| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 中英文缩写对照 | 第10-14页 |
| 前言 | 第14-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-26页 |
| 1 SPLUNC1研究进展 | 第16-22页 |
| 1.1 PLUNC蛋白家族 | 第16-17页 |
| 1.2 SPLUNC1基因和蛋白质 | 第17-19页 |
| 1.3 SPLUNC1的抗菌及抗支原体活性 | 第19-20页 |
| 1.4 SPLUNC1能够调节离子运输 | 第20页 |
| 1.5 SPLUNC1与疾病 | 第20-21页 |
| 1.6 SPLUNC1的作用机理 | 第21-22页 |
| 2 盘羊研究进展 | 第22-23页 |
| 2.1 盘羊的分布 | 第22页 |
| 2.2 盘羊研究及保护 | 第22-23页 |
| 3 巴什拜羊研究进展 | 第23页 |
| 3.1 巴什拜羊的培育及研究 | 第23页 |
| 3.2 巴什拜羊生物学特性 | 第23页 |
| 4 盘羊杂交羊研究进展 | 第23-24页 |
| 5 RACE技术研究进展 | 第24页 |
| 6 细胞凋亡研究进展 | 第24-26页 |
| 第二章 盘羊杂交羊SPLUNC1基因c DNA全长序列的扩增 | 第26-34页 |
| 1 材料与方法 | 第27-30页 |
| 1.1 试验动物、主要试剂及仪器 | 第27页 |
| 1.2 引物设计 | 第27页 |
| 1.3 总RNA的提取及片段序列的扩增 | 第27-28页 |
| 1.4 3’RACE | 第28-29页 |
| 1.5 5’RACE | 第29页 |
| 1.6 c DNA序列的获得及序列分析 | 第29-30页 |
| 2 结果与分析 | 第30-32页 |
| 2.1 片段序列、3’RACE和 5’RACE扩增结果 | 第30-31页 |
| 2.2 SPLUNC1基因全长c DNA序列拼接结果 | 第31-32页 |
| 3 讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 盘羊杂交羊SPLUNC1基因的生物信息学分析 | 第34-44页 |
| 1 材料与方法 | 第35-36页 |
| 1.1 材料 | 第35页 |
| 1.2 方法 | 第35-36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-42页 |
| 2.1 核酸序列及其编码氨基酸序列分析结果 | 第36页 |
| 2.2 亲/疏水性及跨膜结构分析结果 | 第36-38页 |
| 2.3 二级结构、三级结构预测结果 | 第38-40页 |
| 2.4 结构域分析结果 | 第40页 |
| 2.5 信号肽及亚细胞定位结果 | 第40-41页 |
| 2.6 系统进化分析结果 | 第41-42页 |
| 3 讨论 | 第42-44页 |
| 第四章 盘羊杂交羊r SPLUNC1的真核表达及纯化 | 第44-53页 |
| 1 材料和方法 | 第45-47页 |
| 1.1 实验动物及材料 | 第45页 |
| 1.2 引物设计 | 第45页 |
| 1.3 总RNA的提取及目的片段的扩增 | 第45页 |
| 1.4 重组表达质粒p PIC9K-SPLUNC1的获得 | 第45-46页 |
| 1.5 重组表达质粒p PIC9K- SPLUNC1的转化与重组菌株鉴定 | 第46页 |
| 1.6 重组GS115/p PIC9K- SPLUNC1的诱导表达与产物的鉴定 | 第46页 |
| 1.7 表达产物的纯化及Western Blot鉴定 | 第46-47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-51页 |
| 2.1 目的片段的扩增结果 | 第47页 |
| 2.2 重组表达质粒鉴定结果 | 第47-48页 |
| 2.3 重组菌株的PCR鉴定结果 | 第48-49页 |
| 2.4 r SPLUNC1的真核表达结果 | 第49-50页 |
| 2.5 r SPLUNC1的纯化与鉴定 | 第50-51页 |
| 3 讨论 | 第51-53页 |
| 第五章 盘羊杂交羊r SPLUNC1的抑菌活性研究 | 第53-61页 |
| 1 材料和方法 | 第53-54页 |
| 1.1 实验材料及主要仪器 | 第53-54页 |
| 1.2 实验方法 | 第54页 |
| 1.3 数据处理 | 第54页 |
| 2 结果与分析 | 第54-59页 |
| 2.1 对大肠杆菌的抑菌效果 | 第54-56页 |
| 2.2 对巴氏杆菌的抑菌效果 | 第56-57页 |
| 2.3 对肺炎链球菌的抑菌效果 | 第57-58页 |
| 2.4 对金黄色葡萄球菌抑菌效果 | 第58-59页 |
| 3 讨论 | 第59-61页 |
| 第六章 盘羊杂交羊r SPLUNC1对Mo的抑制作用 | 第61-70页 |
| 1 材料与方法 | 第62-63页 |
| 1.1 实验材料、试剂及仪器 | 第62页 |
| 1.2 平板菌落计数法 | 第62页 |
| 1.3 实时荧光定量PCR标准品制备 | 第62-63页 |
| 1.4 样品制备及FQ-PCR检测 | 第63页 |
| 1.5 数据处理 | 第63页 |
| 2 结果与分析 | 第63-69页 |
| 2.1 平板菌落计数结果 | 第63-65页 |
| 2.2 Mo 16S r RNA基因扩增结果 | 第65-66页 |
| 2.3 标准曲线的建立 | 第66-67页 |
| 2.4 Mo 16S r RNA定量结果 | 第67-69页 |
| 3 讨论 | 第69-70页 |
| 第七章 盘羊杂交羊r SPLUNC1对NE活性的影响 | 第70-75页 |
| 1 材料与方法 | 第70-72页 |
| 1.1 材料 | 第70页 |
| 1.2 试剂及仪器 | 第70-71页 |
| 1.3 中性粒细胞分离培养及刺激 | 第71页 |
| 1.4 对硝基苯胺标准曲线绘制 | 第71-72页 |
| 1.5 四肽底物法 | 第72页 |
| 1.6 数据分析 | 第72页 |
| 2 结果与分析 | 第72-74页 |
| 2.1 对硝基苯胺标准曲线 | 第72-73页 |
| 2.2 四肽底物法 | 第73-74页 |
| 3 讨论 | 第74-75页 |
| 第八章 盘羊杂交羊r SPLUNC1对致病菌感染的淋巴细胞凋亡的影响 | 第75-81页 |
| 1 材料和方法 | 第75-77页 |
| 1.1 材料 | 第75-76页 |
| 1.2 试剂及仪器 | 第76页 |
| 1.3 淋巴细胞分离及凋亡刺激 | 第76页 |
| 1.4 DNA ladder凋亡检测 | 第76-77页 |
| 1.5 Annexin V-FITC /PI双染法细胞凋亡检测 | 第77页 |
| 2 结果及分析 | 第77-79页 |
| 2.1 DNA ladder凋亡检测结果 | 第77页 |
| 2.2 Annexin V-FITC /PI双染法细胞凋亡检测结果 | 第77-79页 |
| 3 讨论 | 第79-81页 |
| 全文总结 | 第81页 |
| 创新点 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-90页 |
| 附录Ⅰ主要试剂配制 | 第90-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
| 作者简介 | 第93-94页 |
| 石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表 | 第94页 |
