS-PCR-RFLP 检测第24-27页
     ·FGF21 基因 4 个多态位点的群体遗传学分析第27-28页
     ·FGF21 基因 4 个多态位点的连锁不平衡分析第28-30页
     ·FGF21 基因的单倍型分析第30-31页
     ·FGF21 基因 4 个多态位点与黄牛生长性状的关联分析第31-32页
   ·讨论第32-35页
     ·FGF21 基因在 5 个黄牛群体中的遗传多样性第32页
     ·连锁不平衡和单倍型分析第32-33页
     ·FGF21 多态性与黄牛生长性状的相关分析第33-35页
第三章 FGF21 基因的克隆及原核表达研究第35-46页
   ·试验材料第35-36页
     ·试验样品第35页
     ·主要试剂第35页
     ·溶液的配制第35-36页
     ·仪器设备第36页
     ·菌株和载体第36页
   ·试验方法第36-39页
     ·FGF21 的生物信息学分析第36页
     ·引物的设计与合成第36页
     ·肝脏组织 RNA 提取及 cDNA 的合成第36-37页
     ·FGF21 基因克隆与 pET-28a-FGF21 重组质粒的构建第37-38页
     ·秦川牛 FGF21 基因的原核表达第38-39页
     ·目的蛋白的 Western blot 检测第39页
   ·试验结果第39-45页
     ·FGF21 的生物信息学分析第39-41页
     ·肝脏组织 RNA 提取第41-42页
     ·RT-PCR 法克隆秦川牛 FGF21 基因 CDS 区第42页
     ·pET-28a-FGF21 重组质粒的构建第42-43页
     ·秦川牛 FGF21 在大肠杆菌 BL21(DE3)中的表达第43-44页
     ·Western blot 检测结果第44-45页
   ·讨论第45页
   ·小结第45-46页
第四章 结论与创新点第46-47页
   ·结论第46页
   ·创新点第46-47页
参考文献第47-50页
附录第50-64页
 附录 1-A 多态试验中的溶液及配制方法第50-51页
 附录 1-B 克隆及原核表达中溶液及配制方法第51-54页
 附录 2 主要仪器设备第54-55页
 附录 3 基因组 DNA 的提取及纯化第55-57页
 附录 4 检测 FGF21 基因 SNP 多态性的 PCR 引物设计方案第57-58页
 附录 5 试验结果的统计与分析第58-60页
 附录 6 感受态细胞的制备方法(CaCl2法)第60-61页
 附录 7 秦川牛肝脏组织 RNA 的提取及质量鉴定方法第61-62页
 附录 8 基因克隆与原核表达方面的试验步骤第62-64页
致谢第64-65页
作者简介第65页

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