| 学位论文数据集 | 第3-4页 |
| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 符号说明 | 第16-18页 |
| 第一章 绪论 | 第18-26页 |
| 1.1 蛋白质结构生物学简介 | 第18-21页 |
| 1.1.1 大肠杆菌表达系统概述 | 第19页 |
| 1.1.2 蛋白质纯化原理 | 第19-20页 |
| 1.1.3 蛋白质结晶原理 | 第20-21页 |
| 1.2 AtGPRAT2的研究意义 | 第21-26页 |
| 1.2.1 嘌呤生物合成途径 | 第22-23页 |
| 1.2.2 AtGPRAT2抑制剂DAS734的研究进展 | 第23-26页 |
| 第二章 AtGPRAT2克隆的构建 | 第26-34页 |
| 2.1 实验仪器与材料 | 第26-27页 |
| 2.2 实验常用溶液配制 | 第27-28页 |
| 2.3 实验方法 | 第28-33页 |
| 2.3.1 目的基因AtGPRAT2的PCR | 第28-29页 |
| 2.3.2 载体pET-22b和胶回收目的基因的酶切 | 第29-30页 |
| 2.3.3 连接 | 第30页 |
| 2.3.4 转化到感受态细胞 | 第30-31页 |
| 2.3.5 菌落PCR | 第31页 |
| 2.3.6 提质粒 | 第31-32页 |
| 2.3.7 质粒PCR | 第32-33页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第33-34页 |
| 第三章 AtGPRAT2蛋白质的试表达与纯化 | 第34-48页 |
| 3.1 实验仪器与材料 | 第35页 |
| 3.2 实验使用溶液配制 | 第35-39页 |
| 3.3 实验方法 | 第39-43页 |
| 3.3.1 AtGPRAT2试表达 | 第39-40页 |
| 3.3.2 AtGPRAT2亲和层析Ni柱纯化 | 第40-42页 |
| 3.3.3 AtGPRAT2凝胶层析AKTA纯化 | 第42-43页 |
| 3.4 实验结果与讨论 | 第43-48页 |
| 3.4.1 AtGPRAT2试表达结果 | 第43-44页 |
| 3.4.2 AtGPRAT2亲和层析Ni柱纯化结果 | 第44-45页 |
| 3.4.3 AtGPRAT2凝胶层析AKTA纯化结果 | 第45-48页 |
| 第四章 ATGPRAT2的晶体筛选、优化与结构解析 | 第48-60页 |
| 4.1 实验仪器与材料 | 第48-49页 |
| 4.2 实验中使用溶液配方 | 第49-50页 |
| 4.3 实验方法 | 第50-52页 |
| 4.3.1 晶体初筛 | 第50页 |
| 4.3.2 晶体优化 | 第50-52页 |
| 4.3.3 晶体的结构解析 | 第52页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第52-60页 |
| 4.4.1 晶体的初筛结果 | 第52-54页 |
| 4.4.2 晶体的优化结果 | 第54-55页 |
| 4.4.3 晶体的结构解析结果 | 第55-60页 |
| 第五章 ATGPRAT2抑制剂小分子DAS734的制备 | 第60-68页 |
| 5.1 实验仪器与材料 | 第60-61页 |
| 5.2 实验中使用溶液配方 | 第61-62页 |
| 5.3 实验方法 | 第62-64页 |
| 5.3.1 A的合成 | 第62-63页 |
| 5.3.2 B的合成 | 第63页 |
| 5.3.3 C的合成 | 第63-64页 |
| 5.3.4 D/E的合成 | 第64页 |
| 5.3.5 E到F的水解 | 第64页 |
| 5.4 实验结果与讨论 | 第64-68页 |
| 5.4.1 A的合成结果 | 第64-65页 |
| 5.4.2 B的合成结果 | 第65页 |
| 5.4.3 C的合成结果 | 第65-66页 |
| 5.4.4 D/E的合成结果 | 第66-67页 |
| 5.4.5 F的合成结果 | 第67-68页 |
| 第六章 ATGPRAT2蛋白晶体中泡抑制剂DAS734 | 第68-76页 |
| 6.1 实验仪器与材料 | 第68页 |
| 6.2 实验中使用溶液配方 | 第68页 |
| 6.3 实验方法 | 第68-70页 |
| 6.3.1 点晶体时加入抑制剂DAS734 | 第69页 |
| 6.3.2 捞晶体时加入抑制剂DAS734 | 第69-70页 |
| 6.4 实验结果与讨论 | 第70-76页 |
| 6.4.1 点晶体时加入抑制剂DAS734结果 | 第70页 |
| 6.4.2 捞晶体时加入抑制剂DAS734结果 | 第70-76页 |
| 第七章 突变体R264K的表达与纯化 | 第76-82页 |
| 7.1 实验仪器与材料 | 第76页 |
| 7.2 实验中溶液配方 | 第76页 |
| 7.3 实验方法 | 第76-78页 |
| 7.3.1 AtGPRAT2突变R264K | 第76-77页 |
| 7.3.2 AtGPRAT2突变R264K试表达 | 第77-78页 |
| 7.3.3 AtGPRAT2突变R264K纯化 | 第78页 |
| 7.4 实验结果与讨论 | 第78-82页 |
| 7.4.1 AtGPRAT2突变R264K结果 | 第78页 |
| 7.4.2 AtGPRAT2突变R264K试表达结果 | 第78-79页 |
| 7.4.3 AtGPRAT2突变R264K纯化结果 | 第79-82页 |
| 第八章 结论与建议 | 第82-84页 |
| 8.1 结论 | 第82-83页 |
| 8.2 建议 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-88页 |
| 致谢 | 第88-90页 |
| 研究成果及发表的学术论文 | 第90-92页 |
| 作者和导师简介 | 第92-93页 |
| 附件 | 第93-94页 |
