符号及缩略词 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 文献综述 | 第13-25页 |
1.1 病原学 | 第13-16页 |
1.1.1 形态学 | 第13-14页 |
1.1.2 病毒复制 | 第14页 |
1.1.3 ALV的分型 | 第14-15页 |
1.1.4 基因组结构 | 第15-16页 |
1.1.5 理化特性 | 第16页 |
1.2 流行病学特点 | 第16-18页 |
1.2.1 自然宿主 | 第16页 |
1.2.2 发生与分布 | 第16-17页 |
1.2.3 传播 | 第17-18页 |
1.3 病理变化和致瘤机制 | 第18-19页 |
1.3.1 病理变化 | 第18页 |
1.3.2 制瘤机制 | 第18-19页 |
1.4 ALV-J的诊断及检测 | 第19-21页 |
1.4.1 ALV-J的分离鉴定 | 第19-20页 |
1.4.2 ELISA检测 | 第20页 |
1.4.3 聚合酶链式反应(PCR) | 第20-21页 |
1.5 防制 | 第21-22页 |
1.6 野生鸟类基本资料 | 第22-24页 |
1.6.1 野生鸟类的基本概念 | 第22页 |
1.6.2 候鸟的迁徙及其特点 | 第22页 |
1.6.3 候鸟迁徙的路线 | 第22-23页 |
1.6.4 候鸟携带病毒 | 第23页 |
1.6.5 实验野生鸟类 | 第23-24页 |
1.7 本研究的目的及意义 | 第24-25页 |
2 材料与方法 | 第25-39页 |
2.1 材料 | 第25-27页 |
2.1.1 仪器设备 | 第25页 |
2.1.2 分子生物学试剂 | 第25页 |
2.1.3 相关试剂 | 第25-26页 |
2.1.4 鸡胚成纤维细胞(CEF) | 第26-27页 |
2.2 实验方法 | 第27-35页 |
2.2.1 样本采集 | 第27页 |
2.2.2 样本处理 | 第27-28页 |
2.2.3 样本RNA的提取 | 第28页 |
2.2.4 cDNA的合成 | 第28-29页 |
2.2.5 荧光定量PCR检测 | 第29-30页 |
2.2.6 RT-PCR检测 | 第30-33页 |
2.2.7 RT-PCR产物的回收 | 第33页 |
2.2.8 胶回收产物的连接 | 第33页 |
2.2.9 连接产物的转化 | 第33-34页 |
2.2.10 阳性克隆的筛选和鉴定 | 第34页 |
2.2.10.1 单克隆的扩增培养 | 第34页 |
2.2.10.2 菌液的鉴定 | 第34页 |
2.2.10.3 阳性菌液的测序 | 第34页 |
2.2.11 序列同源性和亲源性分析 | 第34-35页 |
2.3 病毒的分离鉴定 | 第35-39页 |
2.3.1 鸡胚接种 | 第35页 |
2.3.2 一代病毒的分离 | 第35-36页 |
2.3.3 鸡胚传代 | 第36页 |
2.3.4 细胞培养 | 第36页 |
2.3.5 DNA的提取 | 第36-37页 |
2.3.6 PCR鉴定 | 第37-38页 |
2.3.7 克隆测序及序列分析 | 第38页 |
2.3.8 细胞上清ALV-P27抗原的ELISA检测 | 第38-39页 |
3 实验结果 | 第39-46页 |
3.1 2016年江苏盐城地区野生鸟类及活禽交易市场中ALV-J的荧光定量PCR检测 | 第39-41页 |
3.1.1 样本采集背景及数量 | 第39-40页 |
3.1.2 荧光定量PCR检测野生鸟类及活禽市场活禽中ALV-J的阳性率 | 第40-41页 |
3.2 RT-PCR检测野生鸟类及活禽市场中ALV-J的阳性率 | 第41-42页 |
3.3 野生鸟类及活禽市场样本中ALV-J GP85片段的PCR检测及序列分析 | 第42-43页 |
3.3.1 活禽市场样本中ALV-J GP85片段的扩增结果 | 第42页 |
3.3.2 活禽市场样本中ALV-J GP85片段的测序结果及分析 | 第42-43页 |
3.4 活禽市场样本中ALV-J的分离鉴定 | 第43-45页 |
3.4.1 活禽市场样本中ALV-J在鸡胚上的增殖 | 第43页 |
3.4.2 活禽市场样本中ALV-J在CEF上的增殖及ELISA检测 | 第43页 |
3.4.3 活禽市场样本中ALV-J的鉴定 | 第43-45页 |
3.5 野生鸟类样本中ALV-J的分离鉴定 | 第45-46页 |
3.5.1 野生鸟类样本中ALV-J在SPF胚上的增殖 | 第45-46页 |
3.5.2 野生鸟类样本中ALV-J在CEF上的增殖及ELISA检测 | 第46页 |
3.5.3 野生鸟类样本中ALV-J的鉴定 | 第46页 |
4 讨论 | 第46-49页 |
5 结论 | 第49页 |
6 创新点 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
攻读硕士期间发表论文及参加实践活动 | 第57页 |