符号说明 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1. 引言 | 第12-25页 |
1.1 马铃薯产业发展 | 第12-13页 |
1.1.1 马铃薯的来源及特性 | 第12页 |
1.1.2 马铃薯的产业现状与主粮化 | 第12-13页 |
1.1.3 马铃薯的产业所面临的问题 | 第13页 |
1.2 马铃薯晚疫病 | 第13-17页 |
1.2.1 致病疫霉 | 第13页 |
1.2.2 马铃薯晚疫病的病原菌基本病原形态 | 第13-14页 |
1.2.3 马铃薯晚疫病菌A1与A2交配型的研究 | 第14页 |
1.2.4 马铃薯晚疫病菌的生活史 | 第14-15页 |
1.2.5 马铃薯晚疫病的病害特征 | 第15页 |
1.2.6 马铃薯晚疫病菌的传播途径 | 第15-16页 |
1.2.7 马铃薯晚疫病的发病条件 | 第16页 |
1.2.7.1 气候条件 | 第16页 |
1.2.7.2 品种及耕作水平 | 第16页 |
1.2.8 马铃薯晚疫病的防治措施 | 第16-17页 |
1.2.8.1 加强栽培管理 | 第16页 |
1.2.8.2 化学防治 | 第16-17页 |
1.2.8.3 品种改良防治 | 第17页 |
1.2.8.4 生物杀菌剂防治 | 第17页 |
1.2.9 马铃薯晚疫病菌生理小种变异 | 第17页 |
1.3 植物与微生物互作 | 第17-20页 |
1.3.1 植物与病原互作类型 | 第17-18页 |
1.3.2 R基因与Avr基因的互作 | 第18页 |
1.3.3 植物免疫系统 | 第18-20页 |
1.3.3.1 PAMPs触发的植物免疫反应 | 第19页 |
1.3.3.2 效应分子触发的免疫反应 | 第19-20页 |
1.4 马铃薯晚疫病菌抗性分子遗传学机制 | 第20-22页 |
1.4.1 垂直抗性 | 第20-21页 |
1.4.2 水平抗性 | 第21-22页 |
1.5 植物病原卵菌效应分子的研究进展 | 第22-24页 |
1.5.1 RXLR类效应分子的功能研究 | 第22-24页 |
1.5.1.1 RXLR类效应分子的激发子功能研究 | 第23页 |
1.5.1.2 PiAVR3a可以抑制INF1诱导的PCD | 第23页 |
1.5.1.3 大豆疫霉效应分子Avh240可以抑制INF1、Avh238、Avh241诱导的PCD | 第23-24页 |
1.6 本实验的目的意义 | 第24-25页 |
2.材料与方法 | 第25-34页 |
2.1 试验材料 | 第25页 |
2.2 试验方法 | 第25-34页 |
2.2.1 卵菌菌株基因组DNA的提取 | 第25页 |
2.2.2 植物表达载体的构建 | 第25-31页 |
2.2.2.1 引物设计 | 第25页 |
2.2.2.2 PCR扩增目的片段 | 第25-26页 |
2.2.2.3 胶回收DNA目的片段(试剂盒) | 第26-27页 |
2.2.2.4 目的片段与pGR106载体的酶切与连接 | 第27页 |
2.2.2.5 感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
2.2.2.6 热激转化大肠杆菌DH5α | 第28页 |
2.2.2.7 菌落PCR | 第28-29页 |
2.2.2.8 提取重组载体的大肠杆菌的质粒 | 第29-30页 |
2.2.2.9 质粒PCR | 第30页 |
2.2.2.10 电击转化农杆菌GV3101 | 第30-31页 |
2.2.3 在本氏烟上瞬时表达 | 第31页 |
2.2.4 对效应分子同源基因序列的分析 | 第31页 |
2.2.5 基因的定点突变 | 第31-32页 |
2.2.6 马铃薯晚疫病菌株的活化及提高孢子囊生长量 | 第32页 |
2.2.7 马铃薯无毒苗的茎段培养 | 第32页 |
2.2.8 马铃薯晚疫病菌孢子悬浮液的制备 | 第32页 |
2.2.9 马铃薯晚疫病菌接种供试植株 | 第32-33页 |
2.2.10 基因瞬时表达的植物总RNA的提取 | 第33页 |
2.2.11 反转录PCR | 第33页 |
2.2.12 半定量检测 | 第33-34页 |
3.结果与分析 | 第34-43页 |
3.1 提取13个病原卵菌的全基因组DNA并扩增目的片段 | 第34页 |
3.2 构建13个PITG_21645.2 同源序列的瞬时表达载体 | 第34-35页 |
3.3 13 个PITG_21645.2 同源序列的序列分析 | 第35-36页 |
3.4 PITG_21645.2 同源基因抑制INF1激发PCD的功能分析 | 第36-37页 |
3.5 对PITG_21645.2MP903的定点突变 | 第37-38页 |
3.6 PITG_21645.2 同源序列定点突变的功能验证 | 第38-39页 |
3.7 PITG_21645.2 抑制BAX和PsojNIP在本氏烟激起的PT-PCD | 第39-40页 |
3.8 PITG_21645.2 抑制大豆疫霉效应分子Avh238在本氏烟激起的ET-PCD | 第40-41页 |
3.9 PITG_21645.2 促进致病疫霉在烟草上的侵染 | 第41-43页 |
4.讨论 | 第43-46页 |
4.1 对RXLR类效应分子的研究 | 第43页 |
4.2 关于RXLR效应分子对抑制植物PTI和ETI的研究 | 第43-44页 |
4.3 病原菌可以通过基因变异或突变增强致病性 | 第44-45页 |
4.4 下一步研究的问题 | 第45-46页 |
5. 结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-54页 |
附录Ⅰ 实验所用培养基、缓冲液配方 | 第54-56页 |
附录Ⅱ 常用化学试剂、所属公司 | 第56-57页 |
附录III 实验室常用仪器及所属公司 | 第57-58页 |
附录IV PITG_21645.2 同源基因序列 | 第58-61页 |
附录V 实验设计引物序列 | 第61-62页 |
致谢 | 第62页 |