| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略词索引表 | 第7-10页 |
| 1 引言 | 第10-15页 |
| 1.1 植物延伸因子家族的成员和结构特点 | 第10-11页 |
| 1.2 延伸因子的主要功能 | 第11-13页 |
| 1.2.1 eEF1A参与蛋白合成 | 第11页 |
| 1.2.2 eEF1A参与细胞调控 | 第11-12页 |
| 1.2.3 eEF1A其它功能 | 第12-13页 |
| 1.3 植物中的eEF1A | 第13页 |
| 1.4 本研究目的与意义 | 第13-15页 |
| 2 材料与方法 | 第15-27页 |
| 2.1 主要仪器和供试材料 | 第15-17页 |
| 2.1.1 试验仪器 | 第15页 |
| 2.1.2 供试试剂 | 第15页 |
| 2.1.3 试验材料 | 第15-16页 |
| 2.1.4 试验所用培养基 | 第16页 |
| 2.1.5 试验所用引物 | 第16-17页 |
| 2.2 试验方法 | 第17-27页 |
| 2.2.1 供试材料总RNA的提取及反转录 | 第17页 |
| 2.2.2 适合扩增枣侧翼序列的SON-PCR方法的改进 | 第17-18页 |
| 2.2.3 枣ZJeEF-1α基因的PCR扩增 | 第18-20页 |
| 2.2.4 枣ZJeEF-1α的原核表达 | 第20-23页 |
| 2.2.5 枣ZJeEF-1α的半定量RT-PCR | 第23-24页 |
| 2.2.6 枣总蛋白的提取和不同时期ZJeEF-1α蛋白表达情况的检测 | 第24页 |
| 2.2.7 枣ZJeEF-1α转拟南芥过表达阳性植株的获得 | 第24-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-46页 |
| 3.1 适合扩增枣基因片段侧翼序列的SON-PCR方法改进 | 第27-29页 |
| 3.2 枣延伸因子1A(ZJeEF-1α)全长获得 | 第29-32页 |
| 3.2.1 枣RNA的提取和完整性分析 | 第29-30页 |
| 3.2.2 3’RACE扩增ZIeEF-1α3’端 | 第30-31页 |
| 3.2.3 利用本试验改进的SON-PCR技术扩增ZJeEF-1α5’端 | 第31页 |
| 3.2.4 枣ZJeEF-1α gDNA全长的扩增 | 第31-32页 |
| 3.3 枣ZJeEF-1α基因的生物信息学分析 | 第32-36页 |
| 3.3.1 ZJeEF-1α开放阅读框的预测 | 第32-33页 |
| 3.3.2 ZJeEF-1α基因保守结构域分析 | 第33-34页 |
| 3.3.3 ZIeEF-1α基因编码蛋白质的三级结构分析 | 第34-36页 |
| 3.4 枣ZJeEF-1α的原核表达分析 | 第36-40页 |
| 3.4.1 原核表达载体构建 | 第36-37页 |
| 3.4.2 ZJeEF-1α的原核表达 | 第37-39页 |
| 3.4.3 原核表达蛋白的电洗脱纯化和抗体特异性检测 | 第39-40页 |
| 3.5 ZJeEF-1α与枣疯病抗性的关系研究 | 第40-42页 |
| 3.5.1 ZJeEF-1α的半定量RT-PCR | 第40-41页 |
| 3.5.2 枣疯病病原对枣ZJeEF-1α蛋白表达的影响 | 第41-42页 |
| 3.6 枣ZJeEF-1α的遗传转化分析 | 第42-46页 |
| 3.6.1 转基因载体的构建和验证 | 第42-44页 |
| 3.6.2 转基因拟南芥的抗性检测 | 第44-46页 |
| 4 讨论 | 第46-49页 |
| 4.1 SON-PCR技术的改进 | 第46页 |
| 4.2 枣ZJeEF-1αcDNA全长获得方法 | 第46-47页 |
| 4.3 枣ZJeEF-1α基因原核表达和遗传转化研究 | 第47-48页 |
| 4.4 枣ZJeEF-1α基因和枣疯病抗性的关系 | 第48-49页 |
| 5 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第55-56页 |
| 作者简历 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
