| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 英文缩写表 | 第7-10页 |
| 1 引言 | 第10-15页 |
| 1.1 抑制性消减杂交SSH技术 | 第10-12页 |
| 1.1.1 抑制性消减杂交技术的原理和方法 | 第10-11页 |
| 1.1.2 抑制性消减杂交的技术要点及优缺点 | 第11-12页 |
| 1.2 抑制性消减杂交技术的应用 | 第12-14页 |
| 1.3 本项目研究目的和意义 | 第14-15页 |
| 2 材料与方法 | 第15-25页 |
| 2.1 试验材料和仪器试剂 | 第15页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第15页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第15页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第15页 |
| 2.2 试验方法 | 第15-25页 |
| 2.2.1 组织DNA提取和病原检测 | 第15-16页 |
| 2.2.2 组织总RNA提取和cDNA合成、扩增与纯化 | 第16-18页 |
| 2.2.3 差异片段的富集 | 第18-22页 |
| 2.2.4 文库构建 | 第22页 |
| 2.2.5 阳性克隆测序及序列生物信息学分析 | 第22-23页 |
| 2.2.6 10条ESTs的半定量RT-PCR检测 | 第23-25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-35页 |
| 3.1 嫁接侵染枣疯病病原后‘星光’的抗病表现 | 第25页 |
| 3.2 不同侵染时期‘星光’体内的病原检测 | 第25-26页 |
| 3.2.1 DNA提取质量检测 | 第25-26页 |
| 3.2.2 不同侵染时期‘星光’体内植原体病原的检测 | 第26页 |
| 3.3 SSH文库的构建 | 第26-30页 |
| 3.3.1 总RNA的提取 | 第26-27页 |
| 3.3.2 双链cDNA合成扩增的最优循环数确定 | 第27-28页 |
| 3.3.3 Rsa I酶切 | 第28页 |
| 3.3.4 接头连接效率分析 | 第28-29页 |
| 3.3.5 消减效率分析 | 第29页 |
| 3.3.6 差减杂交后产物的第一轮、第二轮PCR扩增结果分析 | 第29-30页 |
| 3.3.7 文库质量检测 | 第30页 |
| 3.4 获得ESTs的功能分类 | 第30-32页 |
| 3.5 10条ESTs的半定量RT-PCR分析 | 第32-35页 |
| 4 讨论 | 第35-39页 |
| 4.1 关于‘星光’材料的处理及RNA提取 | 第35页 |
| 4.2 植原体胁迫下枣差异表达基因分析 | 第35-38页 |
| 4.2.1 抗病相关基因的表达 | 第35-36页 |
| 4.2.2 信号转导相关基因的表达 | 第36-37页 |
| 4.2.3 转录相关基因的表达 | 第37页 |
| 4.2.4 植原体特异基因的表达 | 第37-38页 |
| 4.3 植原体胁迫下枣SSH文库构建的意义 | 第38页 |
| 4.4 存在问题及下一步工作建议 | 第38-39页 |
| 5 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-45页 |
| 附录 | 第45-46页 |
| 在读期间发表论文 | 第46-47页 |
| 作者简历 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48页 |
