摘要 | 第8-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第14-22页 |
1.1 棉花的基本概述 | 第14-18页 |
1.1.1 棉花的起源及生长发育过程 | 第14页 |
1.1.2 棉花的重要作用及在我国的生产现状 | 第14-15页 |
1.1.3 棉花产量的构成因素 | 第15-16页 |
1.1.4 棉花种子和纤维的发育 | 第16-18页 |
1.2 BRs的信号传导 | 第18-19页 |
1.3 MAKR家族相关研究 | 第19-22页 |
第二章 引言 | 第22-24页 |
2.1 立题依据 | 第22-23页 |
2.2 技术路线 | 第23-24页 |
第三章 材料与方法 | 第24-34页 |
3.1 材料 | 第24-28页 |
3.1.1 植物材料 | 第24页 |
3.1.2 菌株和载体 | 第24页 |
3.1.3 主要溶液及培养基配制 | 第24-28页 |
3.2 主要实验方法 | 第28-34页 |
3.2.1 质粒提取和酶切 | 第28页 |
3.2.2 DNA片段回收和连接 | 第28-29页 |
3.2.3 大肠杆菌感受态细胞制备与转化 | 第29页 |
3.2.4 农杆菌感受态细胞制备与转化 | 第29-30页 |
3.2.5 棉花遗传转化 | 第30页 |
3.2.6 GUS组织化学染色 | 第30-31页 |
3.2.7 棉花基因组DNA的提取 | 第31页 |
3.2.8 棉花总RNA的提取及cDNA一链的合成 | 第31页 |
3.2.9 实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测基因相对表达量 | 第31页 |
3.2.10 棉花胚珠离体培养 | 第31-32页 |
3.2.11 转基因棉花 0 DPA胚珠的扫描电镜观察 | 第32页 |
3.2.12 转基因棉花成熟种子中可溶性总糖提取及含量测定 | 第32-33页 |
3.2.13 引物合成表 | 第33-34页 |
第四章 结果与分析 | 第34-58页 |
4.1 GhMAKR3基因的克隆与生物信息学分析 | 第34-37页 |
4.1.1 GhMAKR3基因cDNA序列和推导的氨基酸序列 | 第34页 |
4.1.2 GhMAKR3氨基酸序列的同源性分析 | 第34-36页 |
4.1.3 GhMAKR3氨基酸序列亲疏水性分析 | 第36页 |
4.1.4 GhMAKR3跨膜结构分析 | 第36-37页 |
4.2 GhMAKR3基因的表达特性分析 | 第37-39页 |
4.2.1 GhMAKR3在棉花不同组织和器官中的表达特性分析 | 第37页 |
4.2.2 GhMAKR3在不同发育时期胚珠中的表达特性分析 | 第37-38页 |
4.2.3 GhMAKR3在不同发育时期纤维中的表达特性分析 | 第38-39页 |
4.2.4 GhMAKR3在不同发育时期铃壳中的表达特性分析 | 第39页 |
4.2.5 小结 | 第39页 |
4.3 GhMAKR3基因上游启动子调控序列的克隆和分析 | 第39-42页 |
4.3.1 GhMAKR3基因上游启动子调控序列的分析 | 第39-40页 |
4.3.2 pGhMAKR3::GUS转基因棉花阳性植株鉴定 | 第40-41页 |
4.3.3 pGhMAKR3::GUS转基因棉花组织化学染色 | 第41页 |
4.3.4 小结 | 第41-42页 |
4.4 GhMAKR3基因对BRs的响应 | 第42页 |
4.4.1 BL、BRZ对GhMAKR3基因表达的影响 | 第42页 |
4.5 超量表达GhMAKR3基因对棉花生长发育的影响 | 第42-49页 |
4.5.1 S7启动子调控的超量表达GhMAKR3转基因棉花的获得 | 第42-43页 |
4.5.2 超量表达GhMAKR3基因对棉铃生长发育的影响 | 第43-48页 |
4.5.3 超量表达GhMAKR3基因对棉花产量和纤维品质的影响 | 第48-49页 |
4.5.4 小结 | 第49页 |
4.6 组成型下调GhMAKR3基因表达对棉花生长发育的影响 | 第49-58页 |
4.6.1 Ca MV35S启动子调控的GhMAKR3RNAi转基因棉花的获得 | 第49-50页 |
4.6.2 下调GhMAKR3基因表达对棉铃生长发育的影响 | 第50-54页 |
4.6.3 下调GhMAKR3基因表达对棉花产量和纤维品质的影响 | 第54-56页 |
4.6.4 小结 | 第56-58页 |
第五章 讨论 | 第58-62页 |
5.1 GhMAKR3基因的棉铃优势表达特性 | 第58页 |
5.2 GhMAKR3基因对BRs的响应及两者的负相关性 | 第58-59页 |
5.3 下调GhMAKR3基因表达促使糖向种子内转运 | 第59-62页 |
第六章 主要结论和创新点 | 第62-64页 |
6.1 主要结论 | 第62页 |
6.2 创新点 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-70页 |
附录 | 第70-74页 |
附录1 表达载体构建流程图 | 第70-72页 |
附录2 缩略词英汉对照表 | 第72-73页 |
附录3 攻读硕士学位期间发表论文 | 第73-74页 |
致谢 | 第74-75页 |